一种采用GC-MS测定日用香精中2,4-二烯醛类化合物的方法与流程

本发明属于香精中风险物质残留量测定领域，特别涉及一种采用gc-ms测定日用香精中2,4-二烯醛类化合物的方法。
背景技术：
：香精是由多种香原料、溶剂或载体以及其他辅料调配而成的芳香类混合物。香精广泛配套于食品、饮料、酒类、卷烟、洗涤用品、化妆品、牙膏、医药、饲料、纺织及皮革等工业。随着人们消费水平的提高，其对食品、日用品的品质要求也越来越高，这就促进了香料香精行业的快速增长。而在香料香精行业如此发达的今天，香精安全也引起人们的重视。醛类，香料中非常重要的一族，对日用香精有着不可忽视的香气贡献。最早用于香水的一组醛类是辛醛、癸醛、壬醛。在上世纪20年代,人们从植物油中发现了2,4-二烯醛类化合物。随后又在水果、奶类、花生、茶叶及熟肉食物中发现了它们的存在。其中2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛是2,4-二烯醛(一组物质)中的几个醛类，且它们都是具有两个双键的不饱合醛类。2,4-己二烯醛，cas登录号为142-83-6，分子式：c6h8o，分子量：96.127，沸点：69℃。2,4-己二烯醛的结构式如下：反,反-2,4-庚二烯醛，又名反式-2,4-庚二烯醛，cas登录号为4313-03-5，分子式：c7h10o，分子量：110.154，沸点：84℃。反,反-2,4-庚二烯醛的结构式如下：2,4-壬二烯醛，cas登录号为6750-03-4，分子式：c9h14o，分子量：138.207，沸点97-98℃。2,4-壬二烯醛的结构式如下：反式-2,4-癸二烯醛，cas登录号为25152-84-5，分子式：c10h16o，分子量：138.207，沸点114-116℃。反式-2,4-癸二烯醛的结构式如下：2,4-十一碳二烯醛，cas登录号为30361-29-6，分子式：c11h18o，分子量：166.260，沸点128-129℃。2,4-十一碳二烯醛的结构式如下：gb/t22731-2017中将2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛列入禁用物质名单。其中，2,4-己二烯醛是一种黄色透明液体，其气味特征可以描述为：绿色，果香，醛香，柑橘，适于配制花香型、果香型产品。其急性毒性表现为：大鼠经口的半数致死量(ld50)为300mg/kg，兔子经皮ld50为270μl/kg，对皮肤和眼睛有刺激性。反,反-2,4-庚二烯醛也是一种黄色透明液体，它具有脂肪味的气味类型，主要用于配制肉制品、调味品、烘烤食品类型的香精。其急性毒性表现为：大鼠经口的半数致死量(ld50)为1150mg/kg，兔子经皮ld50为313mg/kg。当接触量达到一定程度时，会造成皮肤刺激。造成严重眼刺激。2,4-壬二烯醛是一种无色至浅黄色透明液体。其气味特征可以描述为：在二丙二醇中浓度为0.10％时，具有脂肪、青瓜的气味，主要用以配制肉类和家禽型香精。反式-2,4-癸二烯醛是一种浅黄色至黄色透明液体，其气味特征可以描述为：在二丙二醇中含量为1％时，具有柑橘、南瓜果肉的气味。2,4-十一碳二烯醛是一种无色至黄色透明液体，其气味特征可以描述为：在二丙二醇中含量为1％时，具有油性、焦糖、辛辣、柑橘、黄油、烘焙的气味。目前关于2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的检测方法尚无国家标准颁布。使用gc-ms检测日用香精中禁限用物资具有快速、简便、灵敏度高、选择性强等优点，可实现几百种物质的检测分析，但迄今为止未见日用香精中2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的gc-ms检测方法的报道，因此建立简便、快速、准确、能准确定性和定量分析日用香精中2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的gc-ms检测方法具有重要意义。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题是提供一种采用gc-ms测定日用香精中2,4-二烯醛类化合物的方法，该方法具有操作简便、快速、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的优点。本发明提供了一种采用gc-ms测定日用香精中2,4-二烯醛类化合物的方法，包括：(1)称取样品用溶剂稀释，经过滤，滤液作为待测样液(2)采用gc-ms测定待测样液，用外标法定量分析；通过比较待测样液与标准溶液的测试结果，进行定性分析；其中，所述2,4-二烯醛类化合物包括2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛。所述步骤(1)中的溶剂为甲醇；稀释倍数为100倍。所述步骤(1)中的过滤为0.45μm微孔滤膜过滤。所述步骤(2)中的gc-ms的测定条件如下：色谱柱：hp-innowax毛细管柱，60m×0.25mm(内径)×0.25μm；载气：氦气，流速：0.8ml/min；程序升温：40℃保持6min，以3℃/min的速率升温至100℃，保持5min，以5℃/min的速率升温至230℃，保持10min；传输线温度：280℃；进样口温度：250℃；进样方式：自动进样；进样量：1μl；电离方式：电子轰击电离ei；电离能量：70ev；扫描方式：全扫描和sim碎片扫描。本发明实现五种2,4-二烯醛类化合物的同时定性和定量的检测过程中，升温程序起到重要作用。所述步骤(2)中的比较待测样液与标准溶液的测试结果的方法为：待测样液与标准溶液的选择离子色谱峰在相同保留时间处出现，对应质谱碎片离子的质荷比与标准物质一致，其丰度比与标准溶液相比在规定范围内。所述步骤(2)中的标准溶液的配制：用甲醇将2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛标准储备液逐级稀释得到浓度为0.0005mg/ml、0.001mg/ml、0.005mg/ml、0.010mg/ml、0.050mg/ml、0.100mg/ml的混合标准工作液，按照同样的测定条件浓度由低到高进样测定，以定性离子碎片峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。有益效果(1)本发明所述前处理方法普遍适用于澄清透明的香精，只需对样品进行稀释操作，操作简捷、快速，且满足重现性好、检出限低的分析要求，避免因样品前处理方式对分析结果产生影响；(2)本发明采用gc-ms定性定量测定日用香精中2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的含量，回收率为80％～120％，选择性强，相对标准偏差(rsd)为1％-8％，重复性好，有效的去除了基质的干扰；(3)采用本发明的方法，2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛的检出限为0.5mg/kg，定量限为1.6mg/kg,反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的检出限为5.4mg/kg，定量限为16.1mg/kg，满足痕量分析检测要求；(4)本发明能够简便、快速、定性定量测定日用香精中2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛，灵敏度高、重复性好、定性定量准确，能满足欧盟、日本等国家对相应化妆品中香精安全检测的技术要求，为保障我国化妆品香精安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。