本发明涉及一种生物制品试剂领域，具体涉及一种全血质控物及其制备方法。
背景技术：
：目前我国使用的血细胞分析质控品多为国外进口品牌，而进口血细胞分析质控品稳定时间较短，效期仅有3个月，且订货周期长，外加上运输时间，用户得到产品往往接近甚至超过效期；另外，进口血细胞分析质控品单支包装量大，浪费大，同时售价非常昂贵。因此为了解决以上问题，国内一直有学者致力于血液质控品的研究。几年前，国内成功研制出以人血为主要原材料制作的国产血细胞分析质控品，但是由于《血液制品管理条例》和《血站管理办法》等国家法律法规的出台和颁布实施，限制了国内人血应用于生产，使得国内学者不得不纷纷开始研发其他能够替代人血，且可用于制作质控品的原材料。有相关研究报道称可用经过处理后的家畜、鱼类/鳄鱼、乳胶颗粒等制作三分类血液质控品模拟物，但其直方图上显示的图形与临床人血标本的图形相差过大，定值不准确，不能满足临床需求。另外，也有相关研究称在新鲜猪血中加入一定量的保养液可用于替代人血制作血细胞分析质控品，其优点在于原料成本低廉，在直方图上显示的图形与临床人血标本的图形相差不大，可有效延长血液的保存时间，但其缺点在于保养液中只用了甲醛作为固定剂，而甲醛的固定反应是部分可逆的，且甲醛对脂类的固定能力不强，存在因固定失效而引起血细胞溶血和血小板计数不稳定的风险。技术实现要素：为解决上述问题，本发明提供一种全血质控物，所述质控物包括血液、抗聚剂、固定剂和防腐剂；所述血液为新鲜抗凝动物血，所述抗聚剂包括edta或其盐、阿司匹林、柠檬酸或其盐，所述固定剂中包括甘氨酸或其盐、edta或其盐、甲醛和/或戊二醛；所述血液优选为新鲜抗凝猪血。当然也可以选用其它合适的动物血，诸如黑猩猩血、羊血、牛血、猴血和鸡血等等。在一种实施方式中，所述血液、抗聚剂、固定剂及防腐剂的配合比例按100ml血液计，抗聚剂为25-50ml，优选为30-40ml；固定剂为50-100ml，优选为60-80ml，和防腐剂为2-15ml，优选为3-8ml。在一种实施方式中，所述抗聚剂按1升水中所含各组分重量计是，edta或其盐为30-70g，优选为40-60g；阿司匹林0.1-5g，优选为0.5-2g；柠檬酸盐10-30g，优选为15-25g；所述固定剂按1升水中所含各组分重量计或体积计是，甘氨酸或其盐10-30g，优选为15-25g；edta或其盐为10-30g，优选为15-25g；甲醛1-20ml，优选为5-15ml，和戊二醛1-20ml/l，优选为5-15ml；全血质控物中所述防腐剂浓度为20-50万单位/l。在一种实施方式中，所述固定剂按1升水中所含各组分重量计还包括d-甘露醇5-15g，氯化铵1-4g，蔗糖5-20g，磷酸氢二钠5-20g，磷酸二氢钾0.05-2g。在一种实施方式中，所述血液、抗聚剂、固定剂及防腐剂的配合比例按100ml血液计，抗聚剂为30ml，固定剂为70ml和防腐剂为4ml；所述抗聚剂按1升水中所含各组分重量计是，edta-na250g、柠檬酸三钠26g、阿司匹林1.0g；所述固定剂按1升水中所含各组分重量计或体积计是，甘氨酸20g，d-甘露醇10g，edta-na220g，氯化铵2.5g，蔗糖10g，磷酸氢二钠6g，磷酸二氢钾0.15g，甲醛10ml，戊二醛12ml；所述防腐剂为4ml。在一种实施方式中，本发明提供制备上述全血质控物的方法，所述方法包括：(1)分别完成所述抗聚剂、固定剂和防腐剂的配制，将其按照比例混合；(2)在猪血中加入所述混合液体；和(3)充分混匀，2-8℃放置2-3周后分装。本发明全血质控物呈暗红色悬浊液，无溶血、脂血和凝块。显微镜下检测各血细胞形态正常。保存期为9个月以上，保存期间wbc、rbc、hgb、hct、mcv和plt的变异系数小，本发明全血质控物适合于长期保持；并且wbc、rbc、hgb、hct、mcv和plt的瓶间变异系数小；本发明全血质控物适合于批量生产；其中wbc是白细胞、rbc是红细胞、hgb是血红蛋白、mcv是红细胞平均体积、hct是红细胞压积和plt是血小板。本发明加入甘氨酸，不仅可为了红细胞的保存提供充足的氮源，延长红细胞的保存时间，还可显著提高白细胞和血小板稳定性。另外，本发明全血质控物生产工艺简单，生产过程中血液不会被污染，混合均匀，在显微镜下各类细胞核及胞浆清晰可见，无聚集现象，能在批量生产中有效地控制瓶间差。具体实施方式为了使本领域
