专利名称：载体介导的分布系统的制作方法
技术领域：
本发明提供了测定高、中和低亲油值(lipophilicity value)的方法。
背景技术：
亲油性是药物发现中一种重要的分子性质。对于与一些药学过程如膜渗透、溶解度、分布容积、代谢稳定性和蛋白结合的相关性而言，对药物亲油性的精确了解是很有用的。亲油性用log P(中性分子的辛醇-水分配系数)或log D(荷电分子的辛醇-水分布系数)表示。
通常，亲油性通过常规的摇瓶法(M.M.Abraham，H.S.Chadha，J.P.Dixon和A.J.Leo.氢键.第9部分.溶质在水和各种醇之间的分配(Hydrogen bonding.Part 9.The partition of solutes between water andvarious alcohols).Phys.Org.Chem.7712-716(1994)来测定。当手动进行时，这种方法十分费时(每天仅可测定2-5个化合物)。但是，由于快速的类似物合成和组合化学的发展，药物发现中制备出的化合物的数目急剧增加。这种情况需要快速且有效的测定化合物亲油性的方法。
此外，现有技术中的方法不适用于溶解度低的化合物。从2002年以来，由于化合物在参比溶液中沉淀或水相中的样品浓度低，约35％的log D测量以失败而告终(来源RODIN和SPC数据库，2004)。另一方面，需要log D＞4的高通量测量，对于要求高亲油性的药物目标而言尤其存在这种需要。
因此，需要一种快速的、可测定低溶解度化合物的亲油性的方法。
发明内容
本发明涉及测定感兴趣的化合物的亲油性的方法，其包括a)提供一个层，b)用溶剂A浸渍所述的层，c)将感兴趣的化合物施加于被浸渍的层，d)加入溶剂B，e)在已经达到分布平衡后，取出溶剂B，和f)测定感兴趣的化合物在各溶剂相的至少一个相中的量。
优选地，测定感兴趣的化合物在粘附于所述层上的溶剂相中的量。
感兴趣的化合物可以是任何化学或生物学化合物。感兴趣的化合物可以是例如有机化合物、蛋白质、肽或核酸。有机化合物还可包括有机-无机分子。本文所用的术语有机-无机分子指的是其中至少一个无机原子与碳原子相连接的有机分子。无机原子可以是金属原子，如硅(Si)或锗(有机金属化合物，即有机分子的Si或Ge的bioisoester)。
感兴趣的化合物可以是固体或液体。可以将感兴趣的化合物溶解于适宜的溶剂如例如DMSO(二甲基亚砜)中。感兴趣的化合物可以是亲脂性化合物或亲水性化合物。用于亲水性化合物的适宜溶剂优选地是极性溶剂；用于亲脂性化合物的适宜溶剂优选地是非极性溶剂。
本文所用的术语“层”指的是溶剂的载体，该层能完全吸收溶剂。术语“完全吸收”意指施加于该层上的溶剂(即溶剂A)与所述的层结合，不会渗漏到其它相(即溶剂B)中。
所述的层具有空穴。这些空穴可以是孔、腔、洞或缝。这些空穴可以由载体材料形成，如一种情况是例如由形成网状物的纤维形成。这些空穴还可以例如通过用离子穿透所述的层而产生。优选地，所述的层是可渗透性的。
所述的层可以是例如网状物或膜状物(例如Westran Clear Signal膜状箔(Whatman)、Immobilon-P PVDF(Millipore)、PVDF-Plus、TransferMembrane(Koma Biotech))。优选地，所述的层是膜状物。如果溶剂是非极性的，则载体材料优选地是疏水性的，如聚偏二氟乙烯(polyvinyldenfluorid)(PVDF)、聚四氟乙烯(PTFE)、环烯烃共聚物(COC)、聚丙烯(PP)或聚碳酸酯(PC)。如果溶剂是极性的，则载体材料优选地是亲脂性的，如醋酸纤维素、玻璃纤维、亲水性聚偏二氟乙烯(PVDF)、亲水化的聚碳酸酯和其它亲水化的滤料。
