一种用于毛细管亲和整体柱在线特异性吸附的装置的制作方法

本实用新型涉及一种用于毛细管亲和整体柱在线特异性吸附的装置，属于分析化学仪器设备领域。

背景技术：

随着微量分析的推广，柱上特异性吸附富集技术日趋重要，在高效液相色谱（hplc）分析得到了良好的应用。目前，在常规hplc中，柱上富集主要基于溶质在固定相中自发吸附,在柱头进样过程中产生局部堆积的填料自富集浓缩作用，样品消耗较大。毛细管亲和整体柱是继毛细管填充柱、毛细管开管柱之后的第三代色谱分离介质，作为一种柱内原位聚合的连续固定相，具有良好的网状结构、渗透性好、传质速度快、结构稳定、柱效高以及表面易于改性和易于制备等各项性能，已成为微流色谱研究的重点。

毛细管内固相微萃取技术与液相色谱的在线联用，使得分析样品用量从立升级减少到毫升级甚至微升级，实现了在线样品浓缩与分离,已应用于超微量、痕量分析。在线微柱特异性吸附研究报道较多，其中大部分应用于液相色谱，在线特异性吸附柱采用直接与进样装置联接，通过两个六通阀组件的切换，实现毛细管柱的在线连续进样、富集和洗脱分析；应用化学键合的方法将其涂覆于石英毛细管电泳柱内壁,文献报道了一种新型的毛细管电泳涂层柱，采用超支化聚合醚涂层修饰毛细管，在线特异性吸附有机磷农药，主要应用与毛细管电泳在线富集分析，但不具备特异性。目前，毛细管柱普遍直接安装于六通阀结构上，在线特异性吸附柱长度受限于六通阀装置结构的限制，富集柱长度较大，对整体柱的聚合度、渗透性要求较高，富集洗脱时间较长。也有报道用于毛细管柱固载的装置，该装置采用聚醚醚酮peek材料一体成型，固载的毛细管柱长度为2厘米，可以用于微柱hplc的在线特异性吸附，但是长度和直径是固定的，无法根据实际需要进行灵活的变换或更新。

目前，随着毛细管微分离技术的发展，微柱在线特异性吸附需求也日益剧增。现有用于毛细管柱固载的装置结构固化，难以根据实际需要而进行调整，给实际分析应用过程中的微柱在柱富集操作带来诸多不便，亟需研发简便实用的用于毛细管柱在线特异性吸附的装置。

技术实现要素：

本实用新型的目的在于提供一种用于毛细管亲和整体柱在线特异性吸附的装置，该装置可以较为灵活地分别与第一维色谱的进样、富集、洗脱和第二维色谱的进样流程相衔接。

本实用新型的技术方案在于：一种用于毛细管亲和整体柱在线特异性吸附的装置，包括设置于毛细管亲和整体柱上的固定组件，所述固定组件的进样端设置有用于与第一维色谱的采样管出口端联接的样品进样联接部件，固定组件的出口端设置有用于与第二维色谱采样组件进样端相连接的洗脱液导出联接组件。

进一步地，所述固定组件包括套置于毛细管亲和整体柱上的保护套管，所述保护套管的两端分别连接有固定管，所述固定管的另一端分别设置有固定管锥形螺丝，所述固定管和固定管锥形螺丝套置于毛细管亲和整体柱上。

进一步地，所述样品进样联接部件包括用于与第一维色谱的采样管出口端联接的进样端锥形螺丝，所述进样端锥形螺丝内设置有毛细管套管，所述毛细管套管的另一端伸入进样端侧的固定管锥形螺丝与固定管内并套置于毛细管亲和整体柱上。

进一步地，所述洗脱液导出联接组件包括用于与第二维色谱采样管进口端联接的出口端锥形螺丝，所述出口端锥形螺丝内设置有毛细管套管，所述毛细管套管的另一端伸入出口端侧的固定管锥形螺丝与固定管内并套置于毛细管亲和整体柱上。

进一步地，所述保护套管的两端分别与固定管相螺接，所述固定管与固定管锥形螺丝螺纹连接。

进一步地，所述保护套管的两端分别设置有与固定管的螺纹相配合的透明聚合塑料管，所述固定管的一端内部设置有与固定管锥形螺丝相配合的螺纹，固定管的另一端设置有与保护套管相匹配螺纹的peek管，固定管的中心设有用于与peek管相配合的微通道。

进一步地，所述毛细管亲和整体柱的外径尺寸为365微米，所述毛细管套管为聚醚醚酮peek管，管外径尺寸为1/16英寸、内径尺寸为500微米。

进一步地，所述进样端锥形螺丝、固定管锥形螺丝分别为液相色谱通用的1/16英寸peek接头。

进一步地，所述出口端锥形螺丝为液相色谱通用的1/16英寸peek接头。

与现有技术相比较，本实用新型具有以下优点：该装置通过进样联接部件和洗脱液导出联接组件，可以较为灵活地分别与第一维色谱的进样、富集、洗脱和第二维色谱的进样流程相衔接；毛细管亲和整体柱固定组件的锥形螺丝及其固定管尺寸与毛细管亲和整体柱匹配，可以在高压下紧密固定毛细管亲和整体柱；保护套管的两端可以通过螺纹分别与两边的固定管联接，且嵌入深度可可以根据毛细管亲和整体柱长度进行调节，操作简单，避免了常规毛细管柱在线特异性吸附装置因为固定槽长度固定化而导致无法采用与固定管长度不一致的毛细管柱的问题，应用性更好。

