专利名称：电镜实验用2.5%戊二醛固定液及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种电镜实验用2. 5%戊二醛固定液及其制备方法，更具体的讲是把 电镜实验用2. 5%戊二醛固定剂产品化的方法。
背景技术：
目前，电镜实验用2. 5%戊二醛固定液多为实验室自配，即根据实验需要自行购 买原料配置，配置方法如下试剂以25%或50%的戊二醛为原料，用磷酸盐缓冲液配制成 2. 5%的戊二醛，而用于免疫电镜及细胞化学实验需要的2. 5%戊二醛固定液，还需要另行 提纯才能满足实验要求，而这一过程在实验室操作起来非常烦琐且很难实现；另外，由于电 镜实验用试剂用量一般很少，一个样品lmL2. 5%戊二醛固定液就可满足需要，而自配试剂 所购原料最小包装25%戊二醛100mL，磷酸二氢钠500g，磷本氢二钠500g，这样就会造成 自配的试剂，经实验后还有大量剩余试剂，而这些剩余试剂由于保存期非常短，因此，用不 完的试剂最终只能被遗弃，这样既浪费实验者的实验经费，又浪费资源，遗弃的试剂还要造 成环境污染；其次，在人工方面，自配试剂从容器清洗、容器干燥、称量、配制约需要2天的 时间，这样对实验进程会造成影响，而戊二醛的毒性对配制者的身体健康也会造成不良影 响。有基于此，申请人作出本发明。
发明内容
针对现有技术存在的上述问题，本发明的主要目的是在于提供一种高质量、成本 低、环保性好、使用时间长的电镜实验用2. 5%戊二醛固定液。本发明采取的技术方案如下，一种电镜实验用2. 5%戊二醛固定液，其特征在于， 采用以下原料和方法配置而成(1)、采用磷酸氢二钠溶液和磷酸二氢钠溶液配置成磷酸盐 缓冲液配制，配置时双人核对，配置完成进行中间体检验；(2)、将步骤1配置好的磷酸盐缓 冲液加入戊二醛、蒸镏水，提纯后进行PH值检验；(3)、将步骤2配置好的溶液用棕色安瓶进 行熔封分装，包装完毕进行成品检验后出库。本发明中产品在制备中的pH值可为1 14范围内的任意值。步骤1的中间体检验是指溶液的含量、pH值检验。步骤2中的提纯方法可选自减压蒸镏法、活性炭纯化法、碳酸钡吸附法等提纯方 法的任意一种。本发明的另一方面目的是提供一种电镜实验用2. 5%戊二醛固定液的制备方法， 包括以下步骤1、原、辅料检验将用于配置的原、辅料及设备按标准分别进行检验后备用；2、磷酸盐缓冲液配制A液磷酸氢二钠*12个结晶水71. 64克加蒸镏水至1000ml ；B液磷酸二氢钠*2个结晶水31. 21克加蒸镏水至1000ml ；
将A液36ml+B液14ml配置成0. 2molpH7. 2的磷酸盐缓冲液；3、戊二醛固定液配制将步骤1配置好的0. 2molpH7. 2磷酸盐缓冲液50ml，加入50%戊二醛5ml，然后加 蒸镏水至100ml，加入活性炭2g，避光、密闭搅拌lh ；然后进行pH检验pH7. 2士0. 1，滤球过 滤、滤膜过滤；4、包装及检验将棕色安瓶清洗、干燥后，在熔封机进行分装熔封，并进行灯检后包装，包装完毕 进行成品检验即可出库。本发明的有益效果如下1、本发明产品在制备过程中由双人核对，分装前进行关键项目(如含量、pH等) 中间体检验，包装后再进行成品检验，从工艺控制角度，最大地避免了自配试剂可能出现的 失误，保证了实验质量的提高。2、本发明产品在生产中按批量专业化生产，有能力使用专业设备，可达到避光、无 菌等条件，保证产品化戊二醛的质量高于自配试剂。3、本发明产品已制定能完全满足或高于其实验需求的质量标准，生产工艺中加入 了活性炭纯化步骤，产品的质量标准就制订为必须满足免疫电镜实验，产品化试剂既可以 保证提供高质量的试剂，也可以极大地减少自配试剂在人工、设备方面的成本。4、有效期考察自配试剂不可能一次性用完，放置期间由于储存条件不同，试剂变 化差异很大，等下一次使用时，不能保证其是否能满足实验要求，而本发明的产品化试剂通 过工艺控制，有效实现了保质期的延长，实践证明，棕色玻璃安瓶熔封可使内容物完全与外 界氧、二氧化碳等隔绝，有效避光，加之充氮、无菌操作等工艺控制，可使内容物的保质期大 大延长，保质期可达两年；这就在技术上为延长试剂有效期、保证产品化试剂的生产奠定了 技术基础。5、在制备安全方面由于电镜实验试剂大多具有毒性或放射性，各实验室配制时 不可能针对不经常配制的试剂而给操作人员配备昂贵的劳动保护；而专业化生产企业必须 考虑安全生产。6、包装规格产品化试剂可根据用户需要，制备lml、2ml、10ml、不同规格的产品，