溶剂A可以是非极性或极性溶剂。溶剂B也可以是非极性或极性溶剂。溶剂A与溶剂B不可混溶或几乎不可混溶。如果溶剂A是非极性溶剂，则溶剂B是极性溶剂，如果溶剂A是极性溶剂，则溶剂B是非极性溶剂。
本文所用的术语“非极性溶剂”指的是疏水性溶剂。非极性溶剂与极性溶剂如例如水不可混溶或几乎不可混溶。亲脂性化合物通常具有在非极性溶剂中比在极性溶剂中更易溶的倾向。非极性溶剂的介电常数通常比水的介电常数低。疏水性溶剂的实例有有机溶剂，如辛醇或脂族烃(十二烷、十六烷或卤化烃)。
本文所用的术语“亲水性溶剂”或“极性溶剂”指的是含有电荷分布不均等并因此荷电的分子的溶剂。极性溶剂与非极性或疏水性溶剂不可混溶或者几乎不可混溶。极性或可电离的化合物具有在极性溶剂中更易溶的倾向。极性溶剂可以是例如亲水性缓冲液，其可以由在水中的缓冲盐(即被缓冲为pH 7.4的磷酸盐或TAPSO盐的水溶液)组成，在感兴趣的pH范围内具有高缓冲容量。感兴趣的pH可以是pH 0至14，优选pH是约7.4。
本文所用的术语“分布平衡”指的是在特定的时间后，感兴趣的化合物在极性溶剂和非极性溶剂之间分布平衡。优选地，在0.1-24小时之间达到分布平衡，更优选地在2小时内达到分布平衡。
可以通过将溶剂施加于所述的层来对该层进行浸渍，从而所述的层能完全吸收所述溶剂。可以用分配器来施加溶剂。其它方法是本领域已知的，如例如机器人液体处理系统，其使得可以将0.1μl-50μl/cm2的有机改性剂分配到所述层的表面上，所述层可以是滤膜。
可以通过一些方法来测定感兴趣的化合物在溶剂(溶剂A或溶剂B)中的量，所述的方法包括但不限于紫外线光谱法和/或质谱法、毛细管电泳(CE)和高效液相色谱法(HPLC)。
优选地，所述的层被附着在管的底部。所述的管包括但不限于透明小容器、孔或多孔板。优选地，所述的层附着于其上的所述的管是欧洲专利申请EP 1232792中所述的管，将该专利申请全部引入本文作为参考。更优选地，所述的层附着于其上的所述的管是EP 05111522.8中所述的管，将该专利申请全部引入本文作为参考。
所述的层附着于其上的优选的透明小容器具有上部室17和下部室18，17和18具有一个共同的通过两个室中心的对称轴Y-Y。上部室17和下部室18各自基本为圆柱形。上部室17的在其中央部分的横截面大于下部室18的横截面(图5)。
这种透明小容器具有带有开放的下端23的下部室18和带有开放的顶端24和环状底部壁25的上部室17。该底部壁具有中央环状开口26，其连接所述的上部室17和下部室18(图5)。
底部壁25的内表面27是圆锥面的一部分，其横截面与透明小容器的对称轴Y-Y形成约80度的角，从而使得所述上部室17和所述下部室18之间的横截面急剧改变。
下列材料是能用于制造透明小容器的材料的实例醋酸纤维素、聚碳酸酯、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚砜、聚苯乙烯、聚丙烯(PP)、环状烯烃共聚物(COC)。也可以用具有相似收缩系数(shrinkage coefficient)(与注射成型有关)和熔化性质的材料来制造所述的管。
优选地，透明小容器是阵列11的一部分(图4)。所述阵列中的各透明小容器具有相同的形状和大小，并且相邻的透明小容器通过单连结板(single web)15、16彼此相连。这些单连结板15、16各自具有弯曲的形状。
形成透明小容器阵列11的一部分的每一个透明小容器12的对称轴Y-Y基本位于一个相同的平面A-A上，该平面是透明小容器阵列11的对称面。阵列11的中间透明小容器12的上部通过第一单连结板15与位于中间透明小容器12的一侧的相邻透明小容器13相连，并且通过第二单连结板16与位于中间透明小容器12另一侧的相邻透明小容器14相连。第一单连结板15和第二单连结板16位于所述对称面A-A的相反侧。