附图说明

图1为本实用新型的结构示意图；

图中：1-进样端锥形螺丝；2-毛细管套管；3-固定管锥形螺丝；4-固定管；5-保护套管；6-毛细管亲和整体柱；7-固定管；8-固定管锥形螺丝；9-毛细管套管；10-出口端锥形螺丝。

具体实施方式

为让本实用新型的上述特征和优点能更明显易懂，下文特举实施例，并配合附图，作详细说明如下，但本实用新型并不限于此。

参考图1

一种用于毛细管亲和整体柱在线特异性吸附的装置，包括设置于毛细管亲和整体柱6上的固定组件，所述固定组件的进样端设置有用于与第一维色谱的采样管出口端联接的样品进样联接部件，固定组件的出口端设置有用于与第二维色谱采样组件进样端相连接的洗脱液导出联接组件。

本实施例中，所述固定组件包括套置于毛细管亲和整体柱上的保护套管5，所述保护套管的两端分别连接有固定管4、7，所述固定管的另一端分别设置有固定管锥形螺丝3、8，固定管锥形螺丝的锥面朝向固定管，所述固定管和固定管锥形螺丝套置于毛细管亲和整体柱上。固定管锥形螺丝3、8及固定管4、7的尺寸与毛细管亲和整体柱匹配，以便在高压下紧密固定毛细管亲和整体柱。

本实施例中，所述样品进样联接部件包括用于与第一维色谱的采样管出口端联接的进样端锥形螺丝1，所述进样端锥形螺丝的锥面朝外，进样端锥形螺丝内设置有毛细管套管2，所述毛细管套管的另一端伸入进样端侧的固定管锥形螺丝3与固定管4内并套置于毛细管亲和整体柱上。所述毛细管管套2的长度可以根据装置的大小灵活变换。

本实施例中，所述洗脱液导出联接组件包括用于与第二维色谱采样管进口端联接的出口端锥形螺丝10，所述出口端锥形螺丝的锥面朝外，出口端锥形螺丝内设置有毛细管套管9，所述毛细管套管的另一端伸入出口端侧的固定管锥形螺丝8与固定管7内并套置于毛细管亲和整体柱上。所述毛细管管套9的长度可以根据装置的大小灵活变换。

本实施例中，所述保护套管的两端分别与固定管相螺接，嵌入深度可进行调整，以便保护毛细管亲和整体柱。所述固定管与固定管锥形螺丝螺纹连接。

本实施例中，所述保护套管的两端分别设置有与固定管的螺纹相配合的透明聚合塑料管，所述保护套管可以通过旋转嵌入固定管，毛细管亲和整体柱从保护套管中穿过，其嵌入深度可以根据亲和整体柱的长度进行调整，避免了固定尺寸对毛细管柱的限制和毛细管直接暴露而容易受损的问题。

本实施例中，所述固定管的一端内部设置有与固定管锥形螺丝相配合的螺纹，固定管的另一端设置有与保护套管相匹配螺纹的peek管，固定管的中心设有用于与进样和洗脱液导出的peek管相配合的微通道，以便用于锁住固定毛细管亲和整体柱。

本实施例中，所述毛细管亲和整体柱的外径尺寸为365微米，所述毛细管套管为聚醚醚酮peek管，管外径尺寸为1/16英寸、内径尺寸为500微米。可以耐有机试剂和酸碱试剂腐蚀，可以耐受液相色谱流动相的高压。

本实施例中，所述进样端锥形螺丝、出口端锥形螺丝、固定管锥形螺丝分别为液相色谱通用的1/16英寸peek接头。

为了描述毛细管亲和整体柱在线特异性吸附目标物，实验选择以赭曲霉毒素a（ota）作为模型化合物，以多面体低聚倍半硅氧烷（poss-ma）、乙二醇二甲基丙烯酸（edma）和核酸适配体（apt）聚合形成的亲和整体柱进行实验，具体包括以下步骤：

（1）配制tris-hcl结合缓冲液；

（2）将毛细管亲和整体柱装入所述的在线特异性吸附装置，两端锥形螺丝分别安装在第一维的六通阀样品管输出位置、第二维的六通阀样品管进样位置；

（3）将配制好的tris-hcl结合缓冲液通入亲和整体柱平衡30min；

（4）取100μl结合缓冲液配制的ota标准溶液装入定量环；

（5）切换六通阀，以结合缓冲液作为流动相，将ota溶液在室温下通过液相泵通入亲和整体柱；

（6）采用结合缓冲液清洗亲和整体柱，除去未被特异性结合的目标物；

（7）以甲醇作为洗脱液，将目标物从亲和整体柱上洗脱下来，洗脱液进入第二维色谱的采样环，体积为20μl；

（8）切换第二维色谱的六通阀，将洗脱液注入液相色谱仪器，在等度模式下进行色谱分离，流速为1.0ml/min，采用2%乙酸-水溶液/乙腈=38/62(v/v）为流动相进行分离检测。

上述缓冲液组分浓度为10mmol/ltris-hcl,120mmol/lnacl,5mmol/lkcl,20mmol/lcacl2,ph为8.50。

上述亲和整体柱在线负载的条件，泵流速为0.02ml/min，反压阀为250psi。

上述亲和整体柱在线清洗的条件，泵流速为0.1ml/min，反压阀为500psi。

上述亲和整体柱在线洗脱的条件，泵流速0.02ml/min，反压阀为250psi。

上述用于在线分离的液相色谱所用分离柱为c18柱，填料尺寸5μm,柱尺寸为4.6mmi.d.×250mm。

以上所述仅为本实用新型的较佳实施例，凡依本实用新型申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本实用新型的涵盖范围。