技术领域：
人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合下面结合实施例对本发明作进一步说明，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都应当属于本申请保护的范围。实施例一：全血质控品1的制备本发明以新鲜抗凝猪血为原料，加入抗聚剂、固定剂以及防腐剂，制备全血质控物(三分类)，具体步骤如下：1、抗聚剂的配制：在纯化水中，加入edta-na250g、柠檬酸三钠26g、阿司匹林1.0g，充分溶解，继续加纯化水定容至1l后过滤即可。2、固定剂的配制：在水中，加入甘氨酸20g，d-甘露醇10g，edta-na220g，氯化铵2.5g，蔗糖10g，磷酸氢二钠6g，磷酸二氢钾0.15g，甲醛10ml，戊二醛12ml，充分溶解，继续加纯化水定容至1l后过滤即可。3、采集新鲜抗凝猪血，采用离心的方法去除血浆后，进行固定。4、以100ml猪血为例，加入抗聚剂30ml、固定剂70ml、浓度为1万单位/ml的硫酸庆大霉素4ml，充分混匀，对所得的猪血混合物进行性能检查后，置于2-8℃保存2周后分装即可，分装规格为2ml/支。5、对分装后的猪血混合物进行性能监测，并采用希森美康xn-20(a)血细胞分析仪检测该猪血混合物主要指标的变异系数cv百分值，主要指标包括：wbc、rbc、hgb、hct、mcv、plt。6、经过本实施例的固定剂处理后的猪血，呈暗红色悬浊液，无溶血、脂血和凝块。显微镜下检测各血细胞形态正常。保存期为9个月以上，保存期间wbc、rbc、hgb、hct、mcv和plt的变异系数cv＜5％(表1)，wbc、rbc、hgb、hct、mcv和plt的瓶间变异系数cv＜2.5％(表2)。表1长期稳定性测定结果表2瓶间差检测结果测定结果wbcrbchgbhctmcvplt第1支16.265.569628.250.7181第2支16.085.57962850.3175第3支16.25.559627.950.3177第4支16.215.629528.350.4175第5支16.35.549527.950.4181第6支16.075.619628.250.3170第7支15.985.629628.350.4176第8支16.135.579528.250.6169第9支16.415.559528.150.6174第10支16.015.629628.550.7172平均数16.175.5895.6028.1650.47175sd0.140.030.520.190.164.06cv％0.84％0.59％0.54％0.67％0.32％2.32％实施例2全血质控品2的制备本实施例与实施例1的区别在于，固定剂中缺少甘氨酸，其它各组成成分相同，其余同实施例1。经过本实施例的固定剂处理后的猪血，保存效果较差，保存期间wbc、plt变异系数cv＞20％(表3)，说明甘氨酸对猪血wbc、rbc和plt的保存都有着至关重要的作用。表3长期稳定性测定结果测定日期wbcrbchgbhctmcvplt第0.5个月14.676.5511740.7062.2047第1.0个月155.596.1211933.5054.8028第1.5个月181.456.1012230.5550.1533平均数70.576.25119.0034.9255.7235.83sd96.020.252.295.226.089.57cv％136.08％4.07％1.93％14.95％10.91％26.71％实施例3全血质控品3的制备本实施例与实施例1的区别在于，甘氨酸的浓度不同，即甘氨酸浓度为10g/l，其余同实施例1。经过本实施例的固定剂处理后的猪血，呈暗红色悬浊液，无溶血、脂血和凝块。显微镜下检测各血细胞形态正常。保存期间wbc、rbc、hgb、hct、mcv的变异系数cv≤5％，plt的变异系数cv＞5％(表4)，wbc、rbc、hgb、hct、mcv的瓶间变异系数cv≤2.5％，plt的变异系数cv＜4％(表5)。