少阳感冒颗粒的检测方法与流程

文档序号:11579468阅读:225来源:国知局

本发明涉及一种中药制剂的检测方法,特别涉及一种少阳感冒颗粒的检测方法。



背景技术:

少阳感冒颗粒是《卫生部药品标准》中药成方制剂第一册收载的品种,处方为柴胡、黄芩、生晒参、甘草、半夏、干姜、大枣、青蒿,是纯中药的颗粒剂,具有扶正解表,清热和中的作用,是目前市场上用于治疗寒热往来,口苦咽干,头晕目眩,不思饮食,心烦恶心的常用药品。

本药品的处方来源于《伤寒杂病论》中的名方少阳感冒汤,方中用量最大的是柴胡,占整个处方量的三分之一,其功效主要是和解少阳,和胃降逆,扶正祛邪,但是因为柴胡属于常用药且使用量较大,而柴胡的产量有限,所以其伪品野棉花根也被有意或者无意混入使用,野棉花根为毛茛科植物野棉花的根,《滇南本草》:“性微寒,味苦,有毒。”《湖南药物志》:“温,苦,有大毒。”所以,为了防止药品中混入对人体有害的野棉花根,寻找一种好的办法来监测野棉花根已是当务之急。

另外,本药品的处方中另一用量较大的药材之一是青蒿,但是青蒿药材容易与茵陈混淆入药,给药品质量和疗效造成不良影响,茵陈为菊科多年生草本植物茵陈蒿或滨蒿的幼苗,性味苦寒,归脾、胃、肝、胆经,主要的功效就是清利湿热,消退黄疸,亦可用于湿疮瘙痒、浸流黄水等症,而青蒿却为菊科一年生草本植物青蒿和黄花蒿的全草,而以黄花蒿为最多见、最普遍,性味苦、辛、寒,归肝、胆、肾经,主要的功效为清退虚热,凉血截疟,解暑解热等,用于疟疾寒热,阴虚发热,骨蒸劳瘵,日晡潮热,手足心热,暑热外感,发热无汗或有汗,头昏头痛,口渴脉洪数,或温热病后期,温热之邪入阴分,夜热早凉,热退无汗之证或温热病后低热不退等等,两者的作用不同,必须要有相应的检测方法进行监测。

到目前为止,还没有一套完善的检测方法对其有效成分进行相应的检测,不法厂商就可能在生产药品时不严格按照处方的剂量配料,肆意减少价格高的原料,致使药品的疗效明显下降,影响药品的安全有效,严重损害患者的利益。



技术实现要素:

本发明的目的是提供一种少阳感冒颗粒的检测方法,以避免不法厂商少投或不投相应药材原料,致使药品的疗效下降的问题,以及避免伪品野棉花根和茵陈的混入,防止服用后中毒的药害事件的发生,保证该药品安全有效。

本发明的技术方案是这样的:

少阳感冒颗粒的处方是:柴胡100g、黄芩149.4g、生晒参50g、甘草100g、半夏149.4g、干姜100g、大枣100g、青蒿149.4g。

制法:以上八味,将柴胡、干姜提取挥发以油,药渣与其余黄芩等六味,加水煎煮三次,第一次3小时,第二次2小时,第三次1小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.40的清膏,喷雾干燥,加蔗糖446g,糊精150g,混匀,以70%乙醇制粒,干燥喷入挥发油,混匀,即得,分装,每袋重8g。

本发明提供的少阳感冒颗粒的检测方法,包括性状、成分鉴别、检查、含量测定,其中,成分鉴别是黄芩的鉴别、柴胡的鉴别、野棉花根的鉴别、生晒参的鉴别、茵陈和青蒿的鉴别、甘草的鉴别,含量测定是对颗粒中黄芩苷的含量测定。

性状:本品为棕褐色颗粒;气芳香,味甘、微苦。

检查:应符合颗粒剂项下有关的各项规定(《中国药典》2015年版)。

成分鉴别:

