检测多库酯钙软胶囊清洁残留量的方法与流程

本发明涉及医药技术领域，具体而言，本方面涉及一种检测多库酯钙软胶囊清洁残留量的方法。

背景技术：

多库酯钙软胶囊是一种表面活性剂，口服后在肠内可使水和脂肪类物质浸入粪便，促其软化。在多库酯钙软胶囊的生产过程中，多库酯钙活性药物成分会残留在生产装置上，而多库酯钙难溶于水和常见有机溶剂，一般溶于玉米油中，且紫外响应较弱，残留限度低，难以准确测定。

因而，检测多库酯钙软胶囊清洁残留量的方法仍有待进一步研究。

技术实现要素：

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种检测多库酯钙软胶囊清洁残留量的方法。

在本发明的一个方面，本发明提出了一种检测多库酯钙软胶囊清洁残留量的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：通过hplc法对待测多库酯钙进行检测，所述hplc法的条件为：hplc色谱柱：c18，5微米，4.6×150毫米或等效柱；流动相：34体积份0.01摩尔/升四丁基磷酸氢铵水溶液与66体积份乙腈的混合溶液；流速：1.5毫升/分钟；进样量：100微升；柱温：30摄氏度；检测波长：214纳米。由此，采用该方法可以准确测定多库酯钙软胶囊清洁残留量。

另外，根据本发明上述实施例的检测多库酯钙软胶囊清洁残留量的方法还可以具有如下附加的技术特征：

在本发明的一些实施例中，所述待测多库酯钙为生产多库酯钙软胶囊过程中残留在生产装置中的多库酯钙活性药物成分。

在本发明的一些实施例中，基于下式确定每25平方厘米板上所述待测多库酯钙的量：

其中，aspl表示hplc法检测图谱中待测多库酯钙样品的峰面积；astd表示hplc法检测图谱中多库酯钙对照品的峰面积；stdwt表示多库酯钙对照品的称样量，单位为毫克；p表示多库酯钙对照品中多库酯钙的纯度，单位为毫克/毫克；rf表示多库酯钙的平均回收率。由此，可以显著提高测得多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：

图1是根据本发明一个实施例的稀释剂50v％乙腈水溶液的hplc谱图；

图2是根据本发明一个实施例的清洗剂标准溶液的hplc谱图；

图3是根据本发明一个实施例的空白棉签提取溶液的hplc谱图；

图4是根据本发明一个实施例的多库酯钙对照品的hplc谱图；

图5是根据本发明一个实施例的待测多库酯钙样品的hplc谱图；

图6是根据本发明一个实施例的多库酯钙标准曲线图。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

在本发明的一个方面，本发明提出了一种检测多库酯钙软胶囊清洁残留量的方法。下面对根据本发明实施例的检测多库酯钙软胶囊清洁残留量的方法进行详细描述。根据本发明的实施例，该方法包括：

步骤(1)：制备对照品储备溶液

在该步骤中，制备多库酯钙对照品储备溶液。具体的，按照下列步骤平行制备2份对照品储备溶液，(a)称取已测定水分含量的多库酯钙对照品置于100ml容量瓶中，(b)加入适量乙腈水溶液振摇使其溶解，(c)使用乙腈水溶液定容至100ml。

根据本发明的一个实施例，称取已测定水分含量的多库酯钙对照品的重量并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的实施例的一个具体实施例，称取已测定水分含量的多库酯钙对照品的重量可以为50mg，由此，可以显著提高后续检测步骤中测得多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

根据本发明的再一个实施例，乙腈水溶液的浓度并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的实施例的一个具体实施例，乙腈水溶液的浓度可以为50v％，由此，可以进一步提高后续检测步骤中测得多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

步骤(2)：制备对照品溶液

在该步骤中，通过量取对照品储备溶液进行稀释制备对照品溶液。具体的，(d)量取对照品储备溶液置于50ml容量瓶中，(e)加入乙腈水溶液定容至50ml，振摇使其混匀。

