专利名称：生脉软胶囊的制备方法及其质量控制方法
技术领域：
本发明涉及生脉软胶囊的制备方法及其质量控制方法。
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生脉饮是中医益气养阴的著名古方，由红参、麦冬、五味子三味药物组成。功能益气复脉，养阴生津，用于气阴两亏，心悸气短，脉微自汗。“生脉饮”收载于《中华人民共和国药典》2005年版一部，历年药典均有收载，为口服液。现代临床多应用本方治疗肺心病、心血管疾病等属于气阴不足者、具有上述症状的慢性气管炎、神经官能症、功能性低热等疾患。
中医理论认为，本方治证为湿热、暑热之邪，耗气伤阴，或久咳肺虚，气阴两伤而致。因暑为阳邪，热蒸汗多，最易耗气伤津，导致气阴两伤，故汗多，神疲，体倦，气短，咽干，脉虚。咳嗽时久伤肺，气阴不足者，亦可见上述征象。治宜益气养阴生津之法。方中红参甘温，益气生津以补肺，肺气旺则四脏之气皆旺，为君药。麦冬甘寒，养阴清热，润肺生津，为臣药。红参、麦冬合用，则益气养阴之功益彰。五味子酸温，敛肺止汗，生津止渴，为佐药。三药合用。一补一清一敛，共奏益气养阴，生津止渴，敛阴止汗之效。使气复津生，汗止阴存，脉得气充，则可复生，诸证得除。
方中红参治疗体虚欲脱，脉微欲绝，四肢厥冷，汗出亡阳的急危重患者，有明显的大补元气，固脱复脉的功效。现代药理研究表明红参能加强大脑皮质的兴奋过程，加快神经冲动的传导，缩短神经反射的潜伏期，增强条件反射，提高分析能力，同时也能加强抑制过程，改善神经过程的灵活性，对人能改善睡眠和情绪，大剂量也可出现镇静。红参有“适应原”样作用，能增强机体对各种有害刺激的防御能力(对神经2垂体2肾上腺皮质系统的影响有关)。人参皂甙有明显抗应激作用，能显著抑制小鼠肾上腺、胸腺、甲状腺等器官在应激反应中重要的变化。红参无性激素样作用，但能兴奋垂体分泌促性腺激素，能促进男、女性腺功能，能降低血糖，与胰岛素有协同作用，能调节胆固醇代谢，抑制高胆固醇血症的发生。红参能刺激造血器官，使造血功能旺盛。增强机体免疫力，促进免疫球蛋白生成，防治多种原因引起的白细胞下降，能使淋巴细胞增加，使淋巴母细胞转化，增强网状内皮系统功能。
方中麦冬为其植物须根上的块根。其性微寒、味甘、微苦，归肺、心、胃经，属补阴类中药，可调肺养阴、益胃生津、清心除烦。麦冬含多种甾体皂甙。
方中五味子为其植物的成熟果实。其味酸、甘，性温。归心、肺、肾经。本品酸能收敛、甘温而润，上能益气敛肺，下能补肾养阴，益气生津，退热敛汗。现代研究五味子能增强中枢神经系统的兴奋与抑制过程，促进两种神经过程的相互平衡，能改善人的智力活动，调节心血管系统血液循环，对不正常血压有调节作用，对循环衰竭者升高血压作用颇为显著。对呼吸有兴奋作用，止咳，调节胃液分泌，促进胆汁分泌，调节糖代谢，降低谷2丙转氨酶，对肝细胞有保护作用。
综上所述中医在临床治疗用药中将红参、麦冬、五味子相配伍组成复方，发挥中药多层面，多靶点在人体内的治疗作用。三药合用，一补，一清，一收，共成益气养阴，生津止渴，固表止汗之功。同时现代药理研究表明生脉饮对心肌具有保护作用、生脉饮能明显提高T细胞亚群具有免疫调节作用、生脉饮具有清除对羟自由基的作用、生脉饮具有对生长发育和学习记忆促进作用。
本方在现代临床应用广泛，疗效确切，临床上主要用于心功能衰竭、扩张型心肌病心力衰竭、老年脑梗死、低血容量性休克、无症状心肌缺血、过早搏动、中、重度新生儿硬肿症、顽固性室性早搏等。
总之，经过多年临床实践及现代药理学研究证明本方疗效确切，使用安全。被列为第二批国家非处方药药品中成药内科目，广泛地用于治疗心肌梗死，心绞痛，休克，低血压，心律失常，肺心病等。有关文献资料常有报道，并不断探索本方的临床应用范围，衍生许多新的临床应用方法。
生脉软胶囊根据“生脉饮”研制而成，并保持了原方的功效。通过制成软胶囊使药物包于胶囊中与外界隔离，减少了水分、空气、光线的影响，从而提高稳定性；而且软胶囊不加赋形剂，减少药物服用量；不受压力影响，在胃肠中分散快、吸收好，较丸剂、片剂崩解迅速，生物利用度高；软胶囊外观精美、掩盖不良气味，容易吞服，易被患者接受。更好地满足了临床的需要。改变剂型后的生脉软胶囊每次服用量4粒/次，2次/天，每粒内容物为0.6g。
发明目的和发明内容《中国药典》2005版一部收载的“生脉饮”为口服液，本发明通过研究，将其制成软胶囊。并制定了其质量控制方法。
一、软胶囊的制备经工艺学研究，生脉饮的制备方法为药效原料组成红参250g，麦冬500g，五味子250g。