(1)黄芩的鉴别:是取本品6g,研细,加乙醇18~22ml,超声处理10~30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水18~22ml溶解,用盐酸调ph值至2~3,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次18~22ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶g薄层板上,以按体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=4~6∶2~4∶0.5~2∶0.5~2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;

(2)柴胡的鉴别:是取本品6g,加水18~22ml,搅拌使溶解,离心,取上清液,加在100~200目,8g,内径为2.5~3cm,湿法装柱的聚酰胺柱a上,分别用水、20%乙醇和50%乙醇各90~110ml洗脱,收集50%乙醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取柴胡对照药材1g,加水煎煮1.5小时,滤过,滤液浓缩至10ml,加在100~200目,4g,内径为2cm,湿法装柱的聚酰胺柱b上,分别用水100ml和50%乙醇150ml洗脱,收集50%乙醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液2~10μl和对照药材溶液2μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的乙酸乙酯∶乙醇∶水=11~13∶1~3∶0.5~2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液(先配10%的硫酸乙醇溶液,再称取5g的对二甲氨基甲醛溶于100ml的硫酸乙醇溶液即得),热风吹至斑点显色清晰,置波长为365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;

(3)野棉花根的鉴别:是取本品8g,加石油醚30~50ml,浸泡10~30分钟,超声处理20~40分钟,滤过,滤液挥发至1~3ml,作为供试品溶液,另取野棉花根,粉碎,加石油醚40ml,浸泡20分钟,超声处理30分钟,滤过,滤液挥发至2ml,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的正已烷∶乙酸乙酯=8~10∶0.5~2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,不得显相同颜色的斑点;

(4)生晒参的鉴别:是取本品8g,研细,再加正丁醇40~60ml,超声处理20~40分钟,滤过,滤液用10~30ml正丁醇饱和的水溶液洗涤,弃去水液,将正丁醇液浓缩至干,残渣加甲醇0.5~2ml使溶解,作为供试品溶液,另取人参对照药材1g,加水煎煮1小时,放冷,滤过,滤液置分液漏斗中,加正丁醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液用20ml正丁醇饱和的水溶液洗涤,弃去水液,将正丁醇液浓缩至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各6μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶水=14~16∶3~5∶0.5~2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以20%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;

(5)茵陈和青蒿的鉴别:是取本品1g,加甲醇8~12ml,超声处理20~40分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1~3ml使溶解,作为供试品溶液,取滨蒿内酯对照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作为滨蒿内酯对照品溶液,取青蒿素对照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作为青蒿素对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各5μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=6~8∶3~5∶1~3为展开剂,展开,取出,晾干,置365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与青蒿素对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,在与滨蒿内酯对照品色谱相应的位置上,不得显相同颜色的荧光斑点;

(6)甘草的鉴别:是取本品6g,研细,加乙醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml溶解,用盐酸调ph值至2~3,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,取甘草对照药材1g,加水适量,煎煮30分钟,放冷,滤过,滤液浓缩至20ml,用水饱和的正丁醇振摇提取2次,每次20ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇饱和的水洗涤2次,每次10ml,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法吸取供试品溶液10μl与对照药材溶液5~10μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的三氯甲烷∶甲醇∶水=40∶10∶1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。

其中,更具体的成分鉴别方法是:

(1)黄芩的鉴别是取本品6g,研细,加乙醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml溶解,用盐酸调ph值至2~3,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶g薄层板上,以按体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=5∶3∶1∶1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;

(2)柴胡的鉴别是取本品6g,加水20ml,搅拌使溶解,离心,取上清液,加在100~200目,8g,内径为2.5~3cm,湿法装柱的聚酰胺柱a上,分别用水、20%乙醇和50%乙醇各100ml洗脱,收集50%乙醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取柴胡对照药材1g,加水煎煮1.5小时,滤过,滤液浓缩至10ml,加在100~200目,4g,内径为2cm,湿法装柱的聚酰胺柱b上,分别用水100ml和50%乙醇150ml洗脱,收集50%乙醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液2~10μl和对照药材溶液2μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的乙酸乙酯∶乙醇∶水=12∶2∶1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液,热风吹至斑点显色清晰,置波长为365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;

