一种柔性拉曼增强基底及其制备方法和应用与流程

本发明涉及表面增强拉曼光谱检测领域，尤其涉及一种柔性拉曼增强基底及其制备方法和应用。

背景技术：

表面增强拉曼散射(sers)技术的发展给拉曼光谱的应用提供了广阔的应用前景，sers效应的基础是将待测物质置于拉曼增强基底表面时，拉曼增强基底表面的金属表面等离子体所引起的局域场增强，能够放大入射光的强度，使得输出的待测物质的拉曼光谱强度大幅度增加，sers效应能够实现单分子水平的高灵敏度拉曼光谱检测。

能够产生sers效应的拉曼增强基底表面多为金属，常用的金属有金(au)、银(ag)和铜(cu)等，由于金的表面等离子体共振(spr)位于可见光区和近红外区，且具有良好的化学稳定性，因此，金在拉曼增强基底领域的应用最为广泛，目前常用的拉曼增强基底多为粗糙的金表面或者金纳米粒子(aunp)表面，例如，cn104089942a中公开了一种具有超疏水性质的表面增强拉曼基底，通过对泡沫镍进行清洁处理并将其浸泡在贵金属盐的水溶液中制备sers基底，再将得到的sers基底用长烷基硫醇分子进行修饰，来获得一种具有超疏水性质的表面增强拉曼基底，其得到的表面增强拉曼基底在用于检测多环芳烃时，检测极限可达10^-8mol/l的级别，然而，其检测结果的信噪比太低，无法实现定量的浓度分析；cn103344624a中公开了一种用溶液法制备表面增强拉曼散射基底的方法，包括制备直径为1～5nm的烃基硫醇修饰的金属纳米颗粒，将其溶于有机溶剂中制成浓度为60～100mg/ml的金属纳米颗粒溶胶，之后将得到的溶胶涂覆在基底上，以1500～3000转/min的转速旋涂30～60s，得到金属胶体薄膜，将得到的金属胶体薄膜置于马弗炉中，在5min内升温至140～250℃，保持5～30min后，冷却至室温，得到所述表面增强拉曼散射基底，其得到的表面增强拉曼散射基底在进行拉曼检测时相对标准差为5～6.8％，增强因子在10⁶～10⁷的范围内；然而，上述现有技术中得到的表面增强拉曼散射基底在具有较高增强因子的同时，其缺点也同样明显，例如，待测分子与增强基底之间的直接接触会导致一系列的化学吸附、金属-分子间电荷转移和金属催化的副反应等，造成表面增强拉曼光谱的信号复杂、白噪音高、真实性低等缺点，通过设计与发展新型的拉曼增强基底，进而彻底克服传统表面增强技术的局限性是限制当前表面增强拉曼光谱检测领域发展的关键问题。

金属纳米颗粒的自组装是常用的制备纳米结构的方法，其原理主要是基于金属纳米粒子形状的可控性以及组装表面的均一性，高度有序的纳米粒子自组装，能够形成组成均一的拉曼增强基底，有利于待测分子在基底表面的均匀分布，从而提高其拉曼信号的可重复性和稳定性。

因此，在现有技术的基础上，本领域的技术人员需要设计一种通过自组装形成的金纳米粒子阵列，以此来制备一种新型拉曼增强基底，该拉曼增强基底材料需要具有较高的增强因子，能够防止待测分子与增强基底之间发生反应，能够实现定量的拉曼光谱检测，同时还需要具备一定的柔性和透明性，能够实现柔性自支撑，以实现不溶材料表面的拉曼光谱检测。

技术实现要素：

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种新型拉曼增强基底，该拉曼增强基底材料需要具有较高的增强因子，能够防止待测分子与增强基底之间发生反应，能够实现定量的拉曼光谱检测，同时还需要具备一定的柔性和透明性，能够实现柔性自支撑，以实现不溶材料表面的拉曼光谱检测。

为达此目的，本发明的目的之一在于提供一种柔性拉曼增强基底，所述柔性拉曼增强基底包括柔性聚合物基底层以及在柔性聚合物基底层表面六方最密堆积的具有核壳结构的金纳米粒子层。

