一种同时测定孟鲁司特钠及其制剂多种有关物质的方法与流程

本发明属于医药分析化学技术领域，更具体地说，本发明涉及一种同时测定孟鲁司特钠及其制剂多种有关物质的方法。

背景技术：

孟鲁司特钠(Montelukast Sodium)是一种能显著改善哮喘炎症指标的强效口服药物。生物化学和药理学的生物测定显示，孟鲁司特对CysLT1受体有高度的亲和性和选择性(与其它有药理学重要意义的气道受体如类前列腺素、胆碱能和β-肾上腺能受体相比)。孟鲁司特能有效地抑制LTC4，LTD4、LTE4与CysLT1受体结合所产生的生理效应而无任何受体激动活性。目前的研究认为孟鲁司特并不拮抗CysLT2受体。该药物是由美国Merck公司开发，商品名为“Singulair”，上市剂型有薄膜衣片、咀嚼片及颗粒剂，规格分别为10mg、5mg、4mg。

孟鲁司特钠为光敏性药物，易光解和氧化，主要杂质有亚砜及异构体、顺式异构体、迈克加成物、酮基甲醇、甲基酮和甲基苯乙烯。其中降解杂质亚砜及异构体、顺式异构体酮基甲醇和未知杂质，工艺杂质有迈克加成物、甲基酮、甲基苯乙烯和MT8。这些杂质可能会影响孟鲁司特钠的药效，这对于药品的安全性、有效性、质量可控性和稳定性都是极为不利的。因此，准确测定孟鲁司特钠原料及其制剂中有关物质的含量，是评价孟鲁司特钠原料药及其制剂质量的重要指标。探明降解杂质的降解途径，对于原料药的合成、储藏以及制剂相关辅料的选择、制剂工艺、包装材料和储藏条件的选择都是至关重要的。

目前，孟鲁司特钠及其制剂的有关物质检测方法收载于美国药典、英国药典、欧洲药典、日本药典和印度药典，美国药典、英国药典和日本药典中收载的孟鲁司特钠制剂中有关物质测定方法均相同。但经发明人方法重现检验，国外药典方法不能有效分离亚砜及其异构体，而该杂质是孟鲁司特钠原料和制剂中降解杂质，也是主要控制杂质，亚砜及其异构体完全分离后对探明该物质的降解途径有着重要的意义。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种更为简便、灵敏高效的测定孟鲁司特钠多种有关物质的方法，以能够快速、准确地、全面的同时测定孟鲁司特钠原料药及其制剂中有关物质含量。

为实现本发明目的，本发明的技术方案如下：

提供一种高效液相色谱法同时测定孟鲁司特钠及其制剂多种有关物质，色谱条件为：

固定相是以苯基键合硅胶为填料的色谱柱；

流动相A是0.15％三氟乙酸水溶液，流动相B是0.15％三氟乙酸乙腈溶液；

进行梯度洗脱，梯度条件为：梯度1流动相的体积比为：A：B＝57～63％：43～37％，进样3～16min后流动相变化为梯度2，梯度2流动相的体积比为：A：B＝46～51％：54～49％，进样30～35min后流动相变化为梯度1，总运行时间为35～40min；

检测波长250～260nm，

柱温为38～42℃；

洗脱流速为1.0～2.0mL/min。

在一些实施例中，梯度1流动相优选的体积比为：A：B＝60：40。

在一些实施例中，梯度2流动相优选的体积比为：A：B＝49：51。

在一些实施例中，检测波长优选255nm。

在一些实施例中，洗脱流速优选1.5mL/min。

在一些实施例中，进样样品检测过程中，样品进样量为20～100μL。

在一些实施例中，所述总运行时间35min后，再在梯度1条件下运行5min。

在一些实施例中，所述色谱柱填料粒径为2～5μm；颗粒平均直径为4.6mm。

在一些实施例中，所述色谱柱的填料粒径为3.5μm。

在一些实施例中，配制过程中选用良溶剂对孟鲁司特钠、孟鲁司特二环己胺盐对照品及相关杂质进行溶解，所述良溶剂是甲醇或甲醇和水的混合物。优选甲醇：水＝3：1。

本发明提到的测定方法，其洗脱流速设定为一般技术人员公知的常识，常见的范围一般为0.5mL/min至2mL/min，本发明优选1.4～1.6mL/min，更优选1.5mL/min。