(3)野棉花根的鉴别是取本品8g,加石油醚40ml,浸泡20分钟,超声处理30分钟,滤过,滤液挥发至2ml,作为供试品溶液,另取野棉花根,粉碎,加石油醚40ml,浸泡20分钟,超声处理30分钟,滤过,滤液挥发至2ml,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的正已烷∶乙酸乙酯=9∶1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,不得显相同颜色的斑点;

(4)生晒参的鉴别是取本品8g,研细,再加正丁醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液用20ml正丁醇饱和的水溶液洗涤,弃去水液,将正丁醇液浓缩至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取人参对照药材1g,加水煎煮1小时,放冷,滤过,滤液置分液漏斗中,加正丁醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液用20ml正丁醇饱和的水溶液洗涤,弃去水液,将正丁醇液浓缩至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各6μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶水=15∶4∶1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以20%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;

(5)茵陈和青蒿的鉴别是取本品1g,加甲醇10ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液,取滨蒿内酯对照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作为滨蒿内酯对照品溶液,取青蒿素对照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作为青蒿素对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各5μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=7∶4∶2为展开剂,展开,取出,晾干,置365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与青蒿素对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,在与滨蒿内酯对照品色谱相应的位置上,不得显相同颜色的荧光斑点。

黄芩苷的含量测定:

照高效液相色谱法测定

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以按体积比计的甲醇∶水∶磷酸=47∶53∶0.2为流动相,检测波长为315nm,理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1ml含60μg溶液,即得。

供试品溶液的制备取装量差异项下的本品,混匀,取适量,研细,取约3g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250w,频率50khz)30分钟,放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。

本品每袋重8g,每袋含黄芩以黄芩苷计,不得少于20.0mg。

本发明所述的展开剂之比和流动相之比均以体积比计。

本发明的有益效果:

本发明通过对少阳感冒颗粒中黄芩的鉴别、甘草的鉴别、柴胡的鉴别、生晒参的鉴别、黄芩苷的含量测定,让几种药材有了明确的质量指标,确保了少阳感冒颗粒中各味药材的使用,从而保证了药品的疗效,另一方面,柴胡的伪品野棉花根也能有效的检测,青蒿药材的混淆品茵陈也得到了监测,从而避免了有毒成分危害患者的健康,本发明能更好更全面地反映少阳感冒颗粒的质量,而且能有效地控制不法厂商生产伪劣少阳感冒颗粒,从而保证了药品的疗效和安全,保证了患者的利益,本发明科学合理、切实可行。

具体实施方式

实施例1

处方:柴胡100g、黄芩149.4g、生晒参50g、甘草100g、半夏149.4g、干姜100g、大枣100g、青蒿149.4g。

制法:以上八味,将柴胡、干姜提取挥发以油,药渣与其余黄芩等六味,加水煎煮三次,第一次3小时,第二次2小时,第三次1小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度为1.40的清膏,喷雾干燥,加蔗糖446g,糊精150g,混匀,以70%乙醇制粒,干燥喷入挥发油,混匀,即得,分装,每袋重8g。

性状:本品为棕褐色颗粒;气芳香,味甘、微苦。

检查:应符合冲剂项下有关的各项规定(《中国药典》2015年版)。

成分鉴别:

(1)黄芩的鉴别是取本品6g,研细,加乙醇18ml,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水18ml溶解,用盐酸调ph值至2~3,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次18ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶g薄层板上,以按体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=4∶2∶0.5∶0.5为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;

(2)柴胡的鉴别是取本品6g,加水18ml,搅拌使溶解,离心,取上清液,加在100~200目,8g,内径为2.5~3cm,湿法装柱的聚酰胺柱a上,分别用水、20%乙醇和50%乙醇各90ml洗脱,收集50%乙醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取柴胡对照药材1g,加水煎煮1.5小时,滤过,滤液浓缩至10ml,加在100~200目,4g,内径为2cm,湿法装柱的聚酰胺柱b上,分别用水100ml和50%乙醇150ml洗脱,收集50%乙醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液2~10μl和对照药材溶液2μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的乙酸乙酯∶乙醇∶水=11∶1∶0.5为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液,热风吹至斑点显色清晰,置波长为365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;