表4长期稳定性测定结果测定日期wbcrbchgbhctmcvplt第1个月7.854.628723.151.5156第2个月7.694.568823.251.7150第3个月7.554.668823.152160第4个月7.454.54872352.1148第5个月7.354.558922.952.3145第6个月7.344.598723.152.2144第7个月7.214.628723.452.7138第8个月7.214.518823.252.5139第9个月7.144.628723.552.9135mean7.424.598823.1752.21146sd0.240.050.730.190.458.33cv％3.21％1.06％0.83％0.81％0.86％5.70％表5瓶间差检测结果测定结果wbcrbchgbhctmcvplt第1支7.74.558823.251.2155第2支7.554.61882352151第3支7.684.568923.151.3160第4支7.624.538723.451.5158第5支7.594.518923.252162第6支7.84.568823.452.1168第7支7.924.628823.151.6156第8支7.564.618823.251.8159第9支7.484.518723.151.9157第10支7.694.638923.451.7151平均数7.664.5788.1023.2151.71158sd0.130.050.740.140.315.08cv％1.69％1.00％0.84％0.62％0.59％3.22％实施例4全血质控品4的制备本实施例与实施例1的区别在于，甘氨酸的浓度不同，即甘氨酸浓度为30g/l，其余同实施例1。经过本实施例的固定剂处理后的猪血，呈暗红色悬浊液，无溶血、脂血和凝块。显微镜下检测各血细胞形态正常。保存期为9个月以上，保存期间wbc、rbc、hgb、hct、mcv的变异系数cv≤5％，plt的变异系数cv＞5％(表6)，wbc、rbc、hgb、hct、mcv和plt的瓶间变异系数cv＜3.0％(表7)。表6长期稳定性测定结果测定日期wbcrbchgbhctmcvplt第1个月7.594.458622.951.6161第2个月7.694.488623.151.9155第3个月7.84.418723.252150第4个月7.764.518722.852.1146第5个月7.94.488722.952.1149第6个月7.924.428623.152.5145第7个月7.844.398823.252.6142第8个月7.894.448723.252.4136第9个月7.914.498723.452.7132平均数7.814.458723.0952.21146sd0.110.040.670.190.368.97cv％1.45％0.91％0.77％0.82％0.69％6.13％表7瓶间差检测结果测定结果wbcrbchgbhctmcvplt第1支7.624.468822.851.8166第2支7.644.418822.951.6165第3支7.584.438823.251.8170第4支7.554.498722.751.9159第5支7.654.518722.951.5167第6支7.614.418823.151.6161第7支7.544.398823.251.4165第8支7.594.488823.152162第9支7.684.58723.352.1168第10支7.514.398823.451.8165平均数7.604.4587.7023.0651.75165sd0.050.050.480.230.223.33cv％0.70％1.04％0.55％0.98％0.43％2.02％实施例5全血质控品5的制备本实施例与实施例1的区别在于，甘氨酸的浓度不同，即甘氨酸浓度为5g/l，其余同实施例1。经过本实施例的固定剂处理后的猪血，呈暗红色悬浊液，无溶血、脂血和凝块。显微镜下检测各血细胞形态正常。