本发明涉及真菌检测领域,尤其涉及一种高羊茅茎秆中内生真菌检测方法。
背景技术:
高羊茅学名:festucaelatakengexe.alexeev,又名:羊茅,属禾本目,禾本科多年生地被植物。按功能用途分类:分草坪型(观赏)、牧草型(作为牧草饲养牲畜)。性喜寒冷潮湿、温暖的气候,在肥沃、潮湿、富含有机质、ph值为4.7-8.6的细壤土中生长良好。大量应用于运动场草坪和防护草坪。作为牧草饲养牲畜。
但是,目前的研究发现,许多高羊茅自主内含有内生真菌,会产生生物碱,对牛羊产生危害,所以,对牧草进行内生真菌检测具有重大意义。
技术实现要素:
发明目的:针对现有技术的不足与缺陷,本发明提供一种染色效率高,观察方便,成本低的高羊茅茎秆中内生真菌检测方法。
技术方案:本发明所述的高羊茅茎秆中内生真菌检测方法,包括下述步骤,
(1)将高羊茅植株剪成5至8厘米的小段,去除外部的表皮,取茎秆部分;
(2)对步骤(1)获得的茎秆采用50%酒精溶液对其表面进行擦拭,进行表面消毒;
(3)使用消毒后的镊子和小刀将步骤(2)获得的茎秆纵向切开,裸露出茎髓;
(4)用镊子刮取部分茎髓物质,放置到消毒后的玻璃板上;
(5)向步骤(4)获得的茎髓物质滴上染色剂,染色操作45至60秒;
(6)将盖玻片放置在步骤(5)获得的茎髓物质上,挤压4至5次,将茎髓物质均匀铺开;
(7)对步骤(6)获得的高羊茅茎秆样品进行内生真菌的检测并获得检测结果。
其中,所述的步骤(3)采用高温湿热法对镊子和小刀进行消毒。
其中,所述的步骤(4)的玻璃板采用长度为4厘米,宽度为1.5厘米的玻璃板。
其中,所述的步骤(5)的染色剂采用孟加拉红染色剂。
有益效果:与现有技术相比,本发明具有以下显著优点:本发明的检测方法染色效率高,观察方便,成本低。
具体实施方式
实施例1:
本实施例的高羊茅茎秆中内生真菌检测方法,包括下述步骤,
(1)将高羊茅植株剪成5厘米的小段,去除外部的表皮,取茎秆部分;
(2)对步骤(1)获得的茎秆采用50%酒精溶液对其表面进行擦拭,进行表面消毒;
(3)使用采用高温湿热法消毒后的镊子和小刀将步骤(2)获得的茎秆纵向切开,裸露出茎髓;
(4)用镊子刮取部分茎髓物质,放置到消毒后的玻璃板上,玻璃板采用长度为4厘米,宽度为1.5厘米的玻璃板;
(5)向步骤(4)获得的茎髓物质滴上孟加拉红染色剂,染色操作45秒;
(6)将盖玻片放置在步骤(5)获得的茎髓物质上,挤压4次,将茎髓物质均匀铺开;
(7)对步骤(6)获得的高羊茅茎秆样品进行内生真菌的检测并获得检测结果。
实施例2:
本实施例的高羊茅茎秆中内生真菌检测方法,包括下述步骤,
(1)将高羊茅植株剪成8厘米的小段,去除外部的表皮,取茎秆部分;
(2)对步骤(1)获得的茎秆采用50%酒精溶液对其表面进行擦拭,进行表面消毒;
(3)使用采用高温湿热法消毒后的镊子和小刀将步骤(2)获得的茎秆纵向切开,裸露出茎髓;
(4)用镊子刮取部分茎髓物质,放置到消毒后的玻璃板上,玻璃板采用长度为4厘米,宽度为1.5厘米的玻璃板;
(5)向步骤(4)获得的茎髓物质滴上孟加拉红染色剂,染色操作60秒;
(6)将盖玻片放置在步骤(5)获得的茎髓物质上,挤压5次,将茎髓物质均匀铺开;
(7)对步骤(6)获得的高羊茅茎秆样品进行内生真菌的检测并获得检测结果。