专利名称：鉴别癌症/异型细胞和粒子团的方法及细胞分析仪的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种从采自活体的细胞团(标本)中鉴别癌/异型细胞的方法及其鉴别所需粒子团的鉴别方法。
背景技术：
作为癌症、特别是宫颈癌的早期发现的鉴别方法，在体检中细胞诊断学得到有效利用。
在此，宫颈癌的细胞诊断是用绵签和刮刀等擦过宫颈表面，立即将刮取的细胞涂在载玻片上作成标本，进行显微镜观察。显微镜下的细胞形态观察由细胞化验员对每个标本逐一诊断，在精度和处理速度上有待改进。
近年来，自动检查细胞标本、判断有无癌细胞的仪器应运而生。
这种自动诊断仪器将含有宫颈癌细胞的标本涂在载玻片上制作涂抹标本，用巴氏(Papanicolaou)染色法对标本的细胞核和细胞质染色，从处理标本细胞形态图片的形态信息中判断有无癌细胞。但是，这种自动细胞诊断仪器的性能为正常细胞排除率25％，处理速度为8～10个标本/小时。这种精度和处理速度对于在体检等现场负责判断有无癌症的人来说是远远不够的。
另一方面，有一种细胞诊断方法不是靠细胞形态观察，而是通过检出对癌细胞有特异性的标记来判断有无癌细胞的。
比如，专利文献1上提出的方法是用宫颈癌相关的蛋白质及识别它的抗体作为对宫颈癌及其癌前状态有特异性的标记物进行检测的免疫测定技术。
专利文献2不仅针对宫颈部位的涂抹标本，而且是针对分散在各处的细胞团的标本提出了一种肿瘤细胞及其前驱细胞的自动检测方法。即，用对标记物有特异反应的抗体或对核酸探针作了荧光标识的试剂对癌细胞中2种以上的标记物进行检测，自动检测有无试剂与上述标记物结合而发出荧光信号，以此检查有无癌细胞。
然而，运用这种基于标记物的方法在癌/异型细胞的鉴别上其操作的简便性和测定的精度、速度等也尚不十分令人满意。
专利文献1专利发表2001-500609号公报
专利文献2专利公开2002-296274号公报
发明内容
发明要解决的课题 本发明考虑到上述情况，提供一种通过对用流式细胞技术测得的光学信号波形进行分析，更高效、精确地鉴别癌/异型细胞的方法以及鉴别癌/异型细胞所需要的粒子团的鉴别方法。
解决课题的手段 本发明提供一种方法，即用流式细胞仪测量多个细胞，针对各细胞取得散射光信号，分析各散射光信号波形，以此计算出一个以上的特征参数，根据该特征参数从上述多个细胞中鉴别出癌/异型细胞。在此，所谓散射光信号至少包含前向和侧向散射光信号其中之一。
细胞可以是宫颈部位的细胞。
特征参数也可以反映散射光信号波形的复杂性。
也可以将两个或两个以上的特征参数结合起来，从而将癌/异型细胞从多个细胞中鉴别出来。
特征参数之一可以是信号的幅宽。
特征参数也可以是鉴别癌/异型细胞和白细胞团的参数。
特征参数也可以是鉴别癌/异型细胞和正常扁平上皮细胞的参数。
特征参数也可以是鉴别癌/异型细胞和正常扁平上皮细胞团的参数。
从另一个角度来看，本发明提供了一种粒子团鉴别方法，包括用流式细胞仪测量多个粒子；就各粒子取得散射光信号；分析各散射光信号波形，以此计算出一个以上的特征参数；用该特征参数从上述多个粒子中鉴别出粒子团。
特征参数最好是标准二阶矩、差分积分值/峰值中的至少一个。
发明效果 因为是根据从流式细胞仪取得的细胞散射光信号波形计算一个以上特征参数，再用该特征参数鉴别，故比显微镜观察的方法和仅凭标记检测的方法能够更简便、更有效、更精确地对大量细胞进行癌/异型细胞的鉴别。
在下述本发明的实施方式中的流式细胞仪不仅能检测散射光信号，还能检测荧光信号。也可以将上述仅用荧光标记的标识物检测的方法与本发明方法组合起来使用，这样，可望通过本发明大大改善仅用荧光标记的标识物检测法所存在的上述测定精度问题。
[图1]为本发明使用的流式细胞仪光学系统的结构图。
