二维液相色谱检测复方南星止痛膏的方法与流程

文档序号:15460902发布日期:2018-09-18 18:07阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种复方南星止痛膏双酯型生物碱的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤一,供试品溶液的制备,取复方南星止痛膏样品经提取、除杂,制得供试品溶液;

步骤二,吸取供试品溶液,采用二维液相色谱方法进行双酯型生物碱的测定。

2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述二维液相色谱方法采用以下方法进行:

一维色谱方法:C18色谱柱一,流动相A为甲醇,流动相B为0.001~0.02%的二乙胺或三乙胺,流速0.05~0.2mL·min-1,柱温15~20℃,用40~70%的流动相A梯度洗脱40min,检测波长230~240nm,进样量1~3μL,样品盘温度为8~20℃;

阀切换方法:阀切换时间为所述双酯型生物碱起始出峰时间至结束;

二维色谱方法:C18色谱柱二,流动相A为甲醇或乙腈,流动相B为0.005~0.02%的磷酸或二乙胺,流速0.5~0.8mL·min-1,柱温35~45℃,用30~90%的流动相A梯度洗脱4min,检测波长230~240nm。

3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,所述二维液相色谱方法采用以下方法进行:

一维色谱方法:所述C18色谱柱一规格为1×50mm,1.7μm,流动相A为甲醇,流动相B为0.008%DEA,流速为0.1mL·min-1,柱温18℃;梯度洗脱,0~12min,40~58%A,12~25min,58%~58%A,25~35min,58%~65%A,35~40min,65%~70%A,40~42min,70%~70%A,42~45min,70%~100%A,45~48min,100%~40%A;检测波长235nm,进样量1μL,样品盘温度为10℃;

阀切换方法:阀切换时间为所述双酯型生物碱起始出峰时间至结束;

二维色谱方法:所述C18色谱柱二规格为3.0×100mm,1.7μm,流动相A为乙腈,流动相B为0.01%磷酸,流速为0.7mL·min-1,柱温40℃;梯度洗脱,0~1min,30%~38%A,1~3min,38%~48%A,3~4min,48%~90%A,4~4.2min,90%~30%A;检测波长235nm。

4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述C18色谱柱一和所述C18色谱柱二选自Waters XBridge BEH C18色谱柱。

5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于:所述步骤一中的提取、除杂为:取本品加甲醇适量,研匀,定量转移至量瓶,超声处理,加甲醇稀释至刻度,摇匀滤过,弃去初滤液,取续滤液,减压回收至干;加入盐酸溶液,微热使残渣溶解,摇匀,置冰箱中冷藏,滤过,取续滤液,置分液漏斗中,用氯仿分次提取,合并氯仿提取液,用无水碳酸钠脱水,滤液减压回收至干,残渣用甲醇溶解并定容,摇匀,离心,即得。

6.根据权利要求1-5任一所述的检测方法,其特征在于,所述双酯型生物碱选自新乌头碱、乌头碱和次乌头碱。

7.一种复方南星止痛膏的检测方法,其特征在于,所述方法采用二维液相色谱方法对双酯型生物碱进行定性或定量检测。

8.根据权利要求7所述的检测方法,其特征在于,所述二维液相色谱方法包括一维色谱分析和二维色谱分析;其中,所述一维色谱分析选择甲醇-0.001~0.02%的二乙胺或三乙胺作为其流动相体系。

9.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于,所述二维色谱分析选择甲醇或乙腈-0.005~0.02%的磷酸或二乙胺作为其流动相体系。

10.根据权利要求8或9所述的检测方法,其特征在于,

以甲醇-0.008%DEA为所述一维色谱分析的流动相体系,以乙腈-0.01%磷酸为所述二维色谱分析的流动相体系;

所述双酯型生物碱选自新乌头碱、乌头碱和次乌头碱。

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