辅料为由植物油∶蜂蜡∶司盘-80按18∶1∶1比例组成的植物油混合基质适量，优选360g。
制备方法红参、麦冬、五味子，粉碎成粗粉，用60％-70％乙醇渗漉，收集漉液，回收乙醇至无醇味，并减压浓缩成清膏，将清膏减压干燥，干膏粉碎成细粉，过100目筛，得干粉，将干粉加入植物油混合基质中，搅拌均匀，用胶体磨磨三次以上，压制于胶丸中，即得。
优选制备方法为红参、麦冬、五味子，粉碎成粗粉，用65％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，渗漉速度为2ml/min，收集漉液约10L，回收乙醇至无醇味，并减压浓缩为相对密度为1.35～1.40(60℃)的清膏，将清膏于50～60℃减压干燥，干膏粉碎成细粉，过100目筛，得干粉，将干粉加入植物油混合基质(植物油∶蜂蜡∶司盘-80为18∶1∶1)中，搅拌均匀，用胶体磨磨三次以上，压制于胶丸中。常规定型、干燥、洗丸，制成1000粒，装瓶即得。
制备方法工艺技术条件的研究1.65％乙醇浸渍时间的考察按照生产工艺，分别利用65％的乙醇浸渍12、24、36小时，处理得到清膏，分别计算出膏率和五味子醇甲的含量。结果见表1。
表1 65％乙醇浸渍时间的考察
结果表明浸渍时间过短不能有效的提取出有效成分，时间过长则容易提取出非主要作用成分。因此选择24小时作为最佳浸渍时间。
2.渗漉速度的筛选三批相同量的实验同时进行。按照生产工艺，渗漉时速度分别为1、2、3ml/min，收集漉液，处理测定方法同1。实验结果见表2。
表2 渗漉速度的筛选
结果表明渗漉速度慢，出膏率高，但是五味子醇甲含量偏低。渗漉速度快，则不能充分提取，当渗漉速度为2ml/min时，既能提高生产效率，又能充分提取，因此选择2ml/min作为渗漉速度。
3.漉液收集体积的选择三批相同量的实验同时进行。按照生产工艺，渗漉速度2ml/min，收集漉液体积分别为原料量的5、10、15倍(V/W)，下一步的处理测定方法同1。实验结果见表3。
表3 漉液收集体积的选择
结果表明漉液收集体积大出膏率高，但是五味子醇甲含量偏低。选择收集体积为加料量的10倍体积，即能保证出膏率，又能保证五味子醇甲含量。
4.制剂成型工艺研究4.1处方设计处方生脉干燥粉40％辅料植物油54％蜂蜡3％司盘-80 3％4.2辅量用量选择根据制剂学要求，软胶囊多选用植物油作为混悬液的分散介质，选择适宜的润湿剂和助悬剂使内容物保持长时间的稳定是软胶囊制备的关键。下而为辅料用量选择情况①蜂蜡用量比例确定用50ml具塞试管，按如下比例在药粉中加入植物油、蜂蜡，放置6小时，观察试验结果如下植物油 蜂蜡结果(助悬情况)90％ 2％ 较好5％ 好7％ 不好由上述结果可确定蜂蜡用量为5％。
②司盘-80用量比例确定用50ml具塞试管，按如下比例在药粉中加入植物油、司盘-80，放置6小时，观察试验结果如下植物油司盘-80结果(助溶情况)90％ 2％较好5％好7％好由结果可知司盘-80用量为7％及5％时试验结果一致，我们选择司盘-80用量为5％，这样即可以起到表面活性剂作用，司盘-80其含量所占比例不多。
由上述试验结果可确定植物油、蜂蜡、司盘-80的最佳比例为18∶1∶1③药粉与基质比例确定选用不同比例基质，观察干燥药粉情况及崩解情况表4 辅料用量选择结果
由表4结果可知药粉与基质比例为1∶1.5情况最好。
5.转移率试验三批中试样品所用五味子的主要有效成分五味子醇甲含量为0.409％，制剂中五味子醇甲含量分别为0.57mg/粒、0.56mg/粒、0.57mg/粒，五味子醇甲的转移率分别为57.0％、56.0％、57.0％。
6.日服剂量计算根据原剂型日服剂量，改为胶囊服用剂量为每次4粒，一日2次，每粒0.6克。每粒含饮片药量与原剂型相同。
7.中试研究
二、生脉软胶囊质量控制方法的制定[鉴别](1)取本品内容物4g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加水20ml使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，弃去醚液，水溶液加水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，通过HPD100大孔树脂(内径1cm，高8cm)，先用50ml水洗脱，弃去水液，继用50ml 20％乙醇洗脱，弃去醇液，再用50ml 