高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸，具体为采用HPLC法，采用ZORBAXSB—C18的色谱柱，以磷酸溶液-甲醇=950:50为流动相A，流动相B为甲醇，梯度洗脱；检测波长为210nm；流速为1.2mL·min-1。乙酸在2.5～1014.9μg·mL-1的范围内具有良好的线性（r=0.99999，n=6），回收率为99.2%，精密度RSD=1.1%。本发明的这种高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸，操作简单、快速，测定结果准确可靠，从而能有效地控制该药的质量；本发明在流动相的选择上采用了梯度洗脱，避免了样品出峰时间过长，造成拖尾或出现肩峰；本发明在主药的稀释溶剂选择上，考虑到氟苯咪唑原料药不易溶于水和常规有机溶剂，而在酸中溶解度较好，所以选择甲酸作为助溶剂，起到了良好的效果。
【专利说明】高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸，属于化学检测领域。
【背景技术】
[0002]乙酸是生产氟苯咪唑的溶剂之一，用量较大，因此氟苯咪唑成品中会含有少量的残留乙酸，作为杂质影响产品质量。一般的，产品中允许杂质在安全允许的范围内存在，因此，采用化学分析方法检测产品中的乙酸含量是非常必须的，也是非常紧迫的。
[0003]目前，一般化学分析方法主要分为重量分析法和滴定分析法，色谱分析法，比色分析法，我们知道单纯的乙酸的检测是非常普遍的，工业中冰乙酸中含量的测定，采用色谱法，实验室内纯度较高，含杂质较少的醋酸可以采用酸碱滴定法进行测定，醋酸可用萃取分离，将醋酸钠加入过量强酸后也转为醋酸，分离后再进行色谱分析或反萃取酸碱滴定；也可以中和到PH为9-10后，再用离子色谱分析；也可以用酸型阳离子交换树脂分离去金属阳离子后用选择合适条件用色谱分析。
[0004]对于氟苯咪唑成品中中含有的残留微量ppm级别的乙酸，单纯的乙酸的检测方法肯定是不适用的，同时还要保证良好的线性范围，良好的稳定性，较好的准确度和精确度，而且研究的方法可以操作简单、快速，测定结果准确可靠，从而可以有效的控制氟苯咪唑原料药的质量，保证药用的安全性和可靠性。
[0005]因此，本研究采用HPLC法，建立了一种氟苯咪唑原料药中乙酸的测定方法。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是提供一种操作简单、快速，测定结果准确可靠氟苯咪唑原料药中乙酸的测定方法，来解决残留乙酸的含量检测。
[0007]本发明采用的技术方案为:高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸，其创新点在于:包括样品配制、样品测定和含量计算步骤；所述样品配制步骤如下:
Cl)样品溶液配制:精确称取500mg氟苯咪唑样品于IOOml具塞称量瓶中，精密移取
1.5ml甲酸，充分振摇使完全溶解；再精密移取50.0ml水，慢慢加入，边加边振摇，加完后充分振摇5min,用0.45 μ m过滤头,过滤得样品溶液；
(2)对照溶液配制:称取冰乙酸IOOmg,加水配制成25Pgml/1水溶液,用0.45 μ m过滤头，过滤得对照溶液；
(3)空白溶液配制:精密移取1.5ml甲酸，再精密移取50.0ml水，用0.45 μ m过滤头，过滤得空白溶液配制；
所述的样品测定步骤为选用型号为ZORBAX SB — C18的色谱柱，采用双泵系统，所用流动相分别是磷酸缓冲液一甲醇=950:50作为流动相A和甲醇作为流动相B，流动相B采用梯度洗脱，设定色谱检测波长为210nm，流速为1.2 mL mirT1 ;灵敏度为1.0 AUFS ;柱温为250C ;进样量为20 PL，分别将样品溶液、对照溶液和空白溶液进行样品测定；所述含量测定步骤为以外标法计算样品中乙酸的残留样量。
[0008]进一步的，所述流动相A磷酸缓冲液为0.7mL磷酸于1000mL水中，用lmol L氢氧化钠调pH为3.0,甲醇溶液为色谱纯甲醇。
[0009]进一步的，流动相B甲醇溶液为色谱纯甲醇。
[0010]进一步的，所述流动相B的梯度洗脱程序为:从O — 5min时间内，流动相B流量为0%，从5 — 5.0lmin时间里，流动相B流量从O — 100%,从5.01 — 15min时间内，流动相B流量为100%,从15 — 15.0lmin时间内，流动相B流量从100 — 0%,从15.01 — 20min时间内，流动相B流量为0%。
[0011]如下表所示:.'
【权利要求】
1.高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸，其特征在于:包括样品配制、样品测定和含量计算步骤；所述样品配制步骤如下: (1)样品溶液配制:精确称取500mg氟苯咪唑样品于100mL具塞称量瓶中，精密移取1.5ml甲酸，充分振摇使完全溶解；再精密移取50.0ml水，慢慢加入，边加边振摇，加完后充分振摇5min,用0.45 μ m过滤头,过滤得样品溶液； (2)对照溶液配制:称取冰乙酸IOOmg,加水配制成25Pgml/1水溶液,用0.45 μ m过滤头，过滤得对照溶液； (3)空白溶液配制:精密移取1.5ml甲酸，再精密移取50.0ml水，用0.45 μ m过滤头，过滤得空白溶液配制； 所述的样品测定步骤为选用型号为ZORBAX SB—C18的色谱柱，采用双泵系统，所用流动相分别是磷酸缓冲液-甲醇=950:50作为流动相A，甲醇作为流动相B，流动相B采用梯度洗脱，设定色谱检测波长为210nm，流速为1.2 mL mirT1 ;灵敏度为1.0 AUFS ;柱温为25°C;进样量为20 μL，分别将样品溶液、对照溶液和空白溶液进行样品测定； 所述含量测定步骤为以外标法计算样品中乙酸的残留样量。
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸，其特征在于:所述流动相A磷酸缓冲液为0.7mL磷酸于1000mL水中，用lmol L氢氧化钠调pH为3.0，甲醇溶液为色谱纯甲醇。
3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸，其特征在于:流动相B甲醇溶液为色谱纯甲醇。
4.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸，其特征在于:所述流动相B的梯度洗脱程序为:从O — 5min时间内，流动相B流量为0%，从5 — 5.0lmin时间里，流动相B流量从O — 100%,从5.01 — 15min时间内，流动相B流量为100%,从15 — 15.0lmin时间内，流动相B流量从100 — 0%,从15.01 — 20min时间内，流动相B流量为0%。
5.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定氟苯咪唑原料药中的残留乙酸，其特征在于:所述的水为重蒸水。
【文档编号】G01N30/06GK103983728SQ201410249281
【公开日】2014年8月13日 申请日期:2014年6月6日 优先权日:2014年6月6日
【发明者】王琳, 丁海宏, 黄 俊 申请人:江苏宝众宝达药业有限公司