复方岩白菜素片药品质量检测方法
【专利摘要】本发明涉及复方岩白菜素片药品质量检测方法，属于药品检测【技术领域】。本发明包括复方岩白菜素片药品中中岩白菜素的含量测定方法等。本发明方法对复方岩白菜素片中所含岩白菜素采用高效液相色谱法（HPLC）测定含量，克服了紫外分光光度法，精确度不高，无专属性，难以准确反映产品的质量的问题。本发明所建立的液相方法条件线性良好，稳定性好重复性高，具有分离效果好、简便、快速、测定准确、灵敏、专属性强等特点，可作为产品有效的质量控制方法。
【专利说明】复方岩白菜素片药品质量检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药品检测【技术领域】，具体涉及复方岩白菜素片药品质量检测方法。
【背景技术】
[0002] 复方岩白菜素片是由岩白菜素与马来酸氯苯那敏制成的复方制剂，对慢性支气管 炎具有良好的镇咳、祛痰、镇痛、镇静作用。岩白菜素又称岩白菜内脂，属异香豆素类化合 物，是从虎耳草科植物岩白菜或云南岩白菜以及落新妇和多花落新妇等植物中提取得到。 主要作用是止咳祛痰和慢性支气管炎的治疗，近年来药理实验发现岩白菜素还具有抗炎、 护肝、抗溃疡、提高免疫等作用。复方岩白菜素片在体内吸收快、排泄快，故作用时间短。且 反复使用无明显耐药性，不良反应较少，较大剂量对心、肾和肝也无明显毒性。近年来复方 岩白菜素片市场的逐步扩大，消费者、新闻媒体对复方岩白菜素片的品质要求越来越高，对 复方岩白菜素片的质量关注度越来越强，而复方岩白菜素片现行质量标准为紫外分光光度 法，精确度不高。该标准方法无专属性，难以准确反映产品的质量，已不能适应中药现代化 发展的技术要求及产品质量稳定可控要求。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种复方岩白菜素片药品质量检 测方法，该方法具有分离效果好，测定准确、灵敏、快速及专属性强等特点。
[0004] 本发明是对该药原有的质量标准进行提升，即把原标准中的紫外分光光度法提升 为高效液相色谱仪进行有效成分岩白菜素的含量测定，具体的技术方案为： 复方岩白菜素片药品质量检测方法，1000片复方岩白菜素片包括如下组分：岩白菜 素125g，扑尔敏2g; 其岩白菜素含量的检测包括如下步骤： 步骤（1)，色谱条件与系统适应性试验：高效液相色谱的色谱柱以十八烷基硅烷键合 硅胶为填充剂；以有机溶剂-水为流动相，流速〇. 5-5ml/min，柱温25-40°C;检测波长为 272nm;理论板数按岩白菜素峰计算应不低于4500 ;所述的有机溶剂为乙腈或甲醇，所述的 有机溶剂与水的体积比为10 :90?18 :82 ; 步骤（2)，对照品溶液的制备:以流动相为溶剂，将岩白菜素对照品加入溶剂中，制成 每Iml含0. 6mg岩白菜素的溶液，得到对照品； 步骤（3)，供试品溶液的制备:将供试得的复方岩白菜素片10片研细，以流动相为 溶剂，将其溶于50ml溶剂中，滤纸滤过，取续滤液2ml置IOml容量瓶中，加流动相定容， 0.45um微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；其中，研细为药品领域常规手段，无具体粒度要 求；同时，本发明中过滤方式不限定为上述步骤（3)中所述的方式，只要能达到本发明检测 的目的，且不影响检测结果的方式都可以。
[0005] 步骤（4)，分别吸取步骤（2)得到的对照品溶液与步骤（3)得到的供试品溶液各 5?2〇μ1，注入高效液相色谱仪，测定，记录色谱图，取峰面积按外标法计算，测得岩白菜素 含量； 如果岩白菜素（C22H22O8)的含量为标不量的93. 0%?107. 0%，贝U为合格产品；如果岩白 菜素的含量不为标示量的93. 0%?107. 0%，则为不合格产品。
[0006] 进一步，优选的是步骤（1)所述的流速为lml/min，柱温为35°C。
[0007] 进一步，优选的是步骤（1)所述的流动相为甲醇和水的混合溶剂，甲醇和水的体积 比为15 :85。
[0008] 进一步，优选的是步骤（1)所述的流动相为乙腈和水的混合溶剂，乙腈和水的体积 比为15 :85。
[0009] 复方岩白菜素片应符合片剂项下有关规定（《中国药典》2010年版附录)。
[0010] 复方岩白菜素片性状：本品为白色片。作用与用途：镇咳袪痰，用于慢性支气管 炎。用法用量：口服，一次1片，一日3次。贮藏条件：避光，密封保存。