本发明的方法与现有技术相比具有以下优点和积极效果：

(1)采用水-乙腈二元体系，两段洗脱，更简便，更高效；

(2)本发明可将孟鲁司特钠原料和制剂中的亚砜及异构体完全分离；

(3)本发明对于孟鲁司特钠原料和制剂中顺式异构体检测更灵敏，采用各种破坏条件下的孟鲁司特钠原料溶液和片粉溶液作为供试品进行色谱条件的筛选，除孟鲁司特外，可以同时检测6种有关物质，且各有关物质之间的分离度均可大于1.5，因此本发明的适用范围更广。

附图说明

图1为孟鲁司特各混合杂质溶液的HPLC色谱图；

图2为孟鲁司特钠片有关物质测定系统适用性溶液的HPLC色谱图；

图3为孟鲁司特钠片有关物质测定未经破坏的片粉溶液的HPLC色谱图；

图4为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经强碱破坏后的HPLC色谱图；

图5为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经强酸破坏后的HPLC色谱图；

图6为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经氧化破坏后的HPLC色谱图；

图7为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经光照坏后的测HPLC色谱图；

图8为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经高温破坏后的HPLC色谱图；

图9为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(柱温38℃)的HPLC色谱图；

图10为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(柱温42℃)的HPLC色谱图；

图11为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流动相比例为105％)的HPLC色谱图；

图12为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流动相比例为95％)的

HPLC色谱图；

图13为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流速为1.4ml/min)的HPLC色谱图；

图14为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流速为1.6ml/min)的HPLC色谱图；

图15为美国药典方法测定孟鲁司特钠片有关物质系统适用性溶液的HPLC色谱图；

图16为美国药典方法测定孟鲁司特钠片有关物质片粉溶液的HPLC色谱图；

图17为印度药典原料方法测定孟鲁司特各混合杂质溶液的HPLC色谱图；

图18为印度药典孟鲁司特片方法测定各杂质混合溶液的HPLC色谱图；

具体实施方式

下述是结合具体实施例进一步阐述本发明。但这些实施例仅限于说明本发明而不是用于限制本发明的保护范围。下列实施例中未注明具体实验条件的实验方法，通常按照常规条件。

下述实施例中，所述孟鲁司特钠原料药来自印度Morepen公司，纯度大于99.5％。孟鲁司特二环己胺盐对照品来源于欧洲药典委员会，纯度99.5％；孟鲁司特亚砜对照品来源于Toronto Reseach Chemicals公司，纯度98％；MT8对照品来源于印度Morepen公司，纯度98.9％；酮基甲醇对照品来源于Toronto Reseach Chemicals公司，纯度96％；甲基酮对照品来源于Toronto Reseach Chemicals公司，纯度98％；甲基苯乙烯对照品来源于印度Morepen公司，纯度95％。

下述实施例中，检测采用的仪器设备为：Waters高效液相色谱仪(2695e)(美国沃特世公司)；PDA检测器(美国沃特世公司)。

实施例1孟鲁司特及各杂质混合溶液测定，精密量取孟鲁司特二环己胺盐对照品溶液和各种已知杂质对照品溶液适量，用甲醇∶水＝3∶1的混合溶液配制成约含有孟鲁司特40μg/ml、亚砜1μg/ml、MT8 1μg/ml、酮基甲醇1μg/ml、甲基酮1μg/ml和甲基苯乙烯0.6μg/ml的主药+已知杂质的混合溶液。色谱条件如下：色谱柱为安捷伦苯基柱(150mm×4.6mm，3.5μm)；检测波长为255nm；柱温为40℃，流速为1.5mL/min；进样量为50μL。以0.15％三氟乙酸水溶液(A)-0.15％三氟乙酸乙腈(B)为流动相，进行梯度洗脱。梯度1流动相的体积比为：A：B＝60％：40％，进样16min后流动相变化为梯度2；梯度2流动相的体积比为：A：B＝49％：51％，运行至35分钟，35分钟后流动相变化为梯度1，总运行时间为40min。记录色谱图，见图1。