70％乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1、Rb1加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品6μl、对照品溶液各2μl，分别点(成条状)于同一硅胶G薄层板(默克预制板)上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，预饱和15分钟后，展开9cm，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本品内容物2g，加水20ml，超声处理20分钟，离心(2000转/分)，倾出上清液，用乙醚提取3次，每次20ml，弃去乙醚液，水层低温挥去乙醚，加盐酸2ml，加热回流1小时，放冷，加乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材粉末(80目)2g，加65％乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，离心，倾出上清液，蒸至无醇味，加水20ml使溶解，加盐酸2ml，同法制成对照药材氯仿溶液2ml。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品、对照品药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯-甲酸(7∶3∶0.2)为展开剂，预饱和15分钟后，展开9cm，取出，晾干，喷以5％磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点由黄稍变蓝黑色为止。供试品色谱中，在与对照品药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(62∶38)为流动相；检测波长为254nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取五味子醇甲对照品2mg，置25ml量瓶中，用甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取上述溶液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含五味子醇甲40μg)。
供试品溶液的制备取软胶囊10粒，挤出内容物，搅匀，精密称取0.25g，加甲醇20ml，称定重量，超声处理20分钟，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙醚提取4次，每次20ml，合并乙醚液，减压(60℃)回收至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.5μm)滤过，即得。
测定方法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒含五味子以五味子醇甲(C24H32O7)计，不得少于0.6mg。
权利要求
1.生脉软胶囊的制备方法，其特征在于包括以下步骤按红参250g、麦冬500g、五味子250g的比例取原料，粉碎成粗粉，用60％-70％乙醇渗漉，收集漉液，回收乙醇至无醇味，并减压浓缩成清膏，将清膏减压干燥，干膏粉碎成细粉，过100目筛，得干粉，将干粉加入由植物油∶蜂蜡∶司盘-80按18∶1∶1比例组成的植物油混合基质中，搅拌均匀，用胶体磨磨三次以上，压制于胶丸中，即得。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于将红参、麦冬、五味子粉碎成粗粉，用65％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，渗漉速度为2ml/min，收集漉液约10L，回收乙醇至无醇味，并减压浓缩为60℃热测相对密度为1.35～1.40的清膏，将清膏于50～60℃减压干燥，干膏粉碎成细粉，过100目筛，得干粉，将干粉加入植物油混合基质中，搅拌均匀，用胶体磨磨三次以上，压制于胶丸中，即得。