[图2]为本发明使用的流式细胞仪控制系统的框图。
[图3]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。
[图4]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。
[图5]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。
[图6]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。
[图7]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。
[图8]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。
[图9]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。
[图10]为显示本发明信号波形与特征参数关系的说明图。
[图11]为显示本发明处理步骤的流程图。
[图12]为本发明拍摄图片一例。
[图13]为本发明拍摄图片一例。
[图14]为本发明拍摄图片一例。
[图15]为本发明拍摄图片一例。
[图16]为显示本发明第一实施例鉴别率的说明图。
[图17]为显示本发明第二实施例分鉴别率的说明图。
[图18]为显示本发明第三实施例鉴别率的说明图。
[图19]为显示本发明第三实施例鉴别率的说明图。
[图20]为显示本发明第三实施例鉴别率的说明图。
符号说明 100流动室 101透镜 102光束截止器 103物镜 104分色镜 105检测器 106检测器 107物镜 108分色镜 109分色镜 110干涉膜 111检测器 112分色镜 113干涉膜 114检测器 115分色镜 116干涉膜 117检测器 118干涉膜 119检测器 120脉冲激光器 121照相机 123氩(Ar)离子激光器 优选实施方式 下面，用附图所示实施方式对本发明进行详细说明。然而，本发明不受这些实施例的限制。
流式细胞仪的结构 光学系统 首先，本发明使用的是具有图1所示光学系统的流式细胞仪。
用本流式细胞仪可以检测经过流动室100的细胞或粒子发出的前向荧光(FFL)和侧向荧光(FL1～FL3)，同时还能检测出前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC)，并用照相机121拍摄细胞(粒子)图片。本流式细胞仪让细胞或粒子逐个在流动室100流过，形成包含细胞或粒子的试样流，检测所形成的试样流中细胞或粒子发出的光。
更具体而言，首先让连续发光的氩离子激光器123发出的具有488nm发振波长的蓝色激光穿过透镜101，整形为短径10μm、长轴100μm的扁平椭圆形光束剖面，射入流动室100。
射入流动室100的光经过流动室100聚光于光束截止器102，在此被遮挡。细胞或粒子发出的前向荧光(FFL)和前向散射光(FSC)被物镜103收集起来，经过只允许530nm以上波长光通过的分色镜104，10度左右立体角的前向荧光(FFL)射入检测器(光电倍增管)105，在此被检出。波长530nm以下的10度左右立体角的前向散射光(FSC)射入检测器(光电二极管)106，在此被检出。
另一方面，细胞或粒子发出的侧向荧光和侧向散射光被配置于流动室100侧面的高数值孔径(NA)的物镜107收集。从物镜107射出的光投射到能反射波长短于740nm的光束的分色镜108，从镜108反射出的侧向荧光和侧向散射光投射到能反射波长为500nm以下的光的分色镜109。从镜109反射出的光经过中心波长474nm、通过波长49nm的干涉膜110，射入检测器(光电倍增管)111，在那里检出侧向散射光(SSC)。