附图说明图1为五种2,4-二烯醛类化合物标准品的质谱分析图；图2为2,4-己二烯醛的离子碎片相对丰度值图谱；图3为反,反-2,4-庚二烯醛的离子碎片相对丰度值图谱；图4为2,4-壬二烯醛的离子碎片相对丰度值图谱；图5为反式-2,4-癸二烯醛的离子碎片相对丰度值图谱；图6为2,4-十一碳二烯醛的离子碎片相对丰度值图谱。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。实施例中使用的仪器：气相色谱-质谱(gc-ms)仪(gc7890b-ms5977b，安捷伦科技有限公司，美国)：配有电子轰击电离离子源(ei)。漩涡振荡器(vortex-5，海门市其林贝尔仪器制造有限公司)；分析天平(me104e/02，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)等。标准品：2,4-己二烯醛(纯度≥95％)、反,反-2,4-庚二烯醛(纯度≥90％)、反式-2,4-癸二烯醛(纯度≥90％)、2,4-壬二烯醛(纯度≥90％)和2,4-十一碳二烯醛(纯度≥90％)均为色谱纯，购自sigma公司；甲醇和丙酮，均为色谱纯，购自于上海安谱实验科技股份有限公司。混标储备液的配制：2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛标准储备液：称取2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛标准品0.0100g置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，配制成浓度为1mg/ml的标准储备液，于4℃避光保存，可使用三个月。实施例1db-2008香精中2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的gc-ms检测：(1)样品处理：称取1.0g香精试样，用甲醇稀释100倍，经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为待测样液。(2)气相色谱-质谱测定条件如下：a)色谱柱：hp-innowax毛细管柱，60m×0.25mm(内径)×0.25μm。b)载气：氦气，流速：0.8ml/min。c)程序升温：40℃保持6min，以3℃/min的速率升温至100℃，保持5min，以5℃/min的速率升温至230℃，保持10min。d)传输线温度：280℃。e)进样口温度：250℃。f)进样方式：自动进样。g)进样量：1μl。h)电离方式：电子轰击电离(ei)。i)电离能量：70ev。j)扫描方式：全扫描和sim碎片扫描，特征选择离子及丰度比见表1。表1特征选择离子及丰度比香料名称分子式cas特征选择离子及丰度比2,4-己二烯醛c6h8o142-83-681(100)、67(38)、96(36)反,反-2,4-庚二烯醛c7h10o4313-03-581(100)、53(28)、110(26)2,4-壬二烯醛c9h14o6750-03-481(100)、67(22)、138(10)反式-2,4-癸二烯醛c10h16o25152-84-581(100)、67(20)、95(12)2,4-十一碳二烯醛c11h18o30361-29-681(100)、67(22)、95(14)(3)标准工作溶液的配制：用甲醇将反式-2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛标准储备液逐级稀释得到浓度为0.0005mg/ml、0.001mg/ml、0.005mg/ml、0.010mg/ml、0.050mg/ml、0.100mg/ml的混合标准工作液，按照(2)的测定条件浓度由低到高进样测定，以定性离子碎片峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程，见表2。表22,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的标准工作曲线(4)定量测定：按照步骤(2)的测定条件对待测液进行测定，用外标法定量。待测液中2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。(5)定性判定：在仪器条件下，试样待测物和标准溶液的选择离子色谱峰在相同保留时间处出现，并且对应质谱碎片离子的质荷比与标准物质一致，其丰度比与标准溶液相比应符合表3规定的范围，可定性确认目标分析物。表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/％>50>20～50>10～20≤10允许的最大偏差/％±20±20±30±50(6)空白实验：除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。(7)结果计算结果按式(1)计算，计算结果保留两位小数。式中：x：试样中2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；ρ：从标准工作曲线上查出的试样溶液中2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的质量浓度，单位为毫克每毫升(mg/ml)；v：试样定容体积，单位为毫升(ml)；m：样品质量，单位为克(g)；1000：换算系数。在db-2008香精中未检出2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛。在db-2008香精中添加2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛标准品制备得样品1，并进行定量分析，五种禁用物质的含量见表4。表4样品1中2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的残留含量本实施例的2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛的检出限为0.5mg/kg，反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛的检出限为5.4mg/kg。2,4-己二烯醛、反,反-2,4-庚二烯醛、2,4-壬二烯醛、反式-2,4-癸二烯醛和2,4-十一碳二烯醛回收率在90％～120％之间。当前第1页12