图1中，保留时间为11.752min色谱峰为孟鲁司特色谱峰，孟鲁司特峰与相邻杂质峰分离度均大于1.5，亚砜及其异构体分离度大于1.5。

表1为孟鲁司特及各杂质混合溶液测定的HPLC色谱图参数

实施例2孟鲁司特钠片有关物质测定系统适用性溶液的检测试验，分别精密量取孟鲁司特二环己胺盐对照品溶液(浓度为400μg/ml)9ml，加入4μl过氧化氢并摇匀，将量瓶置自然光下0.5小时，再精密量取MT8对照品溶液(浓度为4μg/ml)1ml置10ml无色量瓶中，摇匀，作为系统适用性溶液。其他色谱条件同实施例1。结果见图2。

图2中，保留时间为11.830min为孟鲁司特峰，经过光照和氧化破坏，亚砜及其异构体略有增加，检出降解杂质酮基甲醇，顺式异构体显著增加(面积归一化计算其量为51.62％)，孟鲁司特明显降解(面积归一化计算其量为43.71％)。孟鲁司特峰与相邻杂质峰分离度均大于1.5，亚砜及其异构体分离度大于1.5。破坏后新增加5个杂质，其保留时间分别为4.574min、4.737min、8.303min、9.444min和16.681min。各降解产物仍能得到很好的分离，各个已知杂质的相对保留时间未发生改变。

表2为孟鲁司特钠片有关物质测定系统适用性溶液的HPLC色谱图参数

实施例3孟鲁司特钠片有关物质测定未经破坏的片粉溶液的检测试验，取孟鲁司特钠片片粉200mg(约含孟鲁司特10mg)，精密称定，置25ml棕色量瓶中，加甲醇：水＝3:1的混合溶液适量超声30分钟使溶解，放冷至室温，加混合溶液至刻度，摇匀，将样品溶液离心10分钟(8000转/分钟)，取上清液作为未经破坏的片粉待测溶液。其他色谱条件同实施例1。结果见图3。

图3中，11.330min为孟鲁司特峰，可以检测出亚砜及异构体、MT8、顺式异构体和未知降解杂质。孟鲁司特峰与相邻杂质峰分离度均大于1.5，亚砜及其异构体分离度大于1.5。各个杂质的相对保留时间与实施例1一致。

表3为孟鲁司特钠片有关物质测定未经破坏的片粉溶液的HPLC色谱图参数

实施例4孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经强碱破坏后的检测试验，取孟鲁司特钠片片粉200mg(约含孟鲁司特10mg)，精密称定，置25ml量瓶中，先加入适量的混合溶液超声30分钟溶解，加1mol/LNaOH 1ml于室温放置2h后，加1mol/L的HCl调节至中性，再加混合溶液稀释至刻度，摇匀，离心(8000转/分)10分钟，取上清液作为碱破坏待测溶液。其他色谱条件同实施例1。结果见图4。

图4中，11.374min为孟鲁司特峰，结果显示，碱破坏样品的液相色谱中新增2个杂质，其保留时间分别为16.672min和17.360min，孟鲁司特降解率约为0.2％。

表4为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经强碱破坏后的HPLC色谱图参数

实施例5孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经强酸破坏后的检测试验，取孟鲁司特钠片片粉200mg(约含孟鲁司特10mg)，精密称定，置25ml量瓶中，先加入适量的混合溶液超声30分钟溶解，加1mol/LHCL1ml于室温放置2h后，加1mol/L的NaOH调节至中性，再加混合溶液稀释至刻度，摇匀，离心(8000转/分)10分钟，取上清液作为酸破坏待测溶液。其他色谱条件同实施例1。结果见图5。

