本发明属于尿液分析检测领域，具体涉及一种抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸及其制备方法。
背景技术：
尿液分析是医学实验室的常规检验之一，在医疗检验中扮演重要的角色，对于相关疾病的诊断和治疗具有重要的指导作用。尿液分析可以对尿液中各种成分进行定性和定量的分析，包括尿胆原，胆红素，酮体，血，蛋白质，亚硝酸盐，白细胞，葡萄糖，肌酐，钙，比重，酸碱度，抗坏血酸等多个项目，其中尿葡萄糖的检测是尿液分析的主要检测项目，尿糖检测结果对于评估肾脏相关疾病具有重要的指导意义。
对于尿糖的检测主要有三种方式，干化学试带法，斑氏法和薄层层析法。其中干化学试带法由于其灵敏度高特异性强等优良的特性，成为尿糖检测的主要方法。干化学试带法对尿葡萄糖检测的原理是酶促的氧化还原法，葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下分解成葡萄糖醛酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下与色源物质反应进而产生颜色变化，从而对样本中的葡萄糖含量进行定性和半定量的分析。
基于氧化还原原理的葡萄糖检测方法，存在一定的干扰因素，当样本中存在强还原剂，会影响氧化还原反应的过程，造成检测结果的假阴性，干扰临床诊断。强还原剂抗坏血酸(vc)是尿糖检测过程中的主要的干扰因素，vc因其具有强还原性可与反应体系中的过氧化氢竞争与色源底物发生反应，使得检测结果偏低；另外，临床尿液样本中，由于患者饮食或者相关药物的影响，可能会存在大量的vc。综上所述，在尿糖检测中vc是很重要的干扰因素，直接影响检测结果的准确性，因此解决vc的干扰作用对于提高临床检测的准确性是至关重要的。
为解决尿试纸的vc干扰问题，试纸生产厂家寻找了各种解决方式。公开号为cn106198527的专利中在试纸中加入碘酸钾提高其抗vc干扰能力，但是碘酸钾与底物碘化钾会发生反应，可能影响检测结果的准确性和真实性。另外，在尿试纸中增加vc的检测项目，进而通过vc的测值对葡萄糖的检测结果进行评估，但是由于vc不稳定的特性，易造成测值偏低，进而影响到对葡萄糖检测结果的修正。因此，提高葡萄糖试纸块的抗vc干扰能力对于准确的评估被检样本中的尿糖含量是至关重要的，也是目前急需解决的问题。
技术实现要素：
本发明要解决现有干化学试纸法检测尿液葡萄糖时的大量抗坏血酸干扰的技术问题，提供一种抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸及其制备方法，本发明提供的尿葡萄糖检测试纸使得抗坏血酸浓度不高于3.5mmol/l时，尿糖检测没有干扰，临床上不出现假阴性结果。
为了解决上述技术问题，本发明的技术方案具体如下：
一种抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸，是由基板和固定在基板上的滤纸组成，所述滤纸是通过浸入到浸液中得到的；
其特征在于，
所述浸液包括缓冲液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、碘化钾、抗坏血酸氧化酶、抗干扰物质黄原胶、表面活性剂、酶稳定剂和蓝色染料物质。
在上述技术方案中，所述浸液的总体积为1000ml，其中：
所述缓冲液的体积为60％-90％、所述缓冲液的ph值为5.0-7.0，所述葡萄糖氧化酶为0.5-2.5％(m/m)，所述过氧化物酶为0.1-0.8％(m/m)，所述抗坏血酸氧化酶为0.05-0.2％(m/m)，所述碘化钾的浓度为0.5-2％，所述抗干扰物质黄原胶浓度为0.002-0.04％，所述表面活性剂的浓度为0.1-0.8％，所述酶稳定剂的浓度为0.01-0.1％，所述蓝色染料物质的浓度为0.001-0.01％，余量为水。
在上述技术方案中，所述缓冲液的体积为70％-80％、所述缓冲液的ph值为5.5-6.5，所述葡萄糖氧化酶为1.5-2.0％(m/m)，所述过氧化物酶为0.2％-0.4％(m/m)，所述抗坏血酸氧化酶为0.08-0.1％(m/m)，所述碘化钾的浓度为0.8-1.2％，所述抗干扰物质黄原胶浓度为0.01-0.03％，所述表面活性剂的浓度为0.4-0.6％，所述酶稳定剂的浓度为0.04-0.08％，所述蓝色染料物质的浓度为0.003-0.006％，余量为水。