根据本发明的一个实施例，量取对照品储备溶液的体积并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的实施例的一个具体实施例，量取对照品储备溶液的体积可以为5ml，发明人通过实验意外地发现，量取该体积的对照品储备溶液可以进一步提高后续检测步骤中测得多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

根据本发明的再一个实施例，乙腈水溶液的浓度并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的实施例的一个具体实施例，乙腈水溶液的浓度可以为50v％，由此，可以进一步提高后续检测步骤中测得多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

步骤(3)：制备专属性溶液

在该步骤中，首先制备空白棉签提取溶液，具体的，将空白棉签放入玻璃小瓶中，加入稀释剂50v％乙腈水溶液，将玻璃小瓶密封并依次进行超声、涡旋处理，以便得到空白棉签提取溶液。另外，发明人配制了浓度为50μg/ml的清洗剂cip-100溶液，作为清洗剂标准溶液。

根据本发明的一个实施例，加入稀释剂50v％乙腈水溶液的体积并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需求进行选择，根据本发明的一个具体实施例，加入稀释剂50v％乙腈水溶液的体积可以为4.0ml，由此，可以显著提高后续检测步骤中测得多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

根据本发明的再一个实施例，超声、涡旋处理的条件并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需求进行选择，根据本发明的一个具体实施例，超声、涡旋处理的条件可以为超声5min、涡旋1min，由此，可以进一步提高后续检测步骤中测得多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

步骤(4)：擦拭多库酯钙生产装置

在该步骤中，通过使用棉签擦拭多库酯钙生产装置，以便得到待测多库酯钙样品溶液。具体的，在多库酯钙生产装置中选择多个取样点，每个取样点的面积为25平方厘米，其中每个取样点配一玻璃小瓶并分别贴好相应标签加以区分，在玻璃小瓶中放入空白棉签并加入稀释剂50v％乙腈水溶液，用空白棉签在各取样点按从左到右或从上到下方向擦拭，擦拭完将棉签放入相应的玻璃小瓶中，将玻璃小瓶密封并依次进行超声、涡旋处理，以便得到待测多库酯钙样品溶液。

根据本发明的一个实施例，加入稀释剂50v％乙腈水溶液的体积并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需求进行选择，根据本发明的一个具体实施例，加入稀释剂50v％乙腈水溶液的体积可以为4.0ml，由此，可以显著提高后续检测步骤中测得多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

根据本发明的再一个实施例，超声、涡旋处理的条件并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需求进行选择，根据本发明的一个具体实施例，超声、涡旋处理的条件可以为超声5min、涡旋1min，由此，可以进一步提高后续检测步骤中测得多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

步骤(5)：采集多库酯钙特征峰

在该步骤中，通过hplc法采集多库酯钙对照品和待测多库酯钙样品的特征峰。具体的，所述hplc法条件包括：hplc色谱柱：c18，5微米，4.6×150毫米或等效柱；流动相：34体积份0.01摩尔/升四丁基磷酸氢铵水溶液与66体积份乙腈的混合溶液；流速：1.5毫升/分钟；进样量：100微升；柱温：30摄氏度；检测波长：214纳米。由此，采用该方法可以准确测定多库酯钙软胶囊清洁残留量。

发明人通过实验意外地发现，检测步骤中的色谱条件能够显著影响检测得到的多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确性。有鉴于此，发明人通过大量实验，从中确定了上述色谱条件，由此，可以显著提高多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

步骤(6)：确定多库酯钙软胶囊清洁残留量

在该步骤中，基于下式确定每25平方厘米板上所述待测多库酯钙的量：

其中，aspl表示hplc法检测图谱中待测多库酯钙样品的峰面积；astd表示hplc法检测图谱中多库酯钙对照品的峰面积；stdwd表示多库酯钙对照品的称样量，单位为毫克；p表示多库酯钙对照品中多库酯钙的纯度，单位为毫克/毫克；rf表示多库酯钙的平均回收率。由此，可以显著提高测得多库酯钙软胶囊清洁残留量的准确度。

