一种鉴定劣质食用油的方法
【专利摘要】本发明公开了一种鉴定劣质食用油的方法，本发明利用HPSEC法对劣质食用油中内源性大分子污染物的含量水平进行检测，利用GC-MS法对劣质食用油中内源性低碳数脂肪酸及外源性小分子污染物进行检测，综合其检测结果，判断食用油品质的优劣，此两种检测方法相互补充，除对非精炼劣质食用油与合格食用油品能做出准确判断，还可鉴定精炼劣质食用油，为劣质食用油稽查提供了有力的技术支撑。本发明方法可适用于氧化程度较低的劣质食用油中较低含量的内源性大分子污染物的检测。本发明方法操作过程简单，仪器设备要求不高，利于在基层进行推广应用。
【专利说明】一种鉴定劣质食用油的方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种鉴定劣质食用油的方法。
【背景技术】
[0002]食用油在我国膳食结构中占据重要地位，是人体脂肪酸的主要来源，也是提供菜 肴色香味的重要物质。正所谓“柴、米、油、盐、酱、醋、茶”即为生活，可见“油”在人民日常 生活中的重要地位，因此油的品质直接关系到人民生活的品质。然而随着各类劣质食用油 在媒体上的曝光(如2009年7月关于肯德基、麦当劳在台湾省被检出煎炸油砷、丙烯酰胺含 量超标事件，2010年3月的“地沟油”事件以及2010年9月某品牌茶油高致癌物质苯并芘 含量超标事件等)，引起了人们对食用油安全的普遍担忧，甚至到了“谈油色变”的地步。
[0003]各类劣质食用油大致可分为以下四类:一是潲水油(即地沟油)，是将下水道中的 油腻漂浮物或宾馆、酒楼的剩饭、剩菜经过简单加工、提炼出的油；二是煎炸用油使用超过 一定次数后再被使用的油；三是病、死猪的肉、内脏及皮的提炼油；四是在贮藏过程中劣变 的油。
[0004]劣质食用油经过分离、过滤、脱色、水分蒸发、消毒等精炼处理过程后，从感官上很 难将其与普通合格油区分开来，传统的感官检测，即看、闻、尝、听等手段无法正确鉴别劣质 食用油。现阶段主要可选以下方法鉴别劣质食用油:
1、薄层色谱法。油脂的主要组成部分甘油三酯在劣变过程中或经历高温、或与空气接 触、或受光照射，导致其氧化裂解生成大量极性物质。利用薄层色谱法对这些极性物质进行 检测可区分正常食用油与劣质油，其优点是操作简便，检测成本低，适用于现场稽查。但其 检测灵敏度低，且劣质食用油中的极性物质在精炼过程中会被去除，导致该法对精炼劣质 食用油检测失效。
[0005]2、脂肪酸谱图统计学法。正常的食用油具有相对稳定的脂肪酸组成谱图，而劣质 油是杂乱的混合油，加上腐败变质导致其脂肪酸组成谱图与正常油脂有差异，利用统计学 建立正常食用油脂肪酸谱库，样品脂肪酸图谱与谱库进行自动匹配，从而鉴别其是否为劣 质油。该方法谱库建立后可进行样品图谱自动匹配。但其不适用于调和油的检测，且需大 量不同类型合格食用油图谱建立谱库，工作量巨大，目前亦无法推广应用。
[0006]3、基于纳米光学传感技术的快筛方法。该方法用时短，操作简便，快筛成本低。但 由于花生油、调香油等自身含有的正电荷物质对快筛结果产生严重影响，使得该方法不适 用于此类油的快筛；另外，外界偶然引入的污染物易对快筛结果产生干扰，增加假阳性几 率；且，劣质食用油中的带正电荷外源性污染物在精炼过程中被去除，导致该法对精炼劣质 食用油快筛失效。