在上述技术方案中，所述缓冲液为柠檬酸缓冲液或磷酸盐缓冲液，所述表面活性剂为聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇或聚乙二醇，所述酶稳定剂为牛血清白蛋白、吐温或乙酸钠，所述蓝色染料物质为食品蓝i号或亮蓝。
在上述技术方案中，所述浸液为：
在上述技术方案中，所述浸液为：
在上述技术方案中，所述浸液为：
一种抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将滤纸完全浸入浸液中，在50-60℃下进行干燥，干燥时间为20-25分钟；
步骤二：将干燥后的滤纸剪切后与基板组合固定，经滚切后制备成尿葡萄糖检测试纸。
在上述技术方案中，所述抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸的制备过程中，环境温度要求：18-28℃，环境湿度要求：10-40％。
在上述技术方案中，所述抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸的制备过程中，环境温度要求：23-25℃，环境湿度要求：20-30％。
所述试纸抗坏血酸干扰性能验证方法为：配制5.6mmol/l的葡萄糖标准液，添加3.5mmol/l的抗坏血酸，对试纸条进行测试，用尿液分析仪进行判读，结果不为阴性。
本发明的有益效果是：
本发明提供抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸，通过将试纸浸入到由缓冲液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、碘化钾、抗坏血酸氧化酶、抗干扰物质黄原胶、表面活性剂、酶稳定剂和蓝色染料物质组成的浸液中而得到，可以显著提高以碘化钾为底物的葡萄糖试纸抗vc干扰能力，增强检测结果的灵敏度和准确性。使得样本中的vc含量不超过3.5mmol/l时，葡萄糖检测结果不受影响。
本发明提供的抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸的制备方法，简单，易操作，性能稳定，测试结果准确。
具体实施方式
本发明提供一种抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸，是由基板和固定在基板上的滤纸组成，所述滤纸是通过浸入到浸液中得到的；
所述浸液包括缓冲液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、碘化钾、抗坏血酸氧化酶、抗干扰物质黄原胶、表面活性剂、酶稳定剂和蓝色染料物质；
优选所述浸液的总体积为1000ml，其中：
所述缓冲液为柠檬酸缓冲液或磷酸盐缓冲液等缓冲液，优选为柠檬酸缓冲液；所述缓冲液的体积为60％-90％(m/m)，优选70％-80％；所述缓冲液的ph值为5.0-7.0，优选5.5-6.5；
所述葡萄糖氧化酶为0.5-2.5％(123u)(m/m)，优选1.5-2.0％；
所述过氧化物酶为0.1-0.8％(203u)(m/m)，优选0.2％-0.4％(m/m)；
所述抗坏血酸氧化酶为0.05-0.2％(400u)(m/m)，优选0.08-0.1％；
所述碘化钾的浓度为0.5-2％，优选0.8-1.2％；
所述抗干扰物质黄原胶浓度为0.002-0.04％，优选0.01-0.03％；
所述表面活性剂为聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇或聚乙二醇等，优选为聚乙烯吡咯烷酮；所述表面活性剂的浓度为0.1-0.8％，优选0.4-0.6％；
所述酶稳定剂为牛血清白蛋白、吐温或乙酸钠等，优选牛血清白蛋白；所述酶稳定剂的浓度为0.01-0.1％，优选0.04-0.08％；
所述蓝色染料物质为食品蓝i号或亮蓝等，优选食品蓝i号；所述蓝色染料物质的浓度为0.001-0.01％，优选0.003-0.006％；
余量为水。
所述抗坏血酸干扰的尿葡萄糖检测试纸的制备过程中，环境温度要求：18-28℃，优选23-25℃，环境湿度要求：10-40％，优选20-30％；
所述试纸抗坏血酸干扰性能验证方法为：配制5.6mmol/l的葡萄糖标准液，添加3.5mmol/l的抗坏血酸，对试纸条进行测试，用尿液分析仪进行判读，结果不为阴性。
以下通过具体实施例进一步对本发明进行阐述，实施例的具体细节仅用于解释本发明，不应理解为对本发明总的技术方案的限定。