图5中，11.149min为孟鲁司特峰，结果显示，酸破坏样品的液相色谱中新增2个杂质，其保留时间分别为16.701min和17.376min，降解产物间的分离度均大于1.5，孟鲁司特降解率约为1.8％。

表5为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经强酸破坏后的HPLC色谱图参数

实施例6孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经氧化破坏后的检测试验，取孟鲁司特钠片片粉200mg(约含孟鲁司特10mg)，精密称定，置25ml量瓶中，先加入适量的混合溶液超声30分钟溶解，加6％H2O21ml，于室温放置30分钟，加混合溶液稀释至刻度，摇匀，离心(8000)10分钟，取上清液作为氧化破坏待测溶液。其他色谱条件同实施例1。结果见图6。

图6中，11.427min为孟鲁司特峰。经氧化破坏，降解杂质亚砜及异构体显著增加(面积归一化计算其量为18.06％)，分离度大于1.5，孟鲁司特降解率约为18％。

表6为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经氧化破坏后的HPLC色谱图参数

实施例7孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经光照破坏后的检测试验，取孟鲁司特钠片片粉200mg(约含孟鲁司特10mg)，精密称定，置25ml量瓶中，加入适量的混合溶液超声30分钟溶解，于自然光照条件下分别放置4h，加混合溶液稀释至刻度，摇匀，离心(8000转/分)10分钟，取上清液作为光照破坏待测溶液。其他色谱条件同实施例1。结果见图7。

图7中，11.421min为孟鲁司特峰。经光照破坏，降解杂质顺式异构体显著增加(面积归一化计算其量为13.89％)，降解产物间的分离度均大于1.5，孟鲁司特降解率约为14％。

表7为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经光照破坏后的HPLC色谱图参数

实施例8孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经高温破坏后的检测试验，取孟鲁司特钠片片粉200mg(约含孟鲁司特10mg)，精密称定，置25ml量瓶中，加入适量的混合溶液超声30分钟溶解，放入80℃水浴放置3h(每30分钟振摇一次)，放冷至室温后，加混合溶液稀释至刻度，摇匀，离心(8000转/分)10分钟，取上清液作为高温破坏待测溶液。其他色谱条件同实施例1。结果见图8。

图8中，11.429min为孟鲁司特峰。经高温破坏，新增杂质保留时间为17.432min，孟鲁司特基本没有降解。

表8为孟鲁司特钠片有关物质测定片粉溶液经高温破坏后的HPLC色谱图参数

实施例9孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(柱温38℃)，将色谱柱柱温设定为38℃，除上述改变外其它色谱条件同实施例1，待测溶液的配制方法同实施3。结果见图9。

图9中，11.547min为孟鲁司特峰。将色谱柱柱温设定为38℃，主峰和各个杂质的保留时间和相对保留时间均未发生改变，检出的杂质个数和杂质量也未发生改变。

表9为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(柱温38℃)的HPLC色谱图参数

实施例10孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(柱温42℃)，将色谱柱柱温设定为38℃，除上述改变外其它色谱条件和待测溶液的配制方法同实施例1。结果见图9。

图10中，11.547min为孟鲁司特峰。将色谱柱柱温设定为42℃，主峰和各个杂质的保留时间相比实施例3略有提前，但相对保留时间未发生改变，检出的杂质个数和杂质量也未发生改变。

表10为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(柱温42℃)的HPLC色谱图参数

实施例11孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流动相改变1)，调整流动相比例，以0.15％三氟乙酸水溶液(A)-0.15％三氟乙酸乙腈(B)为流动相，进行梯度洗脱。梯度1流动相的体积比为：A：B＝63％：37％，进样16min后流动相变化为梯度2；梯度2流动相的体积比为：A：B＝51％：49％，运行至35分钟，35分钟后流动相变化为梯度1，总运行时间为40min。除上述改变外，其它色谱条件同实施例1，待测溶液的配制方法同实施例3。结果见图11。

