本发明涉及一种elisa待检样品的稀释液、其制备方法及其应用，属于生物检测技术领域。
背景技术：
自然界中许多病原微生物通过黏膜系统侵染机体，造成机体感染。免疫球蛋白a是机体粘膜表面最有特征的防御因素。它和其它防御因素一起(包括细胞及体液免疫两方面)共同作用，可防止粘膜感染。iga在正常人血清中的含量仅次于免疫球蛋白g(igg)，占血清免疫球蛋白含量的10～20％。按其免疫功能分为血清型及分泌型两种，血清型免疫球蛋白a(iga)存在于血清中，其含量占总免疫球蛋白a的85％左右，血清型免疫球蛋白a虽有免疫球蛋白g和免疫球蛋白m的某些功能，但在血清中并不显示重要的免疫功能；分泌型免疫球蛋白a(siga)存在于分泌液中，如唾液、泪液、初乳、鼻和支气管分泌液、胃肠液、尿液、汗液等，分泌型免疫球蛋白a是机体粘膜局部抗感染免疫的主要抗体，故又称粘膜局部抗体。
通过检测机体分泌液中的siga的含量来评价黏膜免疫反应，但因igg的含量远远高于siga，往往对检测结果形成干扰，导致检测结果产生误差。
技术实现要素：
为了克服现有技术的不足，本发明的第一个目的在于提供一种elisa待检样品的稀释液，该稀释液可降低igg的干扰，确保检测结果的准确性。
实现本发明的目的可以通过采取如下技术方案达到：一种elisa待检样品的稀释液，包括以下成分：
进一步地，elisa待检样品的稀释液包括以下成分：
进一步地，elisa待检样品的稀释液包括以下成分：
本发明的第二个目的在于提供一种上述elisa待检样品的稀释液的制备方法。
实现本发明的目的可以通过采取如下技术方案达到：将bsa、nan3、硫酸铵、kcl、k2hpo4、nah2po4、nacl、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶溶解于溶剂中，定容后即得，稀释液保存于4～8℃。
进一步地，定容后，稀释液中bsa的浓度为5-35g/l、nan3的浓度为0.1-0.5g/l、硫酸铵的浓度为3.5-10.5g/l、kcl的浓度为0.11-0.27g/l、k2hpo4的浓度为0.87-1.75g/l、nah2po4的浓度为0.24-0.72g/l、nacl的浓度为0.55-15g/l、胃蛋白酶的浓度为50-300g/l和木瓜蛋白酶的浓度为80-350g/l。
本发明的第三个目的在于提供一种采用上述elisa待检样品的稀释液的应用。
实现本发明的目的可以通过采取如下技术方案达到：一种elisa待检样品的稀释液的应用，先采用如上所述的稀释液稀释elisa待检样品，然后再将经稀释的样品进行elisa检测。
进一步地，用稀释液按稀释度1:40稀释待检样品后，37℃条件下处理2h，然后进行elisa检测。
进一步地，所述待检样品为动物体液和外分泌液。
进一步地，所述待检样品为乳汁。
进一步地，稀释前，先将乳汁进行预处理；预处理步骤包括：收集乳汁，在4℃的条件下离心后，弃掉上层脂肪和下层沉淀，取中间层乳清；以滴加的方式往乳清中加入醋酸，使得蛋白被沉于杯底；再于4℃的条件下离心，取上清液。
本发明的配方设计原理如下：
本发明配方中，硫酸铵和胃蛋白酶、木瓜蛋白酶协同使用，可促进酪蛋白沉淀，igg降解，硫酸铵浓度不宜过高，过高会促使所有蛋白全部沉淀，包括免疫球蛋白，过低又不能完全降解血清中的酪蛋白，影响检测结果。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
1、本发明的elisa待检样品的稀释液可降低igg的干扰，确保检测结果的准确性；
2、通过先利用稀释液稀释elisa待检样品，稀释步骤简单快捷，不影响检测进度和效率。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述：
一种elisa待检样品的稀释液的制备方法，将bsa、nan3、硫酸铵、kcl、k2hpo4、nah2po4、nacl、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶溶解于溶剂中，定容后即得稀释液；稀释液的成分为：
用稀释液按稀释度1:40稀释待检样品后，37℃条件下处理2h，然后进行elisa检测。
作为优选的实施方式，该稀释液可以用于对动物体液和外分泌液作为elisa检测样品的稀释液；体液包括但不限于胃肠液、血液；外分泌液包括但不限于唾液、泪液、乳汁、鼻和支气管分泌液、尿液、汗液。
实施例1-3
实施例1-3提供了一种elisa待检样品的稀释液，该成分如表格1所示：
表格1实施例1-3的稀释液成分参数
稀释液通过具体实施方式中的制备方法制备得到。
实施例4
以乳汁作为elisa待检样品，并分别以实施例1-3的稀释液稀释乳汁，具体步骤为：
预处理：收集乳汁，在4℃的条件下，以11000r/min离心25min，重复离心步骤一次以上，经反复离心后，弃掉上层脂肪和下层沉淀，取中间层乳清；以滴加的方式往乳清中加入浓度0.05-2m醋酸钠，结合搅拌，使得蛋白被沉于杯底；再于4℃的条件下以11000r/min离心15min，取上清液；
稀释：用稀释液按稀释度1:40稀释上清液后，37℃条件下处理2h，然后进行elisa检测。
对比例1-3
对比例1以pbs作为稀释液、对比例2使用市售常规试剂盒稀释液(成分为pbs、稳定剂和0.01％防腐剂，生产单位：bionote，批号：t4410po001)、对比例3使用生理盐水作为稀释液；以实施例1-3，和对比例1-3分别以实施例4的步骤对检测样品进行处理；稀释后检测其中igg和iga的含量，结果如表格2所示：
表格2经对比例1-3、实施例1-3稀释后的样品中igg和iga的含量
采用实施例1-3进行稀释后的样品中，igg含量明显降低。
对于本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及变形，而所有的这些改变以及变形都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。