连结板15、16是柔韧性的，因此无论透明小容器阵列11的长度如何变化，它们均有助于将透明小容器插入到透明小容器固定器中，所述的长度变化是由于通过注射成型制造透明小容器阵列11所用的不同材料的收缩系数不同而造成的。
透明小容器阵列11中的一些透明小容器具有锁扣21和22(图4B)，其是透明小容器的固有部分并且用于将透明小容器以可拆卸的方式与透明小容器固定器52相连。在另一个优选的实施方案中，透明小容器固定器52基本为矩形并且具有四个中心定位肋状物(centering rib)，它们各自位于透明小容器固定器52的一个角的外表面上(图8)。
透明小容器阵列11中的一些透明小容器具有放射状取向的肋状物19、29(图4B)，它们用于将透明小容器精确定位入透明小容器固定器32的开口中。
透明小容器阵列11是通过将所选择的第一种塑性材料注射成型而制成的，所述的第一种塑性材料特别适合于与所选择的构成所述的层的第二种材料组合使用。调节该层使其与透明小容器阵列中的各透明小容器紧密附着在一起以覆盖各透明小容器的至少一个开口。
优选对用于制造透明小容器阵列的注射成型装置进行配置和尺寸调整以便能用一种相同的装置对具有不同收缩系数的不同材料进行注射成型。
下列材料是能用于制造透明小容器阵列11的材料的实例醋酸纤维素、聚碳酸酯、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚砜、聚苯乙烯、聚丙烯(PP)。也可以用具有相似收缩系数(与注射成型有关)和熔化性质的材料制造透明小容器阵列11。
所述的层与各透明小容器的附着可以例如通过将所述的层与透明小容器粘合在一起或通过焊接方法来实现。附着在各单个透明小容器上的层仅与该单个透明小容器附着在一起，不与任何其它透明小容器或附着在不同透明小容器上的箔相连。
所述层与透明小容器的附着必需确保这些组成部分的介质紧密连接(液体紧密连接)。
所述的层附着于其上的更优选的管是具有上部室37和下部室38以及通过两个室中心的共同对称轴Y-Y的透明小容器。上部室37和下部室38各自基本为圆柱形。上部室37的在其中央部分的横截面大于下部室38的横截面(图7A)。
下部室38具有开放的下端33。上部室37具有开放的顶端34和环状底部壁35。该底部壁具有中央环状开口36，其连接所述的上部室37和下部室38。
底部壁45的内表面是圆锥面的一部分，其横截面与该透明小容器的对称轴Y-Y形成约80度的角，从而使得所述上部室37和所述下部室38之间的横截面急剧改变。
透明小容器阵列31是通过将所选择的第一种塑性材料注射成型而制成的，所述的第一种塑性材料特别适合于与所选择的构成所述层的第二种材料组合使用。调节该层使其与透明小容器阵列中的至少一个透明小容器紧密附着在一起以覆盖透明小容器的至少一个开口。对于所述的第一种塑性材料和所述的第二种塑性材料而言，可以使用相同的塑性材料。
所述的层与一个或多个透明小容器的附着可以例如通过将所述的层与一个或多个透明小容器粘合在一起或通过焊接方法来实现。附着在一个单个透明小容器上的层仅与该单个透明小容器附着在一起，不与任何其它透明小容器或附着在不同透明小容器上的箔相连。
所述层与透明小容器的附着必需确保这些组成部分的介质紧密连接(液体和/或气体紧密连接)。
阵列31中的每一个透明小容器均具有相同的形状和尺寸，相邻的透明小容器通过单连结板35、36彼此相连。这些单连结板35、36各自是柔韧性的并且具有弯曲的形状(图6)。