下面参考具体实施例，对本发明进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本发明。

一般方法

除非特别说明，在后面的实施例中采用下列方法进行hplc检测：

hplc法条件包括：hplc色谱柱：c18，5微米，4.6×150毫米或等效柱；流动相：34体积份0.01摩尔/升四丁基磷酸氢铵水溶液与66体积份乙腈的混合溶液；流速：1.5毫升/分钟；进样量：100微升；柱温：30摄氏度；检测波长：214纳米。多库酯钙的保留时间为4.7min。

实施例1

在本实施例中，发明人按照一般方法的描述测得了稀释剂50v％乙腈水溶液的hplc谱图，参考图1，稀释剂的出峰位置与多库酯钙特征峰位置间无干扰。

实施例2

在本实施例中，发明人按照一般方法的描述测得了清洗剂标准溶液，参考图2，清洗剂标准溶液的出峰位置与多库酯钙特征峰位置间无干扰。

实施例3

在本实施例中，发明人将空白棉签放入玻璃小瓶中，加入4.0ml的稀释剂50v％乙腈水溶液，将玻璃小瓶密封并超声5分钟、涡旋1分钟，以便得到空白棉签提取溶液，然后按照一般方法的描述测得空白棉签提取溶液的hplc谱图，参考图3，空白棉签提取溶液的出峰位置与多库酯钙特征峰位置间无干扰。

实施例4

在本实施例中，发明人制备了多库酯钙对照品储备溶液和多库酯钙对照品溶液，并按照一般方法的描述测得了多库酯钙对照品溶液的hplc谱图。具体的，多库酯钙对照品储备溶液是按照下列步骤制备的：(i)称取50mg已测定水分含量的多库酯钙对照品置于100ml容量瓶中，(iii)加入适量50v％乙腈水溶液振摇使其溶解，(iv)使用50v％乙腈水溶液定容至100ml。多库酯钙对照品溶液是按照下列步骤制备的：(v)量取5ml对照品储备溶液置于50ml容量瓶中，(vi)加入50v％乙腈水溶液定容至50ml，振摇使其混匀。参考图4，多库酯钙对照品的特征峰与稀释剂峰及其他杂峰间无干扰。

实施例5

在本实施例中，发明人通过使用棉签擦拭多库酯钙生产装置，得到待测多库酯钙样品溶液。具体的，在多库酯钙生产装置中选择多个取样点，每个取样点的面积为25平方厘米，其中每个取样点配一玻璃小瓶并分别贴好相应标签加以区分，在玻璃小瓶中放入空白棉签并加入4.0ml稀释剂50v％乙腈水溶液，用空白棉签在各取样点按从左到右或从上到下方向擦拭，擦拭完将棉签放入相应的玻璃小瓶中，将玻璃小瓶密封并依次超声处理5min、涡旋处理1min，得到待测多库酯钙样品溶液，然后按照一般方法的描述测得了待测多库酯钙样品溶液的hplc图谱，参考图5，因多库酯钙软胶囊生产装置已清洗干净，无多库酯钙残留，故没有检测到多库酯钙特征峰。

实施例6

在本实施例中，发明人考察了多库酯钙在浓度10μg/ml～200μg/ml范围内的线性。具体的，发明人配制了6份多库酯钙溶液，浓度分别为10μg/ml、25μg/ml、40μg/ml、50μg/ml、100μg/ml和200μg/ml，然后按照一般方法的描述测定了其特征峰面积，以峰面积对浓度作图，参考图6，多库酯钙在浓度10μg/ml～200μg/ml范围内的线性良好。

实施例7

在本实施例中，发明人考察了一般方法的准确度。具体的，发明人在样品溶液中加入理论浓度(70μg/ml)的50％、100％和120％的多库酯钙溶液，每个水平配制3份样品，按照一般方法的描述测定其多库酯钙峰面积并计算平均回收率，50％水平样品的平均回收率为100.2％，100％水平样品的平均回收率为100.5％，120％水平样品的平均回收率为100.6％，9份不同水平结果之间的相对标准偏差为0.7％，准确度良好

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。