所述金纳米粒子表面包覆有由烷基硫醇分子自组装形成的钝化层，使其具有核壳结构。

在本发明中，烷基硫醇分子在自组装的过程中起到骨架分子的作用，采用烷基硫醇分子包裹金纳米粒子表面，使其形成核壳结构，能够防止金纳米粒子的团聚，有利金纳米粒子的分散并能够调控金纳米粒子之间的距离。

在表面张力、纳米颗粒间的范德华力以及柔性聚合物表面的分子间作用力的协同作用下，具有核壳结构的金纳米粒子能够在界面自组装，形成均一、有序的六方最密堆积的超晶格结构，将其转移至柔性聚合物基底层表面，能够得到柔性、透明、自支撑的拉曼增强基底。

优选地，所述金纳米粒子之间的间距为2～50nm，例如为3nm、5nm、10nm、15nm、20nm、25nm、30nm、35nm、40nm、45nm或48nm等。

优选地，所述的金纳米粒子之间的间距90％以上在2～10nm之间，此部分间距的金纳米粒子提供了几乎全部的拉曼增强效果。

优选地，所述金纳米粒子的粒径为8～100nm，例如为9nm、12nm、15nm、18nm、21nm、25nm、30nm、35nm、40nm、45nm、50nm、55nm、60nm、65nm、70nm、75nm、80nm、85nm、90nm或95nm等，进一步优选为25～80nm，最优选为40～50nm。

优选地，所述金纳米粒子层有且仅由一层金纳米粒子组成。

优选地，所述金纳米粒子表面还包覆有内标分子，所述内标分子为具有稳定结构的，能够在拉曼光谱测试中起到标定各峰位置作用的标准物分子。

优选地，所述内标分子为含有巯基的内标分子，进一步优选为4-巯基吡啶、4-巯基苯甲酸或4-巯基苯胺中的任意一种分子。

优选地，所述烷基硫醇分子为正烷基硫醇分子，进一步优选为任意一种碳原子数为10～24(例如碳原子数为11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22或23等)的正烷基硫醇分子，上述碳原子数的正烷基硫醇分子包覆于金纳米粒子表面时，形成的钝化层较密集，有利于核壳结构的形成和金纳米粒子的分散，同时还能够对金纳米粒子之间的间距进行调控。

优选地，所述柔性聚合物基底中的柔性聚合物为聚甲基丙烯酸甲酯、聚二甲基硅氧烷、聚对苯二甲酸乙二醇酯或聚乙烯醇中的任意一种或至少两种的混合物，上述聚合物柔性较高，且对于金纳米粒子具有较好的亲和性，有利于金纳米粒子进行自组装形成六方最密堆积的超晶格结构；

优选地，所述柔性聚合物基底的厚度为1～1000μm，例如为2μm、10μm、20μm、40μm、100μm、200μm、300μm、400μm、600μm、800μm或950μm等，本领域的技术人员可以根据透光性或机械强度的需要选择任意一种柔性聚合物基底的厚度。。

本发明的目的之二在于提供一种所述柔性拉曼增强基底的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

步骤(1)，制备金纳米粒子的水溶胶，将金纳米粒子的水溶胶与第一有机溶剂混合，向其中加入含有烷基硫醇分子的第二有机溶剂溶液，混合均匀，得到混合液，之后，静置直到混合液明显分层，在有机相和水相的界面处得到具有核壳结构的金纳米粒子膜层；

步骤(2)，将柔性聚合物溶液涂覆在牺牲层基底上，烘干得到柔性聚合物薄膜，去除步骤(1)中所述混合液中的金纳米粒子膜层之上的有机层，将柔性聚合物薄膜倾斜插入至金纳米粒子膜层之下的水层，之后倾斜提起，将具有核壳结构的金纳米粒子转移至柔性聚合物薄膜表面，干燥之后，使得具有核壳结构的金纳米粒子在柔性聚合物薄膜表面自组装形成具有六方最密堆积的结构；

步骤(3)，使用刻蚀液刻蚀去除步骤(2)中表面含有金纳米粒子的柔性聚合物薄膜的牺牲层基底，清洗去除刻蚀液和其他可溶性物质，即得到所述柔性拉曼增强基底。

优选地，步骤(1)中所述的金纳米粒子水溶胶通过用柠檬酸钠和/或抗坏血酸还原沸腾的氯金酸溶液得到。

优选地，步骤(1)中所述的第一有机溶剂为与水互溶的有机溶剂，进一步优选为丙酮。

优选地，步骤(1)中所述的第二有机溶剂为不溶于水的有机溶剂，进一步优选为正己烷。

优选地，步骤(1)中所述的含有烷基硫醇分子的第二有机溶剂溶液中还含有内标分子。

优选地，所述内标分子和烷基硫醇分子的物质的量之比为1:40～60，例如为1:41、1:42、1:43、1:44、1:45、1:46、1:47、1:48、1:49、1:50、1:51、1:52、1:53、1:54、1:55、1:56、1:57、1:58或1:59等。