[0011] 本发明对岩白菜素对照品溶液进行了全波长扫描，结果显示岩白菜素在220nm和 272nm波长处有最大吸收峰，但由于在220nm处干扰较大，故选定272nm为检测波长。
[0012] 在HPLC法测定时，以岩白菜素作为指标，经过方法学考察，选用流动相乙腈-水 (15:85)，岩白菜素峰的理论板数较高，为5300，吸收峰峰型较好且保留时间适宜。平均回收 率为100. 86%，RSD为0. 89%。在系统耐受性实验中，考察不同分析柱，适当改变流动相两组 分比例，柱温以及流速，不影响分析结果。
[0013] 本发明与现有技术相比，其有益效果为： (1) 本发明提供一种复方岩白菜素片药品质量检测方法，该方法对复方岩白菜素片中 所含岩白菜素采用高效液相色谱法（HPLC)测定含量，克服了紫外分光光度法，精确度不高， 无专属性，难以准确反映产品的质量的问题； (2) 本发明所建立的液相方法条件线性良好，稳定性好重复性高，具有分离效果好、简 便、快速、测定准确、灵敏、专属性强等特点，可作为产品有效的质量控制方法。
【专利附图】
【附图说明】
[0014] 图1是本发明的含量测定岩白菜素对照品的高效液相色谱图； 图2是本发明的含量测定复方岩白菜素片样品的高效液相色谱图； 图3是本发明的含量测定阴性对照的高效液相色谱图； 其中，1为岩白菜素。
【具体实施方式】
[0015] 下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。
[0016] 本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发 明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件 或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的 常规产品。
[0017] -、对复方岩白菜素片中所含的岩白菜素含量测定方法如下： 1仪器与试药 1. 1仪器 BSA224S-CW分析天平，购自于赛多利斯科学仪器(北京）有限公司； UV-2401PC型紫外可见分光光度计，购自于日本岛津公司； LC-IOATvp型高效液相色谱仪，购自于日本岛津公司； Sro-IOATvp型紫外检测器，购自于日本岛津公司； CT0-10ASvp型柱温箱，购自于日本岛津公司； 威玛龙色谱工作站。
[0018] 1.2药品及试剂 岩白菜素对照品，购自中国食品药品检定研究院，批号111532-200202，含量以94. 4% 计； 复方岩白菜素片供试品由昆明振华制药厂有限公司提供，批号：20140805 ;乙腈为色 谱纯，水为经0. 45μm的微孔滤膜滤过的纯化水。
[0019] 2实验方法与结果 2. 1色谱条件 色谱柱：DiamonsilC18 (5μm，4. 6mmX250mm);柱温：30°C;流动相：乙腈-水（15:85); 流速：1.Oml·mirT1;检测波长272nm:进样量10μ1，理论板数以岩白菜素计算应不低于 4500。
[0020] 2.2阴性对照溶液制备 按供试品处方工艺制备不含岩白菜素的阴性制剂，取适量阴性制剂研细，取23mg置于 50ml容量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，过滤即得阴性对照溶液。
[0021] 2.3对照品溶液的制备 精密称取岩白菜素对照品6.Omg置IOml容量瓶中，加流动相使溶解，并用流动相稀释 至刻度，摇匀，即得。
[0022] 2. 4供试品溶液制备 取复方岩白菜素片10片(批号=20140805)，精密称定，研细，精密称取细粉适量置50ml容量瓶中，加流动相30ml振摇使岩白菜素溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量 取续滤液2ml置IOml容量瓶中，加流动相定容，过滤即得供试品溶液。
[0023] 2. 5系统适应性 照"2. 1"项下色谱条件，精密吸取溶剂空白、阴性对照、供试品、对照品溶液各10μL， 分别注入色谱仪。由图1-图3可见供试品色谱中在与对照品色谱图相应的位置上有一相 同的色谱峰，而阴性无干扰。