透过分色镜109的光射入能反射具有550μm以下波长的光的分色镜112。从镜112反射出来的光透过中心波长534nm、通过波长26nm的干涉膜113射入检测器(光电倍增管)114，并检出侧向绿色荧光(FL1)。
通过分色镜112的光在分色镜115被分成波长630nm以下和630nm以上的光。波长630nm以下的光经过中心波长597nm、通过波长49nm的干涉膜116射入检测器(光电倍增管)117，在那里检出侧向橙色荧光(FL2)。波长630nm以上的光经过中心波长689nm、通过波长46nm的干涉膜118射入检测器(光电倍增管)119，在那里检出侧向红色荧光(FL3)。
代表捕捉到的前向散射光(FSC)、前向荧光(FFL)、侧向散射光(SSC)、侧向绿色荧光(FL1)、侧向橙色荧光(FL2)和侧向红色荧光(FL3)的电信号波形通过A/D转换器124(图2)进行A/D转换后输入到分析仪200(图2)。细胞(粒子)通过流动室时，具有780nm发振波长的近红外脉冲激光器120根据需要发射激光。此脉冲激光器120发射的激光发挥透过照明的作用，从流动室100射出的光线通过分色镜108，在照相机121成像。如此得以捕捉到细胞或粒子的静止图像 在上述实施方式中，叙述了运用散射光信号鉴别癌/异型细胞的方法，但是，如果用与癌/异型细胞特异性反应的荧光标记物对细胞染色，取得与上述荧光标记物结合的细胞的荧光信号，算出荧光强度、荧光脉冲幅度及荧光脉冲面积等荧光参数，将这些荧光参数中的至少一个和下述散射光特征参数的至少一个组合起来，就能够更加精确地鉴别癌/异型细胞。比如作为检测腺癌细胞用标记物可以使用R-PE标记细胞角蛋白8抗体；作为检测宫颈扁平上皮异型细胞用标记物，可以使用Alexa488标记NMP179抗体。用这些标记物对细胞染色，用比如具有图1所示光学系统的流式细胞仪测定，检测出各标记由来的荧光(R-PE标记时为橙色荧光，Alexa488标记时为绿色荧光)，用散射光特征参数对具有一定量以上荧光强度的细胞进行分析，即可高效地筛除腺癌或扁平上皮异型细胞以外的细胞。
控制系统 图2为流式细胞仪控制系统的框图。如该图所示，控制器200通过A/D转换器124接收检测器105、106、111、114、117、119发出的信号波形，将所得波形数据存放在波形数据存储器201，用波形数据分析部分202分析存放的数据，根据分析结果用细胞(粒子)鉴别部分203鉴别细胞(粒子)，并让输出设备400输出鉴别结果。
根据输入设备300的设置条件，控制器200的照相控制部分204还会让脉冲激光器120发光。
这样，照相机121拍摄细胞(粒子)，将所得的图像数据存放在图像数据存储器204，根据需要由输出设备400输出。存放在波形数据存储器201的信号波和存放在图像数据存储器204的拍摄的细胞(粒子)图像对应地制成表格，存储在控制器205。
在此，控制器200是单一的微机或单一的个人电脑合。
输入设备300由键盘、触摸屏或鼠标等构成，用于输入设置波形数据分析部分202的分析条件、细胞(粒子)鉴别部分203的鉴别条件和照相控制部分204的拍摄条件等。
输出设备由CRT和LCD或打印机等组成。
A/D转换器124可以将一个模拟信号波形以20nsec的取样周期在X0、X1、X2、…Xn时刻取样，以8比特的分辨率量化最大电压10V和基准(baseline)电压0.05V之间的测量电压，转换成数据信号。
波形数据分析部分202再就以下(1)～(10)所示10种特征参数进行分析计算。
(1)峰值(Peak)如图3所示，为波形最大值，用 [等式1] 表示。