实施例1
(1)配制浸液1：按以下配方配制浸液。
(2)配制浸液2：按以下配方配制浸液。
上述柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液的ph值为6.5；
(3)试纸制备：
环境温度要求：23-25℃，环境湿度要求：20-30％；
分别将滤纸完全浸入浸液1和2，在5℃下干燥25分钟，干燥后的滤纸剪切后与基板组合固定，经滚切后制备成尿葡萄糖检测试纸1-1，1-2。
(4)将制备所得的试纸1-1和1-2对添加3.5mmol/l抗坏血酸的5.6mmol/l的葡萄糖标准液进行测定，用尿液分析仪进行判读，结果如下表所示。(neg表示阴性)
实施例2
(1)配制浸液1：按以下配方配制浸液。
(2)配制浸液2：按以下配方配制浸液。
上述磷酸盐缓冲液的ph值为5.5；
(3)试纸制备：
环境温度要求：23-25℃，环境湿度要求：20-30％；
分别将滤纸完全浸入浸液1和2，在60℃下干燥20分钟，干燥后的滤纸剪切后与基板组合固定，经滚切后制备成尿葡萄糖检测试纸2-1，2-2。
(4)将制备所得的试纸2-1和2-2对添加3.5mmol/l抗坏血酸的5.6mmol/l的葡萄糖标准液进行测定，用尿液分析仪进行判读，结果如下表所示。
实施例3
(1)配制浸液1：按以下配方配制浸液。
(2)配制浸液2：按以下配方配制浸液。
上述柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液的ph值为6.5；
(3)试纸制备：
环境温度要求：23-25℃，环境湿度要求：20-30％；
分别将滤纸完全浸入浸液1和2，在55℃下干燥22分钟，干燥后的滤纸剪切后与基板组合固定，经滚切后制备成尿葡萄糖检测试纸3-1，3-2。
(4)将制备所得的试纸3-1和3-2对添加3.5mmol/l抗坏血酸的5.6mmol/l的葡萄糖标准液进行测定，用尿液分析仪进行判读，结果如下表所示。
实施例4
(1)配制浸液1：按以下配方配制浸液。
(2)配制浸液2：按以下配方配制浸液。
上述柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液的ph值为6.5；
(3)试纸制备：
环境温度要求：23-25℃，环境湿度要求：20-30％；
分别将滤纸完全浸入浸液1和2，在5℃下干燥25分钟，干燥后的滤纸剪切后与基板组合固定，经滚切后制备成尿葡萄糖检测试纸1-1，1-2。
(4)将制备所得的试纸4-1和4-2对添加3.5mmol/l抗坏血酸的5.6mmol/l的葡萄糖标准液进行测定，用尿液分析仪进行判读，结果如下表所示。(neg表示阴性)
实施例5
(1)配制浸液1：按以下配方配制浸液。
(2)配制浸液2：按以下配方配制浸液。
上述磷酸盐缓冲液的ph值为5.5；
(3)试纸制备：
环境温度要求：23-25℃，环境湿度要求：20-30％；
分别将滤纸完全浸入浸液1和2，在60℃下干燥20分钟，干燥后的滤纸剪切后与基板组合固定，经滚切后制备成尿葡萄糖检测试纸2-1，2-2。
(4)将制备所得的试纸5-1和5-2对添加3.5mmol/l抗坏血酸的5.6mmol/l的葡萄糖标准液进行测定，用尿液分析仪进行判读，结果如下表所示。
实施例6
(1)配制浸液1：按以下配方配制浸液。
(2)配制浸液2：按以下配方配制浸液。
上述柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液的ph值为6.5；
(3)试纸制备：
环境温度要求：23-25℃，环境湿度要求：20-30％；
分别将滤纸完全浸入浸液1和2，在55℃下干燥22分钟，干燥后的滤纸剪切后与基板组合固定，经滚切后制备成尿葡萄糖检测试纸3-1，3-2。
(4)将制备所得的试纸6-1和6-2对添加3.5mmol/l抗坏血酸的5.6mmol/l的葡萄糖标准液进行测定，用尿液分析仪进行判读，结果如下表所示。
上述实施例中所用浸液的各成分的含量还可以是上述限定的范围内的任意值，这里不再一一例举。
实施例7
将本发明中实施例1-6中得到的尿葡萄糖试纸1-2，2-2，3-2，4-2，5-2，6-2分别对20分临床尿液样本进行测定，同时将尿液样本用己糖激酶法原理的生化试剂盒进行测定，试纸的测试结果与生化测试结果相符。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。