根据实验需求自行组合选购，使用户得到经济、高质量的产品；自配试剂则每次配制量远远 高于产品化规格，造成试剂浪费和环境污染。以下结合具体实施方式
对本发明作进一步说明。
具体实施例方式本发明的一种电镜实验用2. 5%戊二醛固定液的制备方法，具体工艺流程如下 原、辅料检验_专业配制_中间体检验_过滤_分装、熔封_灯检_包装-成品检验。1、原、辅材料检验本实施例中涉及原、辅材料及设备如表一所示。表一原、辅材料及设备检验一览表
原、辅材料、设备质量标准、型号50%戊二醛(进口)化学纯 2、配制工艺1)、磷酸盐缓冲液配制配置时双人核对，配置完成进行中间体检验。A液磷酸氢二钠*12个结晶水71. 64克加蒸镏水至1000ml ；B液磷酸二氢钠*2个结晶水31. 21克加蒸镏水至1000ml ；0. 2molpH7. 2 缓冲液:A 液 36ml+B 液 14ml。2)、戊二醛固定液配制0. 2molpH7. 2缓冲液50ml+50%戊二醛5ml+蒸镏水至 100ml+活性炭2g ；3)、避光、密闭搅拌lh ；4)、pH 检验pH7. 2 士 0. 1 ；5)、滤球过滤、滤膜过滤；6)、安瓶清洗、干燥；7)、熔封机分装熔封；8)、灯检在有黑色背景的灯光下，观察熔封过的产品，去除泡头、瘪头、炭化点等 的不合格品；9)、印字包装；10)、成品检验成品检验标准如表2所示。表2、成品检验标准一览表 本发明生产的产品，目前使用过的用户浙江大学华家池电镜室、浙江省肾病研究 中心、浙江大学紫金岗电镜室、绍兴文理学院电镜室等，经反映产品质量高、实验成本和程 序大大减少。
权利要求
一种电镜实验用2.5％戊二醛固定液，其特征在于，采用以下原料和方法配置而成(1)、采用磷酸氢二钠溶液和磷酸二氢钠溶液配置成磷酸盐缓冲液配制，配置时双人核对，配置完成进行中间体检验；(2)、将步骤1配置好的磷酸盐缓冲液加入戊二醛、蒸镏水后，提纯，pH值检验；(3)、将步骤2配置好的溶液用棕色安瓶进行熔封分装，包装完毕进行成品检验后出库。
2.根据权利要求1所述的一种电镜实验用2.5%戊二醛固定液，其特征在于配置过程 中的PH值为1 14范围内的任意值。
3.根据权利要求1所述的一种电镜实验用2.5%戊二醛固定液，其特征在于步骤1的 中间体检验是指溶液的含量、PH值检验。
4.根据权利要求1所述的一种电镜实验用2.5%戊二醛固定液，其特征在于步骤2中 的提纯方法选自减压蒸镏法、活性炭纯化法、碳酸钡吸附法的任意一种。
5.一种电镜实验用2. 5%戊二醛固定液的制备方法，包括以下步骤(1)、原、辅料检验将用于配置的原、辅料及设备按标准分别进行检验后备用；(2)、磷酸盐缓冲液配制A液磷酸氢二钠*12个结晶水71. 64克加蒸镏水至1000ml ；B液磷酸二氢钠*2个结晶水31. 21克加蒸镏水至1000ml ；将A液36ml+B液14ml配置成0. 2molpH7. 2的磷酸盐缓冲液；(3)、戊二醛固定液配制将步骤1配置好的0.2molpH7.2磷酸盐缓冲液50ml，加入 50 %戊二醛5ml，然后加蒸镏水至100ml，加入活性炭2g，避光、密闭搅拌Ih ；然后进行pH检 验pH7. 2 士 0. 1，滤球过滤、滤膜过滤；(4)、包装及检验将棕色安瓶清洗、干燥后，在熔封机进行分装熔封，并进行灯检后包 装，包装完毕进行成品检验即可出库。
全文摘要
本发明公开了一种电镜实验用2.5％戊二醛固定液及其制备方法，包括以下步骤1、磷酸盐缓冲液配制A液磷酸氢二钠*12个结晶水71.64克加蒸镏水至1000ml；B液磷酸二氢钠*2个结晶水31.21克加蒸镏水至1000ml；将A液36ml+B液14ml配置成0.2molpH7.2的磷酸盐缓冲液；2、固定剂戊二醛配制将步骤1配置好的0.2molpH7.2磷酸盐缓冲液50ml，加入50％戊二醛5ml，然后加蒸镏水至100ml，加入活性炭2g，避光、密闭，检验后包装本发明具有高质量、节约实验时间和实验成本、减少过期试剂污染环境、避免配制试剂给实验者带来健康损害、保质期长等优点。
文档编号G01N33/531GK101865915SQ201010185630
公开日2010年10月20日 申请日期2010年5月28日 优先权日2010年5月28日
发明者张树成, 王秀珍 申请人:绍兴文理学院