(3)野棉花根的鉴别是取本品8g,加石油醚30ml,浸泡10分钟,超声处理20分钟,滤过,滤液挥发至1ml,作为供试品溶液,另取野棉花根,粉碎,加石油醚40ml,浸泡20分钟,超声处理30分钟,滤过,滤液挥发至2ml,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的正已烷∶乙酸乙酯=8~:0.5为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,不显相同颜色的斑点;

(4)生晒参的鉴别是取本品8g,研细,再加正丁醇40ml,超声处理20分钟,滤过,滤液用10ml正丁醇饱和的水溶液洗涤,弃去水液,将正丁醇液浓缩至干,残渣加甲醇0.5ml使溶解,作为供试品溶液,另取人参对照药材1g,加水煎煮1小时,放冷,滤过,滤液置分液漏斗中,加正丁醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液用20ml正丁醇饱和的水溶液洗涤,弃去水液,将正丁醇液浓缩至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各6μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶水=14∶3∶0.5为展开剂,展开,取出,晾干,喷以20%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;

(5)茵陈和青蒿的鉴别是取本品1g,加甲醇8ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,取滨蒿内酯对照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作为滨蒿内酯对照品溶液,取青蒿素对照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作为青蒿素对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各5μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=6∶3∶1为展开剂,展开,取出,晾干,置365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与青蒿素对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,在与滨蒿内酯对照品色谱相应的位置上,不显相同颜色的荧光斑点。

(6)甘草的鉴别是取本品6g,研细,加乙醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml溶解,用盐酸调ph值至2~3,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,取甘草对照药材1g,加水适量,煎煮30分钟,放冷,滤过,滤液浓缩至20ml,用水饱和的正丁醇振摇提取2次,每次20ml,合并正丁醇提取液,用正丁醇饱和的水洗涤2次,每次10ml,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法吸取供试品溶液10μl与对照药材溶液5~10μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的三氯甲烷∶甲醇∶水=40∶10∶1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。

黄芩苷的含量测定:

照高效液相色谱法测定

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以按体积比计的甲醇∶水∶磷酸=47∶53∶0.2为流动相,检测波长为315nm,理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量,精密称定,加70%乙醇制成每1ml含60μg溶液,即得。

供试品溶液的制备取装量差异项下的本品,混匀,取适量,研细,取约3g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇50ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250w,频率50khz)30分钟,放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。

本品每袋重8g,每袋含黄芩以黄芩苷计,为27.0mg。

实施例2

本实施例中,除成分鉴别步骤(1)至步骤(5)与实施例1不同之外,其余方法均相同。

其中,成分鉴别:

(1)黄芩的鉴别是取本品6g,研细,加乙醇22ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水22ml溶解,用盐酸调ph值至2~3,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次22ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶g薄层板上,以按体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=6∶4∶2∶2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;

(2)柴胡的鉴别是取本品6g,加水22ml,搅拌使溶解,离心,取上清液,加在100~200目,8g,内径为2.5~3cm,湿法装柱的聚酰胺柱a上,分别用水、20%乙醇和50%乙醇各110ml洗脱,收集50%乙醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取柴胡对照药材1g,加水煎煮1.5小时,滤过,滤液浓缩至10ml,加在100~200目,4g,内径为2cm,湿法装柱的聚酰胺柱b上,分别用水100ml和50%乙醇150ml洗脱,收集50%乙醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液2~10μl和对照药材溶液2μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的乙酸乙酯∶乙醇∶水=13∶3∶2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液,热风吹至斑点显色清晰,置波长为365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;

(3)野棉花根的鉴别是取本品8g,加石油醚50ml,浸泡30分钟,超声处理40分钟,滤过,滤液挥发至3ml,作为供试品溶液,另取野棉花根,粉碎,加石油醚40ml,浸泡20分钟,超声处理30分钟,滤过,滤液挥发至2ml,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的正已烷∶乙酸乙酯=10∶2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,不显相同颜色的斑点;