形成透明小容器阵列31的一部分的每一个透明小容器32的对称轴Y-Y基本位于一个相同的平面A-A上，该平面是透明小容器阵列31的对称面。阵列31中的中间透明小容器32的上部通过第一单连结板35与位于中间透明小容器32一侧的相邻透明小容器33相连，并且通过第二单连结板36与位于中间透明小容器32另一侧的相邻透明小容器34相连。
单连结板35、36是柔韧性的，因此无论透明小容器阵列31的长度如何变化，它们均有助于将透明小容器插入到透明小容器固定器、例如透明小容器固定器52中，所述的长度变化是由于通过注射成型制造透明小容器阵列31所用的不同材料的收缩系数不同而造成的。这些单连结板35、36可以位于平面A-A的两个相对侧面的任何一个侧面(图5)。
阵列31中的至少两个透明小容器具有用于将透明小容器以可拆卸的方式与透明小容器固定器相连的手段，该手段是透明小容器的一个固有部分。优选地，这些连接手段是锁扣41和42。在一个优选的实施方案中，透明小容器固定器基本为矩形并且具有四个中心定位肋状物，它们各自位于透明小容器固定器、如图8中的透明小容器固定器52的一个角的外表面上。
优选地，具有连接手段的透明小容器在阵列中的分布是均衡的。如果两个透明小容器具有连接手段，则优选地第一个和最后一个透明小容器各自具有连接手段，或者第二个和倒第二个透明小容器各自具有连接手段，或者第三个和倒第三个透明小容器各自具有连接手段等。
在一个优选的实施方案中，在八个透明小容器的阵列中，第一个透明小容器、第三个透明小容器、第四个、第五个、第六个和第八个透明小容器各自具有连接手段。
正如可从图8领会到的那样，按照透明小容器固定器52排列的透明小容器的二维阵列51具有开口54的矩阵阵列53，所述的开口54用于接受至少一种具有上述特征的线型透明小容器阵列11、31中的透明小容器12、32。透明小容器阵列11、31中的各透明小容器12、32具有恰好适配入透明小容器固定器52的开口54中的形状和尺寸。
如图9所示，可以将两个或更多个各自具有上文参照图8所描述的结构的二维透明小容器阵列51和81彼此组套，以形成三维透明小容器阵列。对该类阵列的组成部分进行配置和尺寸调整以便在其各自固定器中具有相同的相对位置的透明小容器与其对称轴相符地精确地一个定位于另一个上面，所述透明小容器中的一个占据上部透明小容器91的位置，另一个占据下部透明小容器92的位置。在一个优选的实施方案中，各上部透明小容器91的下部的一部分位于相应的下部透明小容器92的上部室内，上部透明小容器91的下端与下部透明小容器92的上部室的底部壁之间具有预定的距离。
如图10所示，对于标准的多孔板而言，也可以将具有上文参照图8所描述的结构的二维透明小容器阵列51组套在标准固定器板85上。
本发明的一个实施方案涉及一种测定感兴趣的亲脂性化合物的亲油性的方法，其包括a)提供一个疏水性层，b)用非极性溶剂浸渍所述的层，c)将感兴趣的化合物施加于被浸渍的层，d)加入亲水性溶剂，e)在已经达到分布平衡后，取出亲水性溶剂，和f)测定感兴趣的化合物在粘附于疏水性层上的亲脂性溶剂相中的量。
本文所用的术语“疏水性层”指的是非极性溶剂的载体。优选地，疏水性层是疏水性膜。该类膜可以以疏水性材料的网状物形式或具有孔的层的形式形成。优选地，孔径或网目尺寸为0.01-100μm。疏水性膜载体材料包括但不限于PVDF、PTFE、环状烯烃共聚物(COC)、PP或PC。
感兴趣的亲脂性化合物可以是例如多环芳族或脂族烃、脂溶性维生素、疏水性药物如杀真菌剂、包含卤素的芳族或脂族烃、包含氮和氧的芳族或脂族烃。
非极性溶剂与极性溶剂不可混溶或者几乎不可混溶。优选的非极性溶剂是辛醇(辛-1-醇)。优选的极性溶剂是水或缓冲液。
本发明的另一个实施方案涉及一种测定感兴趣的亲水性化合物的亲油性的方法，其包括a)提供一个亲水性层，b)用极性溶剂浸渍所述的层，