图11中，14.445min为孟鲁司特峰。将流动相A的比例增加5％，流动相B的比例减少5％使得主峰和各个杂质峰保留时间滞后，但相对保留时间未改变。该条件下检测出的杂质个数和杂质量与实施例3一致。

表11为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流动相改变1)的HPLC色谱图参数

实施例12孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流动相改变2)，调整流动相比例，以0.15％三氟乙酸水溶液(A)-0.15％三氟乙酸乙腈(B)为流动相，进行梯度洗脱。梯度1流动相的体积比为：A：B＝57％：43％，进样16min后流动相变化为梯度2；梯度2流动相的体积比为：A：B＝46％：54％，运行至35分钟，35分钟后流动相变化为梯度1，总运行时间为40min。除上述改变外，其它色谱条件同实施例1，待测溶液的配制方法同实施例3。结果见图12。

图12中，8.813min为孟鲁司特峰。将流动相A的比例减小5％，流动相B的比例增加5％使得主峰和各个杂质峰保留时间提前，但相对保留时间未改变。该条件下新检测出2个杂质，其保留时间分别是16.667min和17.492min。总杂质量与实施例3基本一致。

表12为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流动相改变2)的HPLC色谱图参数

实施例13孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流速1.4ml/min)，将色谱条件同流速调整为1.4ml/min，除上述改变外其它色谱条件同实施例1，待测溶液的配制方法同实施例3。结果见图13。

图13中，11.736min为孟鲁司特峰。将色谱条件中流速调整为1.4ml/min，主峰和各杂质峰的保留时间略有滞后，但相对保留时间未改变。该条件下检测出的杂质个数和杂质量与实施例3一致。

表13为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流速1.4ml/min)的HPLC色谱图参数

实施例14孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流速1.6ml/min)，将色谱条件同流速调整为1.6ml/min，除上述改变外其它色谱条件同实施例1，待测溶液的配制方法同实施例3。结果见图14。

图14中，11.736min为孟鲁司特峰。将色谱条件中流速调整为1.6ml/min，主峰和各杂质峰的保留时间略有提前，但相对保留时间未改变。该条件下检测出的杂质个数和杂质量与实施例3一致。

表14为孟鲁司特钠片有关物质测定耐用性试验(流速1.6ml/min)的HPLC色谱图参数

实施例15依照美国药典方法测定孟鲁司特钠片有关物质测定系统适用性溶液的检测试验，分别精密量取孟鲁司特二环己胺盐对照品溶液(浓度为250μg/ml)9ml，加入4μl过氧化氢并摇匀，将量瓶置自然光下0.5小时，再精密量取MT8对照品溶液(浓度为10μg/ml)1ml置10ml无色量瓶中，摇匀，作为系统适用性待测溶液。色谱条件如下：色谱柱为安捷伦苯基柱(150mm×4.6mm，3.5μm)；检测波长为255nm；柱温为40℃，流速为1.5mL/min；进样量为20μL。以0.2％三氟乙酸水溶液(A)-甲醇：乙腈＝3:2(B)为流动相，进行梯度洗脱。梯度1流动相的体积比为：A：B＝48％：52％，进样5min后流动相变化为梯度2；梯度2流动相的体积比为：A：B＝45％：55％，运行至22分钟；22分钟-25分钟为梯度3；梯度3流动相的体积比为：：A：B＝25％：75％；25分钟后流动相变化为梯度1，总运行时间为30min。结果见图15。

图15中，保留时间为13.376min为孟鲁司特峰，经过光照和氧化破坏，亚砜及其异构体只检测出单一峰，检出降解杂质酮基甲醇，顺式异构体显著增加(面积归一化计算其量为27.07％)，孟鲁司特明显降解(面积归一化计算其量为71.37％)。孟鲁司特峰与相邻杂质峰分离度均大于1.5，亚砜及其异构体完全未分离。破坏后新增加6个杂质，其保留时间分别为3.375min、5.830min、11.480min、15.726min、15.941min和16.721min。各降解产物仍能得到很好的分离，各个已知杂质的相对保留时间未发生改变。