(2)幅宽(Width)如图3所示，为大于基准线部分的宽度，用 [等式2] 表示。但是，P表示XP达到峰值。
(3)半值幅宽(HW)如图4所示，为峰值/2高度上的波形幅宽，用 [等式3] 表示。但是，P表示XP达到峰值。
(4)面积(Area)如图5所示，对应于波形面积，用 [等式4] 表示。
(5)差分积分值÷峰值[B] 用 [等式5] 表示。在此，所谓差分积分值表示相邻的取样数据差的绝对值的累加值。
(6)标准二阶矩[M] 用 [等式6] 表示。但P表示XP达到峰值。
M为评价波形的起伏度、特别是左右(时间轴)方向不同部位存在峰值(弧形或隆起)的程度。图6(a)的波形M在横轴i处值增大，但在图6(b)M值很小。
为了参数M的标准化，等式(6)用分母值做了除算。
(7)波形起伏度(J)，用 [等式7] J≡(a+c)×(b+d)…(7) 表示。
其中， P表示XP达到峰值。
J为评价波形的起伏度、特别是从三角形评价乖离度的参数。即，J如图7(a)所示，为虚线上部分的面积与下部分的面积的积，在图7(b)所示波形中J的值非常小。
(8)幅宽÷峰值(C)为评价波形形状、特别是扁平度的参数，用 [等式8] 表示。即，图8(a)中的波形具有一个比图8(b)中的波形小的参数值C。
(9)面积÷(幅宽×峰值)(D)如图9所示，为评价波形形状、特别是评价接近三角形还是接近矩形的参数，用 [等式9] 表示。
在图9(a)的情况下，该参数值较大，在图9(b)的情况下，其值较小。
(10)峰值左侧面积÷峰值右侧面积(E)评价波形形状、特别是峰值(时间轴上)位置及其左右的不均衡度的参数，用 [等式10] 表示。
P表示XP达到峰值。在图10(a)的情况下，参数值E较大，在图10(b)的情况下，参数值E较小。
如图1～10所示，散射光信号波形含有复杂形态，上述特征参数反映复杂的散射光信号波形的形态特征。
波形分析部分202分析的各特征参数与存放在图像数据存储器的细胞(粒子)图像相对应地存储在控制器205中。
图2中的细胞(粒子)鉴别部分203将波形数据分析部分202算出的上述各特征参数与分别预设的阈值(由输入设备300输入)进行比较，求大于阈值或小于阈值的值，从流式细胞仪检测的全细胞(全粒子)中排除，以此来鉴别出所希望的细胞(粒子)。比如，鉴别单细胞(粒子)与细胞团、癌/异型细胞与白细胞团、癌/异型细胞与正常扁平上皮细胞以及癌/异型细胞与扁平上皮细胞团等。
测定处理 下面用图11所示流程图说明在这种结构中整体的测定处理的流程。
首先，制备测定用试样(步骤S1)，将制备的试样提供给图1和图2所示流式细胞仪进行测定(步骤S2)。
然后，将各检测器检出的信号波形存放在控制器200的波形数据存储器201(步骤S3)，波形数据分析部分202根据所存信号波形计算特征参数(步骤S4)。细胞(粒子)鉴别部分203用算出的特征参数鉴别测定用试样所含细胞(粒子)种类，让输出设备400输出结果。拍照控制部分204用照相机121拍摄必要的细胞(粒子)图片，将图像数据存放在图像数据存储器205，同时让输出设备400输出图像。
实施例1 癌/异型细胞与白细胞团、正常扁平上皮细胞和正常扁平上皮细胞团等混在标本中，因此，从细胞团中鉴别出单细胞是从其它细胞中鉴别出癌/异型细胞的先决条件。
为了模拟性地测定本发明的鉴别率，用人工粒子即微珠取代细胞进行了测定。
按照图11所示顺序，首先让粒径为9μm的单一微珠(胶乳颗粒)约12000个悬浮于网织红细胞鞘液(希森美康(株)制)，制备测定试样(1)。接下来，让生成若干自然聚集成团的粒径为5μm的单一微珠(胶乳颗粒)约12000个悬浮于网织红细胞鞘液(希森美康(株)制)，制备测定试样(2)(步骤S1)。用流式细胞仪测定各测定试样(步骤S2)。