c)将感兴趣的化合物施加于被浸渍的层，d)加入非极性溶剂，e)取出非极性溶剂，和f)测定感兴趣的化合物在粘附于亲水性层上的亲水性相中的量。
本文所用的术语“亲水性层”指的是极性溶剂的载体。优选地，亲水性层是亲水性膜。该类膜可以以亲水性材料的网状物形式或以具有孔的层的形式形成。优选地，孔径或网目尺寸为0.01-100μm。亲水性载体材料包括但不限于醋酸纤维素、玻璃纤维、亲水性聚偏二氟乙烯(PVDF)、亲水化的聚碳酸酯和其它亲水化的滤料。
非极性溶剂与极性溶剂不可混溶或几乎不可混溶。优选的非极性溶剂是辛醇(辛-1-醇)。优选的极性溶剂是水或缓冲液。
本发明还涉及被溶剂浸渍的层用于测定感兴趣的化合物的亲油性的用途。
所述的层可以是疏水性层或亲水性层。所述的溶剂可以是非极性(疏水性)或极性(亲水性)溶剂。如果所述的溶剂是非极性溶剂，则所述的层优选地是疏水性的。如果所述的溶剂是极性溶剂，则所述的层优选地是亲水性的。
感兴趣的化合物可以是任何化学或生物学化合物。感兴趣的化合物可以是例如有机化合物、蛋白质、肽或核酸。有机化合物还可包括有机-无机分子。本文所用的术语有机-无机分子指的是其中至少一个无机原子与碳原子相连接的有机分子。无机原子可以是金属原子，如硅(Si)或锗(有机金属化合物，即有机分子的Si或Ge的bioisoester)。
感兴趣的化合物可以是固体或液体。可以将感兴趣的化合物溶解于适宜的溶剂如例如DMSO(二甲基亚砜)中。用于亲水性化合物的适宜溶剂优选地是极性溶剂；用于亲脂性化合物的适宜溶剂优选地是非极性溶剂。
感兴趣的化合物可以是亲脂性化合物或亲水性化合物。如果感兴趣的化合物是亲脂性化合物，则所述的层可以是被非极性溶剂浸渍的疏水性层。优选地，所述的非极性溶剂是辛醇。如果化合物是亲水性化合物，则所述的层可以是被极性溶剂浸渍的亲水性层。优选地，所述的非极性溶剂是水或缓冲液。
在一个优选的实施方案中，所述的层附着在管的底部。所述的管包括但不限于透明小容器、孔或多孔板。更优选地，所述的疏水性层附着在欧洲专利申请EP 1232792或EP 05111522.8中所述的管上，将这两个专利申请全部引入本文作为参考。优选的管在该文件的另一处有描述。
下列材料是能用于制造管的材料的实例醋酸纤维素、聚碳酸酯、聚偏二氟乙烯(PVDF)、聚砜、聚苯乙烯、聚丙烯(PP)或环状烯烃共聚物(COC)。也可以用具有相似收缩系数(与注射成型有关)和熔化性质的材料来制造管。
本发明的方法使得可以迅速测定高亲油值。另外，对一种化合物进行试验所必需使用的材料更少，并且可以用标准液体处理工作站容易地自动进行该方法。此外，该方法不需要使用有沉淀风险的水性参比溶液。
现已对本发明进行了一般性描述，通过参考具体实施例以及下文的附图将可以更好地理解本发明，除非特别说明，否则本文所包括的实施例目的仅在于对本发明进行举例说明，而并非旨在限制本发明。
图1以图解方式表示了现有技术的方法。在多孔板(W)中，将感兴趣的化合物溶解于适宜的溶剂中并向其中加入亲水性缓冲液(H)。向该缓冲液中加入亲脂性溶剂(L)。将板密封(S)并将该板振摇直至达到分布平衡。然后，取出水相，测定感兴趣的化合物在亲水性缓冲液中的量。由于体积小，难以进行相分离并且相分离的结果常常不能令人满意。
图2以图解方式表示了本发明方法的一个实施方案。将膜(M)附着在管(T)上。将该膜用辛醇浸渍并将溶解的感兴趣的化合物施加于膜上。将管(T)插入到充满亲水性缓冲液(HB)的板(P)中，从而使得膜与缓冲液相接触。在达到平衡后，将管简单地从板中取出，从而实现相分离。