3.鉴定含有红参、麦冬、五味子的组合物中某类成分的方法，包括以下至少一项(1)取本品内容物4g，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，加水20ml使溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，弃去醚液，水溶液加水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨试液洗涤2次，每次20ml，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，通过HPD100大孔树脂，先用50ml水洗脱，弃去水液，继用50ml20％乙醇洗脱，弃去醇液，再用50ml70％乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1、Rb1加甲醇制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品6μl对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水按15∶40∶22∶10体积比组成的混合液在10℃以下放置分层形成的下层溶液为展开剂，预饱和15分钟后，展开9cm，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰；比较供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，是否显相同颜色的斑点；(2)取本品内容物2g，加水20ml，超声处理20分钟，离心，倾出上清液，用乙醚提取3次，每次20ml，弃去乙醚液，水层低温挥去乙醚，加盐酸2ml，加热回流1小时，放冷，加乙醚提取2次，每次20ml，合并乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材粉末2g，加65％乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，离心，倾出上清液，蒸至无醇味，加水20ml使溶解，加盐酸2ml，同法制成对照药材氯仿溶液2ml；照薄层色谱法试验，吸取供试品、对照品药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以沸点为60～90℃的石油醚-醋酸乙酯-甲酸按7∶3∶0.2体积比组成的混合液为展开剂，预饱和15分钟后，展开9cm，取出，晾干，喷以5％磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点由黄稍变蓝黑色为止；比较供试品色谱中，在与对照品药材色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点。
4.测定含有红参、麦冬、五味子的组合物中五味子醇甲含量的方法，其特征在于采用高效液相色谱法，测定方法为用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水按62∶38体积比组成的混合液为流动相；检测波长为254nm，理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；用五味子醇甲对照品的甲醇溶液为对照品溶液，每1ml含五味子醇甲40μg；供试品溶液的制备取软胶囊10粒，挤出内容物，搅匀，精密称取0.25g，加甲醇20ml，称定重量，超声处理20分钟，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙醚提取4次，每次20ml，合并乙醚液，减压回收至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用0.5μm微孔滤膜滤过，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
全文摘要
本申请涉及生脉软胶囊的制备方法按红参250g、麦冬500g、五味子250g的比例取原料，粉碎成粗粉，用60％－70％乙醇渗漉，收集漉液，回收乙醇至无醇味，并减压浓缩成清膏，将清膏减压干燥，干膏粉碎成细粉，过100目筛，得干粉，将干粉加入由植物油∶蜂蜡∶司盘－80按18∶1∶1比例组成的植物油混合基质中，搅拌均匀，用胶体磨磨三次以上，压制于胶丸中，即得。并且本申请提供了对其中的红参、麦冬的新的薄层鉴别方法。本申请进一步提供了对五味子醇甲的含量测定方法，能更好地反映和控制制剂的内在质量。
文档编号G01N30/02GK1994426SQ20061017156
公开日2007年7月11日 申请日期2006年12月30日 优先权日2006年12月30日
发明者林德良 申请人:北京汉典中西药研究开发中心