保存期为9个月以上，保存期间wbc和plt的变异系数cv＞13％(表8)，wbc、rbc、hgb、hct、mcv和plt的瓶间变异系数cv＜4％(表9)。表8长期稳定性测定结果表9瓶间差检测结果测定结果wbcrbchgbhctmcvplt第1支9.235.249627.552.1196第2支9.255.269727.852.3201第3支9.315.249627.452.1191第4支9.195.239727.951.9189第5支9.325.259727.452.4203第6支9.265.299727.952.3195第7支9.35.279627.552.7207第8支9.245.219827.352.6188第9支9.265.299827.552.3186第10支9.285.269727.452.4194mean9.265.2596.9027.5652.31195sd0.040.030.740.220.246.90cv％0.43％0.48％0.76％0.81％0.45％3.54％实施例6全血质控品6的制备本实施例与实施例1的区别在于，甘氨酸的浓度不同，即甘氨酸浓度为5g/l，其余同实施例1。经过本实施例的固定剂处理后的猪血，呈暗红色悬浊液，无溶血、脂血和凝块。显微镜下检测各血细胞形态正常。保存期为9个月以上，保存期间wbc和plt的变异系数cv＞13％(表10)，wbc、rbc、hgb、hct、mcv和plt的瓶间变异系数cv＜4％(表11)。表10长期稳定性测定结果表11瓶间差检测结果测定结果wbcrbchgbhctmcvplt第1支10.235.329928.952.3211第2支10.315.249928.552.9204第3支10.345.269928.652.9199第4支10.295.359828.352.4221第5支10.255.249828.452.1212第6支10.275.259928.652.6216第7支10.245.199828.452.3223第8支10.35.329928.352.4203第9支10.215.349827.952.1207第10支10.195.369828.552.8206平均数10.265.2998.5028.4452.48210sd0.050.060.530.260.307.90cv％0.46％1.10％0.54％0.91％0.58％3.76％实施例7全血质控品7的制备本实施例与实施例1的区别在于，将原料柠檬酸三钠换为柠檬酸三钾，磷酸二氢钾换为磷酸二氢钠，其余同实施例1。经过本实施例的固定剂处理后的猪血，呈暗红色悬浊液，无溶血、脂血和凝块。显微镜下检测各血细胞形态正常。保存期为9个月以上，保存期间wbc、rbc、hgb、hct、mcv和plt的变异系数cv＜5％(表12)，wbc、rbc、hgb、hct、mcv和plt的瓶间变异系数cv＜2.5％(表13)，说明柠檬酸三钠与柠檬酸三钾，磷酸二氢钾与磷酸二氢钠可以相互替代。表12长期稳定性测定结果测定日期wbcrbchgbhctmcvplt第1个月8.654.237522.152.6184第2个月8.614.267622.353.1190第3个月8.694.297622.352.6193第4个月8.764.257522.552.4174第5个月8.794.217622.152.8169第6个月8.754.197622.652.3173第7个月8.814.237622.452.4174第8个月8.844.257522.552.6176第9个月8.84.287522.352.1170平均数8.744.247622.3452.54178sd0.080.030.530.170.298.74cv％0.89％0.75％0.70％0.78％0.56％4.91％表13瓶间差检测结果应该理解到披露的本发明不仅仅限于描述的特定的方法、方案和物质，因为这些均可变化。还应理解这里所用的术语仅仅是为了描述特定的实施方式方案的目的，而不是意欲限制本发明的范围，本发明的范围仅受限于所附的权利要求。本领域的技术人员还将认识到，或者能够确认使用不超过常规实验，在本文中所述的本发明的具体的实施方案的许多等价物。这些等价物也包含在所附的权利要求中。当前第1页12