图3表示通过本发明的方法所获得的log D(DIFI-log D)和由文献获得的值(Lit.log D)的线性回归曲线。文献值是从MEDChem数据库(得自DAYLIGHTChemical Information Systems Inc.27401 Los Alto，USA的商业数据库)、Winiwarter等人，J.Med.Chem，414939-49(1998)和SiriusTechnical Application Notes第2卷(1995)中获得的。
图4表示线型透明小容器阵列11。A)透明小容器阵列的俯视图，B)通过A)中透明小容器阵列的平面A-A的横截面图。
图5表示图4中线型透明小容器阵列11中的一个透明小容器12的横截面视图。A)没有层，B)具有附着的层61。
图6表示线型透明小容器阵列31。A)透明小容器阵列的俯视图，B)通过A)中透明小容器阵列的平面A-A的横截面图。
图7表示图6中线型透明小容器阵列31的一个透明小容器32的横截面视图。A)没有层，B)具有附着的层71。
图8表示具有透明小容器固定器52、矩阵阵列53和用于透明小容器的开口54的二维透明小容器阵列51的俯视图，在该二维透明小容器阵列51中，插入了两个线型透明小容器阵列11。
图9表示组套的二维透明小容器阵列51和81的横截面图。
图10表示组套在标准分析多孔板85上的二维透明小容器阵列51的横截面图。
参照数字列表11线型透明小容器阵列12透明小容器13透明小容器14透明小容器15连结板16连结板17上部室18下部室
19肋状物21锁扣22锁扣23开放的下端24开放的顶端25底部壁26开口27底部壁25的内表面29肋状物31阵列32透明小容器33相邻的透明小容器34相邻的透明小容器35单连结板36单连结板37上部室38下部室41肋状物42肋状物43下部顶端44开放的顶端45底部壁46开口51二维透明小容器阵列52透明小容器固定器53开口的矩阵阵列54开口(用于接受透明小容器)61层
71层81二维透明小容器阵列82透明小容器固定器83固定器板85用于标准多孔板的标准固定器板91上部透明小容器92下部透明小容器具体实施方式
实施例除非特别说明，否则实施例中所涉及的可通过商业途径获得的试剂是根据生产商的说明书来进行使用的。
实施例1亲油性实验是在与欧洲专利申请EP 1232792所述的新型DIFI-管组合的96-深孔微量滴定板中进行的。
将验证组的所有化合物以10mM的浓度溶解于二甲基亚砜中(DMSO-贮备液)。
通过准确包被0,45μm的疏水性PVDF膜(Immobilon-P PVDF(Millipore)和PVDF-Plus(Whatman，Headquater27 Great West Road，Brentford，Middlesex，TW8 9BW，UK)来开始实验，所述的PVDF膜和PVDF-Plus被固定在DIFI-管的底部。
将各膜用精确的1μl辛醇和1μl DMSO-贮备液浸渍。
在10分钟的短期温育后，将具有包被膜的管与已经预填充了精确的1600μl所选择的缓冲液(50mM TAPSO(FLUKA，BioChemika，ArtNo.93357)，pH 7.4)的96-深孔板连接在一起。所得的夹心结构确保了膜被完全浸到缓冲液中(图2)。
然后，将板密封并振摇2小时。从而，在此期间所述物质在膜、辛醇和缓冲液之间进行分布。
在达到分布平衡后(2小时后)，小心地将管从深孔板的顶部拆下来，以便对仍然粘附在膜上的辛醇相进行分析。
因此，用另外的辛醇作为洗脱剂将该辛醇相中剩余的化合物洗脱下来。然后，用紫外线光谱法在250至450nm的吸收波长下测定洗脱液中的物质浓度。
为了了解用缓冲液进行温育之前的精确样品浓度，在与上文所述的样品板相同的条件下产生参比板。参比板直接用洗脱液处理，并用紫外线光谱法测量所得的辛醇相中的参比浓度。
评估可以由用缓冲液温育后分析得到的样品浓度(Co)和进行分布前的参比浓度(Cref)计算亲油值log D。