优选地，步骤(1)中所述的静置的时间为10～30min，例如为11min、12min、13min、14min、15min、16min、17min、18min、19min、20min、21min、22min、23min、24min、25min、26min、27min、28min或29min等。

优选地，步骤(2)中所述的牺牲层基底为铝箔基底或铜箔基底。

优选地，步骤(2)中所述的烘干为自然风干或在170℃以内的温度下加热烘干。

优选地，步骤(2)中所述的干燥的温度为100～120℃，例如为101℃、103℃、105℃、107℃、109℃、111℃、113℃、115℃、117℃或119℃等。

优选地，步骤(2)中所述的干燥的时间为5～20min，例如为6min、7min、8min、9min、10min、11min、12min、13min、14min、15min、16min、17min、18min或19min等。

优选地，步骤(3)中所述的刻蚀液为酸性三氯化铁溶液。

优选地，步骤(3)中所述的刻蚀的时间为15～30min，例如为16min、17min、18min、19min、20min、21min、22min、23min、24min、25min、26min、27min、28min或29min等。

优选地，步骤(3)中所述的清洗为依次使用去离子水、稀盐酸和去离子水进行清洗。

本发明的目的之三在于提供一种如前所述的柔性增强拉曼基底在正入射式拉曼检测和背入射式拉曼检测中的应用；

所述正入射式拉曼检测包括将待测物质经溶解、制样，涂覆或吸附于所述柔性增强拉曼基底的金纳米粒子层一侧，检测光束直接照射待测物质进行拉曼光谱测试；

所述背入射式拉曼检测包括将待测物质经溶解、制样，涂覆或吸附于所述柔性增强拉曼基底的金纳米粒子层一侧，检测光束透过柔性聚合物基底层进行拉曼光谱测试，或者直接将金纳米粒子层一侧贴附于含有待测物质的表面，检测光束透过柔性聚合物基底层进行拉曼光谱测试。

本发明所述的数值范围不仅包括上述例举的点值，还包括没有例举出的上述数值范围之间的任意的点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明通过在金纳米粒子表面包覆有由烷基硫醇分子自组装形成的钝化层，使其具有核壳结构，之后将具有核壳结构的金纳米粒子层以六方最密堆积的形式在柔性聚合物基底层表面均匀分布形成超晶体结构，能够获得一种表面高度有序的柔性拉曼增强基底，其增强因子可达3.5×10⁷，几乎可以实现单分子检测，检测时拉曼光谱的相对标准偏差在4％左右，拉曼增强信号干净，具有优良的可靠性和可重复性，能够实现拉曼光谱的定量分析，柔性聚合物基底层的引入还能够使其贴合于任意形貌的表面进行拉曼光谱检测，同时实现背入射式拉曼检测和正入射式拉曼检测，拓宽了拉曼光谱的应用范围。

附图说明

图1为本发明具体实施方式中实施例1得到的柔性拉曼增强基底1的tem照片。

图2为本发明具体实施方式中实施例1～5得到的柔性拉曼增强基底1～5在检测浓度为10^-8mol/l的结晶紫溶液时的拉曼光谱。

图3为使用本发明具体实施方式中实施例1得到的柔性拉曼增强基底1对浓度为10^-8mol/l的结晶紫溶液进行正入射式拉曼检测以及不使用拉曼增强基底，直接使用拉曼光谱仪检测浓度为10^-4mol/l的结晶紫溶液得到的拉曼光谱。