[0024] 2.6线性关系考察 精密量取对照品溶液〇. 5ml、I. 0ml、I. 5ml、2.Oml、4.Oml置IOml容量瓶中，用流动相定 容至刻度。进样1〇μ1，记录峰面积。以岩白菜素浓度（C)为横坐标，峰面积（A)为纵坐标， 绘制标准曲线。得回归方程A=L6061X104C+5. 9323XlO4(r=0. 999)。结果表明岩白菜素 浓度在28. 32μg/ml- 2260. 6μg/ml范围内与峰面积呈良好线性系。 2. 7精密度试验 配制浓度为84. 96μg/ml的岩白菜素对照品溶液，连续进样6次。计算岩白菜素峰面 积RSD值为0. 38%。
[0025] 2.8稳定性试验 取复方岩白菜素片供试品溶液，室温保存。分别于〇h、2h、4h、6h、8h、12h、24h进样测 定。结果岩白菜素峰面积值RSD为0. 57%。表明供试品溶液在24h内稳定性良好。
[0026] 2.9重复性试验 取同一批复方岩白菜素片6份，按供试品溶液的制备方法制备并依法测定含量。结果 岩白菜素含量的RSD为0. 55%(n=6)。表明该方法重现性较好。
[0027] 2. 10加样回收试验 精密称取岩白菜素对照品122. 5mg，置于50ml容量瓶中，加流动相溶解定容，配制成含 量为2. 45mg/ml的标准储备液。
[0028] 精密称取已检测含量的复方岩白菜素片（80. 6%) 15mg，置50ml容量瓶中，分别加 入不同体积的岩白菜素标准储备液4ml、5ml、6ml各3份，再精密加入流动相30ml振摇使溶 解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤纸滤过，精密量取续滤液2ml置IOml容量瓶中，加流动相 定容，0. 45um微孔滤膜滤过，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2〇μ1，注入高效液 相色谱仪，测定，记录色谱图，取峰面积按外标法计算，测定岩白菜素含量，按下列公式计算 岩白菜素的加标回收率。
[0029] 加标回收率（％)=(测得供试样品中岩白菜素量-样品中岩白菜素量）/标准储备 液中加入岩白菜素量X100% 表1加标回收率测定结果
【权利要求】
1. 复方岩白菜素片药品质量检测方法，其特征在于1000片复方岩白菜素片包括如下 组分：岩白菜素125g，扑尔敏2g ; 其岩白菜素含量的检测包括如下步骤： 步骤（1)，色谱条件与系统适应性试验：高效液相色谱的色谱柱以十八烷基硅烷键合 硅胶为填充剂；以有机溶剂-水为流动相，流速〇. 5-5ml/min，柱温25-40°C ;检测波长为 272nm ;理论板数按岩白菜素峰计算应不低于4500 ;所述的有机溶剂为乙腈或甲醇，所述的 有机溶剂与水的体积比为10 :90?18 :82 ; 步骤（2)，对照品溶液的制备:以流动相为溶剂，将岩白菜素对照品加入溶剂中，制成 每lml含0. 6mg岩白菜素的溶液，得到对照品； 步骤（3)，供试品溶液的制备:将供试得的复方岩白菜素片10片研细，以流动相为溶 齐U，将其溶于50ml溶剂中，过滤，取续滤液2ml置10ml容量瓶中，加流动相定容，过滤，即得 供试品溶液； 步骤（4)，分别吸取步骤（2)得到的对照品溶液与步骤（3)得到的供试品溶液各5? 20W，注入高效液相色谱仪，测定，记录色谱图，取峰面积按外标法计算，测得岩白菜素含 量； 如果岩白菜素的含量为标示量的93. 0%?107. 0%，则为合格产品；如果岩白菜素的含 量不为标示量的93. 0%?107. 0%，则为不合格产品。
2. 根据权利要求1所述的复方岩白菜素片药品质量检测方法，其特征在于步骤（1)所 述的流速为lml/min，柱温为35°C。
3. 根据权利要求1所述的复方岩白菜素片药品质量检测方法，其特征在于步骤（1)所 述的流动相为甲醇和水的混合溶剂，甲醇和水的体积比为15 :85。
4. 根据权利要求1所述的复方岩白菜素片药品质量检测方法，其特征在于步骤（1)所 述的流动相为乙腈和水的混合溶剂，乙腈和水的体积比为15 :85。
【文档编号】G01N30/88GK104483432SQ201410813386
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年12月24日 优先权日:2014年12月24日
【发明者】李俊, 何耀莹, 刘兴娟, 冯春 申请人:昆明振华制药厂有限公司