logD=log(CoCref-Co·VwVo)]]>由于所有的UV测量均在相同条件下进行这一事实，可以用相同波长下的UV-吸收值(Abs)来代替浓度项。
logD=log(AbsoAbsref-Abso·VwVo)]]>在该方程中，Vw是水相的体积，用其除以辛醇相的体积Vo。
验证用一组14种在文献中具有已知log D值的被充分表征的、化学上不同的药物来验证该方法。对于各化合物，按照上述方法进行三次测定。手动进行参比板和样品板的制备。
然后，将获得的log D值(DIFI-log D)与从文献中获得的值(Lit.log D)进行比较。表1汇总了验证结果。图3中使用了相应的数据。
表1.验证组的14种在文献中具有已知log D值(Lit.log D)的药物。对由不同来源得到的文献值与用新方法获得的数据的比较来验证本发明的方法。
a)MEDChem01，MEDChem03b)由logP和pKa计算得到c)Winiwarter，S.，Bonham，N.M.，Ax，F.，Hallberg，A.，Lennernas，H.，Karlen，A.，J.Med.Chem.，41，4939-4949(1998)d)Sirius Technical Application Notes第2卷(1995)在用HTlog D进行的比较中，对于高log D值的测定而言，本发明的方法需要非常低的辛醇-水比例。其它的优点在于样品消耗量降低和可以容易地分离出辛醇相以及用极性溶剂将载体固定的非极性溶剂转移到多个孔中，从而增加了高亲脂性化合物的分布容积并因此增加了其测量范围(表2)。
表2.与新方法比较的HTlog D。
权利要求
1.测定感兴趣的化合物的亲油性的方法，其包括a)提供一个层，b)用溶剂A浸渍所述的层，c)将感兴趣的化合物施加于被浸渍的层，d)加入溶剂B，e)在已经达到分布平衡后，取出溶剂B，和f)测定感兴趣的化合物在各溶剂相的至少一个相中的量。
2.根据权利要求1所述的方法，其中测定感兴趣的化合物在粘附于所述层上的相中的量。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述的层是疏水性层。
4.根据权利要求3所述的方法，其中溶剂A是非极性溶剂，溶剂B是极性溶剂。
5.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述的层是亲水性层。
6.根据权利要求5所述的方法，其中溶剂A是极性溶剂，溶剂B是非极性溶剂。
7.根据权利要求4或6中任意一项所述的方法，其中非极性溶剂是辛醇。
8.根据权利要求1至7中任意一项所述的方法，其中所述的层是膜。
9.根据权利要求1至8中任意一项所述的方法，其中所述的层附着在管的底部。
10.被溶剂浸渍的层用于测定感兴趣的化合物的亲油性的用途。
11.根据权利要求10所述的用途，其中所述的溶剂是亲脂性溶剂。
12.根据权利要求11所述的用途，其中所述的亲脂性溶剂是辛醇。
13.根据权利要求10所述的用途，其中所述的溶剂是亲水性溶剂。
14.根据权利要求13所述的用途，其中所述的亲水性溶剂是缓冲液。
全文摘要
本发明涉及用于测定感兴趣的化合物的亲油性的新方法，其包括a)提供一个层，b)用溶剂A浸渍所述的层，c)将溶解的感兴趣的化合物施加于被浸渍的层，d)加入溶剂B，e)在已经达到分布平衡后，取出溶剂B，和f)测定感兴趣的化合物在各溶剂相的至少一个相中的量。
文档编号G01N33/00GK1837818SQ20061006542
公开日2006年9月27日 申请日期2006年3月21日 优先权日2005年3月21日
发明者H·菲舍尔, M·坎西, B·瓦格纳 申请人:弗·哈夫曼-拉罗切有限公司