图4为本发明具体实施方式中实施例1得到的柔性拉曼增强基底1分别对浓度为10^-8mol/l的结晶紫溶液进行正入射式拉曼检测和背入式拉曼检测得到的拉曼光谱。

具体实施方式

下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。

本发明中，不同粒径的金纳米粒子的水溶胶可以通过市场购得，也可根据现有技术采用如下方法制备：

平均粒径为15nm的金纳米粒子的水溶胶：将还原性混合物(含1ml1wt％的柠檬酸三钠溶液)迅速加入沸腾的50ml氯金酸溶液(含1ml1wt％的haucl4溶液和49ml去离子水)，混合并剧烈搅拌，待混合液由无色变为蓝色然后迅速变为亮红色，即得到平均粒径为15nm的金纳米粒子水溶胶，待金纳米粒子水溶胶冷却后，将其放置于5℃下保存。

平均粒径为45nm的金纳米粒子的水溶胶：将1.5ml上述平均粒径为15nm的金纳米粒子的水溶胶作为种子溶液稀释至20ml，加入至三颈烧瓶，在强搅拌条件下，以0.25ml/min的速度通过蠕动泵向其中加入10ml还原液(含2ml1wt％的haucl4溶液以及10ml含0.5ml柠檬酸钠和0.25ml抗坏血酸的溶液)，待蠕动泵注射完毕后，将混合液搅拌加热至沸腾，并持续回流30min，即得到平均直径为45nm的金纳米粒子的水溶胶。

通过改变上述方法中种子溶液的加入量为6ml、10ml和4ml，能够依次得到平均粒径分别为25nm、78nm和95nm的金纳米粒子的水溶胶。

实施例1

通过如下步骤制备柔性拉曼增强基底1：

步骤(1)，制备10ml金纳米粒子(平均粒径为45nm)的水溶胶，将该金纳米粒子的水溶胶与10ml丙酮混合，向其中加入含有73.5μmol正十二烷基硫醇(ddt)和1.5μmol4-巯基吡啶(4-mpy)的正己烷溶液，得到混合液，剧烈摇晃所述混合液1min，使其中的各组分充分分散，然后立即将混合液转移至带有挡板的水槽中，静置10～30min，待纳米粒子进行自组装，在有机相和水相的界面处得到具有核壳结构的金纳米粒子膜层，根据成膜面积调节挡板位置，使其稳定成膜，该金纳米粒子膜层从侧面看为金色，正面看为蓝紫色，其上下两侧的有机层和水层均为无色透明层；

步骤(2)，将聚甲基丙烯酸甲酯的水溶液以2000转/min的转速旋涂在铝箔制成的基底上，自然烘干得到厚度约为10μm的柔性聚合物薄膜，使用纯的正己烷清洗步骤(1)中得到的金纳米粒子膜层两次，去除多余未进行自组装的分子，之后使用吸管除去金纳米粒子膜层之上的有机层，待剩余有机层自然挥发后，将柔性聚合物薄膜倾斜插入至金纳米粒子膜层之下的水层，之后倾斜提起，将具有核壳结构的金纳米粒子转移至柔性聚合物薄膜表面，使用热板在120℃下进行干燥10min后，使得具有核壳结构的金纳米粒子在柔性聚合物薄膜表面自组装形成具有六方最密堆积的结构；

步骤(3)，使用刻蚀液酸性三氯化铁溶液刻蚀15～30min去除步骤(2)中表面含有金纳米粒子的柔性聚合物薄膜的铝箔制成的基底，之后依次使用去离子水、稀盐酸和去离子水清洗，去除残余的刻蚀液和其他可溶性物质，即得到所述柔性拉曼增强基底1。