[0007]4、GC_MS法。劣质食用油在氧化劣变过程中或经历高温、或与空气接触、或受光照 射，导致其脂肪酸构成发生剧烈变化，油脂中不饱和甘油三酯发生氧化裂解，低碳数脂肪酸 (C〈14)比例显著增加。这些低碳数脂肪酸可用GC-MS进行检测。同时，其它一些外源性小 分子污染物也可以同时被检测。GC-MS法对非精炼劣质油均能做出准确判断。但劣质食用油中的低碳数脂肪酸及其他小分子污染物在精炼过程中被去除，导致该法对精炼劣质食用油检测失效。考虑到目前流向餐桌的劣质食用油通常为精炼过的劣质食用油，因此，对食用油的监测对象不能仅限于非精炼劣质食用油，还应进行精炼劣质食用油的鉴定。
[0008]5、高效空间排阻色谱法(HPSEC)。甘油三酯在劣变过程中因聚合、裂解导致各劣变物分子量不同，可利用高效空间排阻色谱法(HPSEC)对其分离，以示差折光检测器进行检测。利用HPSEC法对食用油的质量控制，国外已进行了相当广泛的研究，近几年国内也进行了系统研究。根据前处理方法不同，HPSEC法主要分为三类:极性组分预富集法，其灵敏度高，但样品前处理复杂、非极性组分信息丢失；非极性组分预富集法，其灵敏度高，但样品前处理复杂、极性组分信息丢失；全油进样法，其目标物信息完整，但检测灵敏度低，仅适用于大分子聚合物含量>3.0%的样品，而研究表明，很多劣质食用油由于其氧化程度并不高，聚合物含量低于3%，因此无法利用该方法进行检测。
[0009]6、其它常规指标检测方法，如酸价、过氧化值、电导率、折光率及熔点法，但研究发现，均无法满足劣质油的检测需要。
[0010]可见，不同检测方法各有优缺点，目前均无法满足劣质食用油的检测需求，为了保证食用油的安全可靠性，亟待进一步探索有效检测劣质食用油的方法。
【发明内容】
[0011]本发明的目的在于提供一种鉴定劣质食用油的方法。
[0012]本发明所采取的技术方案是:
一种鉴定劣质食用油的方法，包括以下步骤:
1)对待检样油进行HPSEC分析，采用全油进样，以峰面积计算出聚合物的含量，其含量 ≥2.0%，判定为劣质食用油，若< 2.0%，则进行下一步检测；
2)对待检样油进行GC-MS分析，以峰面积计算出C< 14的低碳数脂肪酸和外源小分子污染物的含量，含量> 0.1%，判定为劣质食用油，若< 0.1%，则判定为合格食用油。
[0013]优选的，步骤I)中，待检样油的前处理方法如下:取待检样油50mg，加入2mL四氢呋喃溶解，再加入适量无水硫酸钠，放置5?10 min, 0.22 Um微孔滤膜过滤，完成样油的前处理。
[0014]优选的，HPSEC分析的进样量为5 ii L。
[0015]优选的，HPSEC分析的色谱条件为:色谱柱为Shodex GPC KF-402HQ，柱温为35°C， 流动相为四氢呋喃，流速为0.2mL/min，检测器为示差折光检测器。
[0016]优选的，步骤2)中，GC-MS分析的气相色谱条件为:色谱柱为HP-5 MS毛细管柱 (30mmX0.25mmX0.25Mm)，升温程序为 80°C保持 lmin，20°C /s 升至 180°C，保持 15min， 5°C /s升至250°C，保持20min，进样口温度250°C，进样量为0.3 y L，载气为He，载气流量为 lmL/min ;质谱条件为:EI离子源，离子源温度230°C，电离电压70ev，接口温度230°C，质量范围29?500m/z。
[0017]优选的，步骤2)中，待检样油的前处理方法如下:取待检样油50mg，加入1.5?