接下来，如图11步骤S3所示，获取每个测试粒子体的前向散射光信号波形，同时用照相机121(图1)拍摄测试粒子体的图像。在此，各粒子相应的信号波形与拍摄的粒子图片对应地存储起来。
步骤S4，计算上述10种特征参数。在此，特征参数与拍摄的粒子图片对应地存储起来。各粒子的特征参数与粒子图片对应存储，可以从存储在图像数据存储器204的拍摄图片中选择要鉴别的粒子，通过比较对应于所选拍摄图片的特征参数和阈值，即可知道特征参数的鉴别率。
通过特征参数值与事先适当地设定的相应阈值的比较结果，确认利用特征参数B(差分积分值÷峰值)或M(标准二阶矩)较好地鉴别出微珠团(粒子团)和单一微珠(单一粒子)。
从拍摄的图片中选择5μm微珠的微珠团，将相应于所选图片的特征参数B与阈值比较。阈值设置为一能很好地鉴别微珠团和单一微珠的值，大于阈值2.2的视为微珠团，小于阈值2.2的视为单一微珠。其结果是，在图片上确认的5μm微珠的微珠团中有11.4％小于阈值2.2，判断为单一微珠。从拍摄的图片中选择9μm微珠的单一微珠，将相应于所选图片的特征参数B与阈值比较。阈值设置为一能很好地鉴别微珠团和单一微珠的值，大于阈值2.2的视为微珠团，小于阈值2.2的视为单一微珠。其结果是，在图片上确认的9μm单一微珠中，有97.1％小于阈值2.2，判断为单一微珠。因此，从结果上可以看出，可以85.7％的精度(图16中(2)的％值大、(1)的％值小，分辨率良好，因此，将(2)-(1)的值方便地定义为“精度”。以下同)鉴别出单一微珠。其数据如图16所示。
使用特征参数M时，将不小于阈值2100的视为微珠团，将小于阈值2100的视为单一微珠。其结果是，在拍摄图片中确认的5μm微珠的微珠团中，有2.9％小于阈值，判断为单一微珠。在图片上确认的9μm单一微珠中，有99.7％小于阈值2100，判断为单一微珠。因此，从结果上可以看出，鉴别单一微珠的精度为96.8％。
另外，代表性的9μm单一微珠和5μm微珠团的拍摄图片例见图12和图13。
实施例2 下面就作为临床标本使用宫颈部位细胞进行测定的情况进行说明。
首先，如图11步骤S1所示，按下列要领制备测定试样。
将保存液PreservCyt(Cytyc)保存的临床标本(约2×105细胞/管)以10000rpm转速离心处理1分钟，在所得颗粒中添加10％N-乙酰-L-半胱氨酸PBS溶液后，再以10000rpm转速离心处理1分钟，得到除去粘液的颗粒。
在此颗粒中添加Zamboni固定溶液(0.2％2，4，6-三硝基苯酚、2％仲甲醛)，反应10分钟后，以10000rpm转速离心处理1分钟，去上清，添加酶反应液(含有0.2％I型胶原酶、0.2％II型胶原酶和0.1％蛋白酶(希格玛公司制)的PBS)，在37℃时反应2分30秒。反应后，添加冰镇过的1％蛋白酶抑制剂(希格玛公司制)PBS溶液，以10000rpm转速离心处理1分钟后，去上清，制得细胞经分散处理的颗粒。
再添加PBST(含0.05％吐温20的PBS)，悬浮处理，用孔径100μm的网膜筛除细胞团后，以10000rpm转速离心处理1分钟，去上清，添加网织红细胞鞘液(希森美康(株)制)再悬浮处理，制备测定试样。用流式细胞仪测定该测定试样(步骤S2)。
然后，如图11步骤S3所示，从每个测试体获取前向散射光和侧向散射光的信号波形，同时用照相机121(图1)拍摄测试体的图像。
先从拍摄图像的形态特征上确认并分类所测定的白细胞团、扁平上皮细胞、扁平上皮细胞团和异型细胞，统计各类的数量N1、N2、N3、N4。异型细胞和扁平上皮细胞的图片例见图14和图15。