实施例2

通过如下步骤制备柔性拉曼增强基底2：

与实施例1的区别仅在于，金纳米粒子的水溶胶中金纳米粒子的平均粒径为15nm，ddt的加入量为98μmol，4-mpy的加入量为2μmol。

实施例2得到柔性拉曼增强基底2。

实施例3

通过如下步骤制备柔性拉曼增强基底3：

与实施例1的区别仅在于，金纳米粒子的水溶胶中金纳米粒子的平均粒径为25nm，ddt的加入量为40μmol，4-mpy的加入量为1μmol。

实施例3得到柔性拉曼增强基底3。

实施例4

通过如下步骤制备柔性拉曼增强基底4：

与实施例1的区别仅在于，金纳米粒子的水溶胶中金纳米粒子的平均粒径为78nm，ddt的加入量为13μmol，4-mpy的加入量为0.3μmol。

实施例4得到柔性拉曼增强基底4。

实施例5

通过如下步骤制备柔性拉曼增强基底5：

与实施例1的区别仅在于，金纳米粒子的水溶胶中金纳米粒子的平均粒径为95nm，ddt的加入量为10μmol，4-mpy的加入量为0.2μmol。

实施例5得到柔性拉曼增强基底5。

实施例6

通过如下步骤制备柔性拉曼增强基底6：

与实施例1的区别仅在于，将步骤(1)中的正十二烷基硫醇替换为相同摩尔量的正二十二烷基硫醇。

实施例6得到柔性拉曼增强基底6。

实施例7

通过如下步骤制备柔性拉曼增强基底7：

与实施例1的区别仅在于，将步骤(1)中的4-巯基吡啶替换为相同摩尔量的4巯基苯胺。

实施例7得到柔性拉曼增强基底7。

实施例8

通过如下步骤制备柔性拉曼增强基底8：

与实施例1的区别仅在于，步骤(1)中不加入4巯基吡啶。

实施例8得到柔性拉曼增强基底8。

实施例9

通过如下步骤制备柔性拉曼增强基底9：

与实施例1的区别仅在于，将步骤(2)中的聚甲基丙烯酸甲酯的水溶液替换为聚二甲基硅氧烷溶液。

实施例9得到柔性拉曼增强基底9。

对照例1

以cn103344624a中的实施例1得到的拉曼增强基底作为对照例1。

通过如下测试方法分别对本发明实施例1～9得到的柔性拉曼增强基底1～9以及对照例1得到的拉曼增强基底进行测试和表征。

(1)形貌测试

采用美国fei公司生产的tecnaig220s-twin型透射电镜(tem)分别测试各实施例和对照例中得到的拉曼增强基底表面的形貌特征，测试参数为：加速电压：200kv；灯丝：六硼化镧灯丝；晶格分辨率：0.14nm；点分辨率：0.24nm；最小束斑尺寸：1.5nm。

(2)增强性能测试

采用英国renishaw公司生产的renishawinviaplus型拉曼光谱仪，以浓度为10^-8mol/l的结晶紫溶液作为待测物质，分别使用本发明得到的柔性增强拉曼基底1～9对其进行正入射式拉曼检测和背入射式拉曼检测，拉曼光谱仪的测试参数为：激光能量：2mw；累计时间：10s；镜头放大倍数：50倍。

之后，以浓度为10^-4mol/l的结晶紫溶液作为待测物质，不使用本发明得到的柔性拉曼增强基底，直接测试该结晶紫溶液的拉曼光谱，作为对比。

所述正入射式拉曼检测为将待测物质经溶解、制样，涂覆或吸附于所述柔性增强拉曼基底的金纳米粒子层一侧，检测光束直接照射待测物质进行拉曼光谱测试。

所述背入射式拉曼检测为将待测物质经溶解、制样，涂覆或吸附于所述柔性增强拉曼基底的金纳米粒子层一侧，检测光束透过柔性聚合物基底层进行拉曼光谱测试，或者直接将金纳米粒子层一侧贴附于含有待测物质的表面，检测光束透过柔性聚合物基底层进行拉曼光谱测试。

(3)均一性测试

采用增强性能测试中使用的拉曼光谱仪和测试参数，分别随机扫描本发明得到的柔性增强拉曼基底1～5的任意位置，测试方式为正入射式拉曼检测，以检测得到的拉曼光谱中4-mpy分子在1090cm^-1处的特征峰面积的相对标准偏差(rsd)表征基底的均一性。

之后，分别将本发明得到的柔性增强拉曼基底1～5浸没入浓度为2×10^-9mol/l的孔雀石绿(mg)溶液中1h，之后将其用超纯水清洗，室温下干燥30min，使用上述拉曼光谱仪随机扫描得到的吸附有mg分子的柔性拉曼增强基底1～5中任选20μm范围内的18个点，以各点处mg分子在1177cm^-1处的特征峰与4-mpy的峰面积相对比值(ir)为测定信号，测试方式为正入射式拉曼检测，以ir的相对标准偏差来表征基底对待测分子的吸附均一性。

以本发明的实施例1～5和对照例1为例，对上述测试结果进行说明。

图1为本发明实施例1得到的柔性拉曼增强基底1的tem照片，从中明显可以看出，本发明得到的柔性拉曼增强基底中，具有核壳结构的金纳米粒子在柔性聚合物基底层表面形成六方最密堆积的超晶体结构，柔性聚合物基底层表面的金纳米粒子有且仅有一层，表面由烷基硫醇分子自组装形成钝化层，壳层的厚度＜2nm，相邻两个金纳米粒子之间的间距仅为2nm左右。