3.0mL浓度为0.5mol/L的硫酸-甲醇溶液，45?55°C水浴8?15min,加入2?4mL正己烷萃取，蒸馏水洗涤，然后经无水硫酸钠脱水干燥，完成样品的前处理。
[0018]本发明的有益 效果是:本发明利用HPSEC法对劣质食用油中内源性大分子污染物的含量水平进行检测，利用 GC-MS法对劣质食用油中内源性低碳数脂肪酸及外源性小分子污染物进行检测，综合其检 测结果，判断食用油品质的优劣，此两种检测方法相互补充，除对非精炼劣质食用油与合格 食用油品能做出准确判断，还可判定目前文献报道方法与国标方法均无法判定的精炼劣质 食用油，为劣质食用油稽查提供了有力的技术支撑。
[0019]本发明采用全油进样、微量HPSEC法分析，相对于普通HPSEC法，检测灵敏度更高， 可适用于氧化程度较低的劣质食用油中较低含量的内源性大分子污染物的检测。
[0020]本发明方法操作过程简单，仪器设备要求不高，利于在基层进行推广应用。
【专利附图】
【附图说明】
[0021]图1为实施例1中微量HPSEC法分析结果；
图2为实施例1中GC-MS法分析结果。
【具体实施方式】
[0022]按来源可将劣质食用油污染物分为两大类:一类是甘油三酯自身氧化产物，称为 内源性污染物；一类是食用油与外界接触过程中引入的其它污染物，称为外源性污染物。
[0023]单独利用外源性或内源性检测指标进行检测存在以下问题:(1)由于内源性污染 物源于新鲜食用油的氧化劣变，这种劣变过程在从新鲜合格食用油到劣质食用油过程中是 连续的，理论上难以找到可以绝对准确划分二者的界限，因此采用内源性指标的检测方 法，假阳性难以避免；(2)由于劣质食用油的种类与来源极其复杂，任何外源性物质进入到 劣质食用油中都存在偶然性，不具普遍性，使用外源性指标的检测方法必然存在漏检，即存 在假阴性。因此，提高鉴别劣质食用油准确率的有效方法应是采用内源性指标与外源性指 标相结合的多指标体系的检测方法。
[0024]本发明利用HPSEC法对劣质食用油精炼过程中不可去除的内源性大分子污染物 (包括氧化甘油三酯聚合物和甘油三酯非极性的聚合物，统称为聚合物)的含量水平进行检 测，利用GC-MS法对粗炼劣质食用油中内源性低碳数脂肪酸及外源性小分子污染物进行检 测，综合其检测结果，判断食用油品质优劣。此两种检测方法相互补充，可对非精炼劣质食 用油和精炼劣质食用油进行全面的监测。
[0025]进一步的，相对于普通HPSEC法，微量HPSEC法检测灵敏度更高，可适用于氧化程 度较低的劣质食用油中较低含量的内源性大分子污染物的检测。因此，本发明采用微量 HPSEC进行检测。同时，考虑到信息的完整性对于劣质食用油的检测结果判定至关重要，本 发明利用全油进样法对劣质食用油中内源性大分子污染物进行检测。根据大量实验数据支 撑作为劣质食用油判定标准制定的依据，我们判定聚合甘油三酯含量> 2.0%时为劣质食 用油。
[0026]以下结合具体实施例，进一步阐述本
【发明内容】
，但不局限于此。
[0027]实施例1
1、待检样油
正常食用油:大型超市购买某品牌食用油。
[0028]劣质食用油:从中小型餐馆收集。[0029]精炼劣质食用油:取劣质食用油在75°C条件下与85%磷酸及30%氢氧化钠分别反 应 40min、IOmin,加 5 ?6% 蒸懼水揽拌 3 min, 4000r/min 条件下离心 5min, 105°C >0.1 MPa 抽真空至油脂呈无乳化透明状态；按油脂质量3%加活性白土，110°C脱色30min;250°C、通 氮气、0.1 MPa脱臭lh，得精炼劣质食用油。
[0030]2、微量HPSEC法分析 (I)样品前处理
称取待检油样50mg，加入2 mL四氢呋喃(THF)溶解，加入少量无水硫酸钠，放置5min， 用0.22 y m微孔滤膜过滤，完成前处理。
[0031](2)色谱条件:
色谱柱:Shodex GPC KF-402HQ，
液相泵:Agilent 1260超高效液相泵，
流动相:THF,
流速:0.2 mL/min,
柱温:35°C，
检测器温度:35°C，
进样量:5iiL。
[0032]分别对正常食用油、劣质食用油和精炼劣质食用油进行微量HPSEC法检测，结果 如图1所示，其中，A为正常食用油、B为非精炼劣质食用油、C为精炼劣质食用油的检测图 谱。，根据B所示，微量HPSEC法对非精炼劣质食用油检测准确率不高；但根据C所示，该方 法可将精炼劣质食用油中的甘油三酯二聚体、三聚体与甘油三酯分离，从而计量聚合物含 量。三种食用油的检测结果分别为:A:0.76%、B:1.96%、C:5.30%。可见，相对于非精炼劣质 食用油，精炼劣质食用油的微量HPSEC法检测准确率反而增加，说明精炼过程对本方法检 测结果不仅无影响，反而会提高其准确率，这可能是由于精炼中的高温过程导致大分子聚 合物含量进一步增加。