在图11的步骤S4计算表1所示前向散射光和侧向散射光的特征参数，在步骤S5按顺序比较表1所示所有特征参数和阈值。先选择图像确认的白细胞团，针对所选图像比较特征参数M和阈值。大于阈值20000的诊断为白细胞团，小于阈值20000的视为异型细胞。再对小于阈值20000、判断为异型细胞的细胞用特征参数幅宽(Width)判断，大于阈值1200的判断为白细胞团，小于阈值1200的诊断为异型细胞。如此，依次将特征参数大于阈值或小于阈值的细胞判断为非异型细胞(白细胞团)，待表1上全部特征参数与阈值比较完毕时，将未判断为非异型细胞的细胞视为异型细胞，进行计数。以所计个数为n1，计算n1/N1×100。
接下来，选择拍摄图片上确认的扁平上皮细胞，针对所选图片比较特征参数M和阈值。大于阈值20000的判断为扁平上皮细胞，小于阈值20000的判断为异型细胞。再对小于阈值20000、判断为异型细胞的物质用特征参数幅宽判断，大于阈值1200的判断为扁平上皮细胞，小于阈值1200的判断为异型细胞。如此，依次将特征参数大于阈值或小于阈值的细胞判断为非异型细胞(扁平上皮细胞)，待表1上全部特征参数与阈值比较完毕时，将未判断为非异型细胞的细胞视为异型细胞，计数。以所计个数为n2，计算n2/N2×100。
接下来，选择拍摄图片上确认的扁平上皮细胞团，针对所选图片比较特征参数M和阈值。大于阈值20000的判断为扁平上皮细胞团，小于阈值20000的判断为异型细胞。再对小于阈值20000、判断为异型细胞的物质用特征参数幅宽判断，大于阈值1200的判断为扁平上皮细胞团，小于阈值1200的判断为异型细胞。如此，依次将特征参数大于阈值或小于阈值的细胞判断为非异型细胞(扁平上皮细胞团)，待表1上全部特征参数与阈值比较完毕时，将未判断为非异型细胞的细胞视为异型细胞，计数。以所计个数为n3，计算n3/N3×100。
再选择拍摄图片上确认的异型细胞，针对所选图片比较特征参数M和阈值。大于阈值20000的判断为非异型细胞，小于阈值20000的判断为异型细胞。再对小于阈值20000、判断为异型细胞的物质用特征参数幅宽判断，大于阈值1200的判断为非异型细胞，小于阈值1200的判断为异型细胞。如此，依次将特征参数大于阈值或小于阈值的细胞判断为非异型细胞，待表1上全部特征参数与阈值比较完毕时，将未判断为非异型细胞的细胞视为异型细胞，计数。以所计个数为n4，计算n4/N4×100。
[表1] 其结果如图17所示。即，白细胞团中有8.5％判断为异型细胞，扁平上皮细胞有2.8％、扁平上皮细胞团有0.9％分别被判断为异型细胞，其平均值为4.1％，异型细胞中有78.8％被判断为异型细胞，与平均值的差为74.7％，从而可以看出，异型细胞的鉴别效率是很高的。
实施例3 根据第二实施例测试时取得的前向散射光的信号波形计算上述10种特征参数，调查这些特征参数在以下三方面的鉴别率 (1)异型细胞与白细胞团 (2)异型细胞与扁平上皮细胞 (3)异型细胞与扁平上皮细胞团。鉴别的阈值设为最佳值。
其结果是，从各细胞的残存率得出的分辨率比较高的特征参数分别如图18、19、20所示。
即，作为适于上述(1)的鉴别的单一特征参数如图18所示，为B(差分积分值÷峰值)、M(标准二阶矩)或J(波形起伏度)；作为适于上述(2)的鉴别的单一特征参数如图19所示，为Width(幅宽)、HW(半值幅宽)、B(差分积分值÷峰值)、M(标准二阶矩)或J(波形起伏度)；作为适于上述(3)的鉴别的单一特征参数如图20所示，为Width(幅宽)、HW(半值幅宽)、Area(面积)、B(差分积分值÷峰值)、M(标准二阶矩)或J(波形起伏度)。
权利要求
1.一种细胞鉴别方法，其特征在于
用流式细胞仪测定多个细胞；
获得各个细胞的散射光信号；
通过分析各散射光信号波形，计算出至少一个特征参数；
用所述特征参数从所述多个细胞中区鉴别出癌/异型细胞。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于细胞为宫颈部位细胞。