从形貌测试中可知，本发明其他实施例中得到的柔性拉曼增强基底表面亦具有如柔性拉曼增强基底1相同或类似的超晶体结构，实施例2～5得到的柔性拉曼增强基底2～5中，具有核壳结构的金纳米粒子的平均粒径分别为15nm、25nm、78nm和95nm，壳层的厚度＜2nm，且相邻两个金纳米粒子之间的间距为2～10nm左右，说明本发明得到的柔性拉曼增强基底表面的结构非常规整，极其适合作为拉曼增强基底使用。

图2为本发明实施例1～5得到的柔性拉曼增强基底1～5在检测浓度为10^-8mol/l的结晶紫溶液时的拉曼光谱，其中可以明显看出，实施例1，即当柔性拉曼增强基底中的金纳米粒子的平均粒径为45nm左右时，柔性拉曼增强基底的拉曼增强效应最强。

增强因子是定量评价基底灵敏度的重要参数和进行定量sers分析的前提，本发明所述的增强因子是指基底增强因子(serssubstrateenhancementfactor，ssef)，对于本发明得到的柔性拉曼增强基底，其基底增强因子(ssef)的计算公式可表达为：

ssef＝(isers/nsurf)/(irs/nvol)。

其中，isers和irs分别为吸附在基底上的待测分子以及溶液中待测分子的特征峰的积分面积，nsurf和nvol分别为基底上的活性待测分子和溶液中激光所照射到的待测分子数。

根据上述拉曼光谱图，经过计算，本发明实施例1～5得到的柔性拉曼增强基底1～5的基底增强因子分别为3.5×10⁷、9.0×10⁶、2.2×10⁷、1.5×10⁷和3×10⁶，均优于其他现有技术(例如对照例1得到的拉曼增强基底)，这与本发明得到的柔性拉曼增强基底的表面高度有序性是密切相关的。

图3为使用本发明实施例1得到的柔性拉曼增强基底1对浓度为10^-8mol/l的结晶紫溶液进行正入射式拉曼检测以及不使用拉曼增强基底，直接使用拉曼光谱仪检测浓度为10^-4mol/l的结晶紫溶液得到的拉曼光谱，二者的对比可知，相比于溶液的直接拉曼检测，本发明得到的柔性拉曼增强基底对待测分子具有很强的增强效果，几乎实现单分子检测。

图4为本发明实施例1得到的柔性拉曼增强基底1分别对浓度为10^-8mol/l的结晶紫溶液进行正入射式拉曼检测和背入式拉曼检测得到的拉曼光谱，通过比较发现，两种检测方式得到的拉曼光谱具有很好的一致性，并且两种入射方式均能得到真实的拉曼信号，光谱图中可以同时得到内标分子和待测分子清晰的拉曼特征峰，说明本发明得到的柔性拉曼增强基底具有良好的柔性和透光性，且背入式的检测方法能够实现难溶或不规则物体表面的拉曼光谱检测。

从均一性测试中可知，本发明实施例1～5得到的柔性拉曼增强基底1～5的基底均一性和对待测分子吸附的均一性均较优，其相对标准偏差(rsd)分别为4％和6.5％左右，说明通过本发明所述的制备方法制得的柔性拉曼增强基底具有高度的可重复性和可靠性，可以用于拉曼定量分析。

综上所述，本发明通过在金纳米粒子表面包覆有由烷基硫醇分子自组装形成的钝化层，使其具有核壳结构，之后将具有核壳结构的金纳米粒子层以六方最密堆积的形式在柔性聚合物基底层表面均匀分布形成超晶体结构，能够获得一种表面高度有序的柔性拉曼增强基底，其增强因子可达3.5×10⁷，几乎可以实现单分子检测，检测时拉曼光谱的相对标准偏差在4％左右，拉曼增强信号干净，具有优良的可靠性和可重复性，能够实现拉曼光谱的定量分析，柔性聚合物基底层的引入还能够使其贴合于任意形貌的表面进行拉曼光谱检测，同时实现背入射式拉曼检测和正入射式拉曼检测，拓宽了拉曼光谱的应用范围。

以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。