[0033]3、GC-MS 分析
(I)样品前处理
取待检油样50mg，置具塞试管中，加入约2mL硫酸-甲醇(0.5mol/L)溶液，混匀后于 55°C水浴加热IOminJPA 2mL正己烷萃取。吸取上层液，以4mL蒸馏水洗两次，取上层液， 经无水硫酸钠脱水干燥，用0.22 y m微孔滤膜过滤，即得。
[0034](2) GC-MS 条件
仪器:Agilent GC-MS 联用仪(型号 7890A-5975C)。
[0035]气相色谱条件色谱柱:HP-5 MS毛细管柱(30mmX0.25mmX0.25Mm);升温程序: 80°C保持 lmin，20°C /Sec 升至 180°C，保持 15 min, 5°C /Sec 升至 250°C，保持 20min ;进 样口温度:2500C ;进样量:0.3uL ;载气=He ;载气流量:lmL/min ;分流比:40:1 ;溶济延迟: 4min。
[0036]质谱条件:EI离子源；离子源温度230°C;电离电压70ev ;接口温度230°C ;质量范 围 29 ?500m/z。
[0037]分别对正常食用油、劣质食用油和精炼劣质食用油进行GC-MS分析，结果如图2所 示，A为正常食用油、B为劣质食用油、C为精炼劣质食用油的GC-MS图谱,三种食用油的检测结果分别为:A:0%、B:0.594%、C:0.039%。根据B所示，经GC-MS检测，劣质食用油中低碳数脂肪酸与外源性小分子化合物形成诸多杂峰，其含量> 0.1 %，从而可判定为劣质食用油。根据C所示，由于劣质食用油中的低碳数脂肪酸及其他小分子污染物在精炼过程中被去除，导致该法对精炼劣质食用油检测失效。
[0038]实施例2
采用多指标检测体系，对不同种类、不同来源的食用油进行微量HPSEC/GC-MS联合检
测:
1)对待检样油进行微量HPSEC分析，以峰面积计算出聚合物的含量，其含量>2.0%，判定为劣质食用油，若< 2.0%，则进行下一步检测；
2)对待检样油进行GC-MS分析，分离C< 14的低碳数脂肪酸和外源小分子污染物，以峰面积计算其含量，含量> 0.1 %，判定为劣质食用油，若< 0.1%，则判定为合格食用油。
[0039]微量HPSEC和GC-MS分析方法同实施例1，其结果如表I所示。
[0040]表I多指标检测体系对食用油检测结果
【权利要求】
1.一种鉴定劣质食用油的方法，其特征在于，包括以下步骤:1)对待检样油进行HPSEC分析，采用全油进样，以峰面积计算出聚合物的含量，其含量 2.0%，判定为劣质食用油，若< 2.0%，则进行下一步检测；2)对待检样油进行GC-MS分析，以峰面积计算出C< 14的低碳数脂肪酸和外源小分子污染物的含量，含量> 0.1%，判定为劣质食用油，若< 0.1%，则判定为合格食用油。
2.根据权利要求1所述的鉴定劣质食用油的方法，其特征在于:步骤I)中，待检样油的前处理方法如下:取待检样油50mg，加入2mL四氢呋喃溶解，再加入适量无水硫酸钠，放置5?10 min,0.22 y m微孔滤膜过滤,完成样油的前处理。
3.根据权利要求2所述的鉴定劣质食用油的方法，其特征在于=HPSEC分析的进样量为 5 u L0
4.根据权利要求2所述的鉴定劣质食用油的方法，其特征在于=HPSEC分析的色谱条件为:色谱柱为Shodex GPC KF-402HQ，柱温为35°C，流动相为四氢呋喃，流速为0.2mL/min， 检测器为示差折光检测器。
5.根据权利要求1所述的鉴定劣质食用油的方法，其特征在于:步骤2)中，GC-MS分析的气相色谱条件为:色谱柱为HP-5 MS毛细管柱(30mmX0.25mmX0.25Mm)，升温程序为 80°C保持 lmin，20°C /s 升至 180°C，保持 15min，5°C /s 升至 250°C，保持 20min，进样口温度250°C，进样量为0.3 ii L，载气为He，载气流量为lmL/min ;质谱条件为:EI离子源，离子源温度230°C，电离电压70ev，接口温度230°C，质量范围29?500m/z。
6.根据权利要求5所述的鉴定劣质食用油的方法，其特征在于:步骤2)中，待检样油的前处理方法如下:取待检样油50mg,加入1.5?3.0mL浓度为0.5mol/L的硫酸-甲醇溶液，45?55°C水浴8?15min,加入2?4mL正己烧萃取,蒸懼水洗漆,然后经无水硫酸钠脱水干燥，完成样品的前处理。
【文档编号】G01N30/02GK103439420SQ201310353934
【公开日】2013年12月11日 申请日期:2013年8月14日 优先权日:2013年8月14日
【发明者】刘亚雄, 张朝正, 杨德忠, 李延志 申请人:广东省食品药品检验所