3.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于所述特征参数反映所述散射光信号波形的形态特征。
4.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于所述特征参数至少为下列参数中的一项标准二阶矩、波形起伏度、差分积分值/峰值、幅宽/峰值、面积/(幅宽×峰值)、峰值左侧面积与峰值右侧面积之间的比值。
5.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于通过结合两个或两个以上的特征参数将癌/异型细胞从多个细胞中鉴别出来。
6.根据权利要求5所述方法，其特征在于特征参数之一为信号幅宽。
7.根据权利要求2所述方法，其特征在于特征参数用于鉴别癌/异型细胞和白细胞团。
8.根据权利要求7所述方法，其特征在于特征参数为差分积分值/峰值、标准二阶矩和波形起伏度的其中之一。
9.根据权利要求2所述方法，其特征在于特征参数用于鉴别癌/异型细胞和正常扁平上皮细胞。
10.根据权利要求9所述方法，其特征在于特征参数为幅宽、半值幅宽、差分积分值/峰值、标准二阶矩和波形起伏度的其中之一。
11.根据权利要求2所述方法，其特征在于特征参数用于鉴别癌/异型细胞和正常扁平上皮细胞团。
12.根据权利要求11所述方法，其特征在于特征参数为幅宽、半值幅宽、面积、差分积分值/峰值、标准二阶矩和波形起伏度的其中之一。
13.一种粒子团鉴别方法，其特征在于
用流式细胞仪测量多个粒子；
获得各个粒子的散射光信号；
通过分析各散射光信号波形，计算出至少一个特征参数；
用所述特征参数从所述多个粒子中鉴别粒子团。
14.权利要求10所述方法，其特征在于特征参数为标准二阶矩和差分积分值/峰值其中之一。
15.一种用于鉴别癌/异型细胞的细胞分析仪，其特征在于
用于形成含细胞的试样流的流动室；
用于照射流动室中上述试样流的光源；
检测所述试样流细胞发出的散射光并输出散射光信号的检测部分；
通过分析上述输出散射光信号波形算出一个以上特征参数的波形分析部分；
根据算出的上述特征参数从前述细胞中鉴别癌/异型细胞的控制部分。
16.权利要求15所述细胞分析仪，其特征在于细胞是宫颈部位细胞。
17.权利要求15～16之一所述细胞分析仪，其特征在于所述特征参数为标准二阶矩、幅宽、波形起伏度、差分积分值/峰值、峰值、幅宽/峰值、面积/(幅宽×峰值)、峰值左侧面积与峰值右侧面积之间的比值。
18.权利要求15所述细胞分析仪，其特征在于所述特征参数为差分积分值/峰值、标准二阶矩和波形起伏度的其中之一，所述控制部分根据上述特征参数鉴别癌/异型细胞和白细胞团。
19.权利要求15所述细胞分析仪，其特征在于所述特征参数为幅宽、半值幅宽、差分积分值/峰值、标准二阶矩和波形起伏度的其中之一，所述控制部分根据上述特征参数鉴别癌/异型细胞和正常扁平上皮细胞。
20.权利要求15所述细胞分析仪，其特征在于所述特征参数为幅宽、半值幅宽、面积、差分积分值/峰值、标准二阶矩和波形起伏度的其中之一，所述控制部分根据上述特征参数鉴别癌/异型细胞和正常扁平上皮细胞团。
全文摘要
本发明提供一种精确、便捷地鉴别癌/异型细胞的方法。即用流式细胞仪测定多个细胞，针对各细胞取得散射光信号，分析各散射光信号波形，以此计算出一个以上的特征参数，用该特征参数从上述多个细胞中鉴别出癌/异型细胞。
文档编号G01N15/14GK101151517SQ20068000984
公开日2008年3月26日 申请日期2006年3月14日 优先权日2005年3月29日
发明者石坂正树, 井邨泰之, 岸和希 申请人:希森美康株式会社