表15为依照美国药典方法测定孟鲁司特钠片有关物质测定系统适用性溶液的HPLC色谱图参数

实施例16依照美国药典方法测定孟鲁司特钠片有关物质测定，取孟鲁司特钠片10片(约含孟鲁司特100mg)，精密称定，置200ml棕色量瓶中，加甲醇：水＝3:1的混合溶液适量振摇70分钟使溶解，放冷至室温，加混合溶液至刻度，摇匀，将样品用0.45μm滤膜过滤，取续滤液作为片粉待测溶液。其他色谱条件同实施例15。结果见图16。

图16中，12.936min为孟鲁司特峰。与实施例3相比较，各个杂质的相对保留时间基本无变化，亚砜及异构体之间没有分离开，表现为一个色谱峰，而且没有检测出顺式异构体。

表16为依照美国药典方法测定孟鲁司特钠片有关物质的HPLC色谱图参数

实施例17依照印度药典原料检测方法测定孟鲁司特各混合杂质，精密量取孟鲁司特二环己胺盐对照品溶液和各种已知杂质对照品溶液适量，用甲醇∶水＝3∶1的混合溶液配制成约含有孟鲁司特200μg/ml、亚砜5μg/ml、MT8 5μg/ml、甲基酮5μg/ml和甲基苯乙烯3μg/ml的主药+已知杂质的混合溶液，自然光照射5min。色谱条件如下：色谱柱为C18色谱柱(150mm×4.6mm，5μm)；检测波长为240nm；流速为1mL/min；进样量为20μL。以醋酸铵缓冲液(A)-甲醇(B)为流动相，进行梯度洗脱。梯度1流动相的体积比为：A：B＝40％：60％，运行至20分钟后流动相变化为梯度2；梯度2流动相的体积比为：A：B＝30％：70％，运行至45分钟，流动相变化为梯度3；梯度3流动相的体积比为：A：B＝20％：80％，运行至55分钟，流动相变化为梯度4；梯度4流动相的体积比为：A：B＝15％：85％，以梯度4持续运行至60分钟，65分钟后流动相变化为梯度1，总运行时间为70分钟。记录色谱图，见图17。

图17中，55.802min为孟鲁司特峰，亚砜及异构体分离度不好，表现为一个色谱峰，甲基苯乙烯峰形较差，分析时间长。

表17为依照印度药典原料方法测定孟鲁司特各杂质混合溶液的HPLC色谱图参数

实施例18依照印度药典孟鲁司特钠片检测方法测定孟鲁司特各混合杂质，精密量取孟鲁司特二环己胺盐对照品溶液和各种已知杂质对照品溶液适量，用甲醇∶水＝3∶1的混合溶液配制成约含有孟鲁司特200μg/ml、亚砜5μg/ml、MT85μg/ml、甲基酮5μg/ml和甲基苯乙烯3μg/ml的主药+已知杂质的混合溶液，自然光照射5min。色谱条件如下：色谱柱为C18色谱柱(150mm×4.6mm，5μm)；检测波长为240nm；柱温为40℃，流速为1mL/min；进样量为10μL。以醋酸铵缓冲液(A)-甲醇(B)为流动相，进行梯度洗脱。梯度1流动相的体积比为：A：B＝50％：50％，运行至20分钟后流动相变化为梯度2；梯度2流动相的体积比为：A：B＝35％：65％，运行至45分钟，流动相变化为梯度3；梯度3流动相的体积比为：A：B＝30％：70％，运行至55分钟，流动相变化为梯度4；梯度4流动相的体积比为：A：B＝20％：80％，以梯度4持续运行至60分钟，65分钟后流动相变化为梯度1，总运行时间为75分钟。记录色谱图，见图18。

图18中，70.863min为孟鲁司特峰，亚砜及异构体分离度不好，甲基苯乙烯未出峰，分析时间太长，分离效果不理想。

表18为依照印度药典孟鲁司特钠片方法测定孟鲁司特各杂质混合溶液的HPLC色谱图参数

应理解，在阅读了本发明的上述内容之后，本领域技术人员可以对发明作各种改动和修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。