(4)生晒参的鉴别是取本品8g,研细,再加正丁醇60ml,超声处理40分钟,滤过,滤液用30ml正丁醇饱和的水溶液洗涤,弃去水液,将正丁醇液浓缩至干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液,另取人参对照药材1g,加水煎煮1小时,放冷,滤过,滤液置分液漏斗中,加正丁醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液用20ml正丁醇饱和的水溶液洗涤,弃去水液,将正丁醇液浓缩至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各6μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶水=16∶5∶2为展开剂,展开,取出,晾干,喷以20%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;

(5)茵陈和青蒿的鉴别是取本品1g,加甲醇12ml,超声处理40分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇3ml使溶解,作为供试品溶液,取滨蒿内酯对照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作为滨蒿内酯对照品溶液,取青蒿素对照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作为青蒿素对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各5μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=8∶5∶3为展开剂,展开,取出,晾干,置365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,供试品色谱中,在与青蒿素对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,在与滨蒿内酯对照品色谱相应的位置上,不显相同颜色的荧光斑点。

实施例3

本实施例中,除成分鉴别步骤(1)至步骤(5)与实施例1不同之外,其余方法均相同。

其中,成分鉴别:

(1)黄芩的鉴别是取本品6g,研细,加乙醇20ml,超声处理20分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml溶解,用盐酸调ph值至2~3,用乙酸乙酯振摇提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取黄芩苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶g薄层板上,以按体积比计的乙酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水=5∶3∶1∶1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%三氯化铁乙醇溶液,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;

(2)柴胡的鉴别是取本品6g,加水20ml,搅拌使溶解,离心,取上清液,加在100~200目,8g,内径为2.5~3cm,湿法装柱的聚酰胺柱a上,分别用水、20%乙醇和50%乙醇各100ml洗脱,收集50%乙醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取柴胡对照药材1g,加水煎煮1.5小时,滤过,滤液浓缩至10ml,加在100~200目,4g,内径为2cm,湿法装柱的聚酰胺柱b上,分别用水100ml和50%乙醇150ml洗脱,收集50%乙醇洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取供试品溶液2~10μl和对照药材溶液2μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的乙酸乙酯∶乙醇∶水=12∶2∶1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%对二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液,热风吹至斑点显色清晰,置波长为365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;

(3)野棉花根的鉴别是取本品8g,加石油醚40ml,浸泡20分钟,超声处理30分钟,滤过,滤液挥发至2ml,作为供试品溶液,另取野棉花根,粉碎,加石油醚40ml,浸泡20分钟,超声处理30分钟,滤过,滤液挥发至2ml,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的正已烷∶乙酸乙酯=9∶1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,不显相同颜色的斑点;

(4)生晒参的鉴别是取本品8g,研细,再加正丁醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液用20ml正丁醇饱和的水溶液洗涤,弃去水液,将正丁醇液浓缩至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液,另取人参对照药材1g,加水煎煮1小时,放冷,滤过,滤液置分液漏斗中,加正丁醇50ml,超声处理30分钟,滤过,滤液用20ml正丁醇饱和的水溶液洗涤,弃去水液,将正丁醇液浓缩至干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为对照药材溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各6μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的甲苯∶乙酸乙酯∶水=15∶4∶1为展开剂,展开,取出,晾干,喷以20%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;

(5)茵陈和青蒿的鉴别是取本品1g,加甲醇10ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液,取滨蒿内酯对照品,加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液,作为滨蒿内酯对照品溶液,取青蒿素对照品,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,作为青蒿素对照品溶液,照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各5μl,分别点于同一硅胶g薄层板上,以按体积比计的60~90℃石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮=7∶4∶2为展开剂,展开,取出,晾干,置365nm紫外光灯下检视,供试品色谱中,在与青蒿素对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,在与滨蒿内酯对照品色谱相应的位置上,不显相同颜色的荧光斑点。

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