调制器的制作方法

1.本发明涉及液相色谱分离系统技术领域，特别涉及调制器。


背景技术：

2.商用的二维液相色谱系统多采用一维、二维、检测器及切换阀联合控制的方案，系统集成度高，这样可以保证调制过程的协调控制以及数据采集的一体化，但是这种一体化的设计也使得二维液相色谱系统的造价昂贵，此外也至使只能专机专用，不能通过组合不同厂家的现有设备实现二维色谱构建，难以为普通使用者所能承担。


技术实现要素：

3.基于此，有必要针对传统二维色谱系统昂贵价格的问题，提供一种可以利用现有色谱设备、便于移植且可降低二维色谱系统造价的调制器。
4.本技术实施例提供一种调制器，用以与常规液相色谱系统连接而实现二维色谱构建，包括：
5.第一两位多通阀，具有第一端口、第二端口和第三端口，所述第一端口用以接收来自所述常规液相色谱系统的样品馏分，所述第二端口用以与所述常规液相色谱系统的检测器连通；所述第一两位多通阀具有第一状态和第二状态，在所述第一状态，所述第一端口与所述第二端口连通，在所述第二状态，所述所述第一端口与所述第三端口连通，以致所述样品馏分从所述第一端口流至所述第三端口；
6.收集器，用以收集来自所述第三端口的所述样品馏分；
7.第二维色谱柱，用以对来自所述收集器的样品馏分进行分离；
8.第二维梯度泵，用以向所述第二维色谱柱注入第二维流动相；以及
9.调制控制器，用以分别控制所述第一两位多通阀以及所述第二维梯度泵。
10.上述调制器的入口端和出口端分别与常规液相色谱系统连接，即可构成二维液相色谱系统。由于可以通过独立的调制控制器独立控制上述调制器进行采样、进样以及第二维液相色谱分离，从而上述调制器与各种厂家或各种品牌的常规液相色谱系统进行组合时不存在技术壁垒，如此，可充分利用常规液相色谱系统的检测、数据采集和分析功能，无需独立配置，与常规分析实验室大量配置的的常规液相色谱系统组合构建二维液相色谱系统，由于结合了大量现有的常规液相色谱系统和较低成本的调制器，因而能大大的降低二维液相的成本并提高了其使用灵活性，方便二维液相色谱系统的推广应用。
11.在一实施例中，所述第一两位多通阀与所述第二维色谱柱之间设有两个所述收集器，其中一个所述收集器与所述第三端口连通，用以收集来自所述第三端口的所述样品馏分，另一个所述收集器与所述第二维色谱柱连通，用以向所述第二维色谱柱转入所述样品馏分；其中，两个所述收集器交替地收集来自所述第三端口的所述样品馏分，且交替地向所述第二维色谱柱转入所述样品馏分。
12.在一实施例中，所述的调制器还包括由所述调制控制器控制的切换阀，所述收集
器与所述切换阀连通；所述切换阀能够切换状态，以致两个所述收集器交替地收集来自所述第三端口的所述样品馏分，且交替地向所述第二维色谱柱转入所述样品馏分。
13.在一实施例中，所述第一两位多通阀与所述第二维色谱柱之间设有多个所述收集器，多个所述收集器依次交替地与所述第三端口连通，用以依次交替地收集来自所述第三端口的多种所述样品馏分，其中，所述收集器与所述样品馏分一一对应；多个所述收集器分别完成收集对应的所述样品馏分后，多个所述收集器依次交替地与所述第二维色谱柱连通，用于依次交替地向所述第二维色谱柱转入多种所述样品馏分。
14.在一实施例中，所述的调制还包括由所述调制控制器控制的切换阀，所述收集器与所述切换阀连通；所述切换阀能够切换状态，以致多个所述收集器依次交替地收集来自所述第三端口的所述样品馏分或依次交替地向所述第二维色谱柱转入多种所述样品馏分所述切换阀能够切换状态。
15.在一实施例中，所述切换阀为两位八通阀或两位十通阀或两个相连接的两位六通阀；或
16.所述切换阀由一个两位十通阀、分别与所述两位十通阀相连接的两个两位六通阀以及与所述两位十通阀连接的一个两位四通阀构成。
17.在一实施例中，所述的调制器还包括由所述调制控制器控制的稀释泵，所述稀释泵与所述收集器连通于所述第三端口的一端连通，以致所述稀释泵泵出的稀释溶剂与来自所述第三端口的所述样品馏分汇合后进入所述收集器。
18.在一实施例中，所述的调制器由所述调制控制器控制的第二维进样器，所述第二维进样器与所述收集器的一端连通，用以向所述收集器内注入驱动流动相，所述收集器的另一端与所述第二维色谱柱连通，以将所述驱动流动相和所述样品馏分转入所述第二维色谱柱；所述第二维梯度泵与所述第二维色谱柱的连通于所述收集器的一端连通。
19.在一实施例中，所述第一两位多通阀为两位三通阀或两位六通阀。
20.在一实施例中，所述收集器为定量环或捕集柱。
附图说明
21.图1为第一实施例的调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
22.图2为图1中的第一两位六通阀处于第二状态，切换阀处于第一状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
23.图3为图1中的第一两位六通阀处于第二状态，切换阀处于第二状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
24.图4为第二实施例的切换阀处于第一状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
25.图5为图4中的切换阀处于第二状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
26.图6为第三实施例的切换阀处于第一状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
27.图7为图6中的切换阀处于第二状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
28.图8为第四实施例的切换阀处于第一状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
29.图9为图8中的切换阀处于第二状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
30.图10为图8中的切换阀处于第三状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
31.图11为图8中的切换阀处于第四状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
32.图12为图8中的切换阀处于第五状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
33.图13为图8中的切换阀处于第六状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
34.图14为图8中的切换阀处于第七状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
35.图15为图8中的切换阀处于第八状态时调制器与常规液相色谱系统的连接关系示意图；
36.图16为图8中的调制器与常规液相色谱系统构成全二维液相色谱分离系统时的一种状态的示意图；
37.图17为图16中调制器与常规液相色谱系统构成全二维液相色谱分离系统时的另一种状态的示意图。
具体实施方式
38.为了便于理解本发明，下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的优选实施方式。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施方式。相反的，提供这些实施方式的目的是为了对本发明的公开内容理解得更加透彻全面。
39.需要说明的是，当部被称为“固定于”另一个部，它可以直接在另一个部上也可以存在居中的部。当一个部被认为是“连接”到另一个部，它可以是直接连接到另一个部或者可能同时存在居中部。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的，并不表示是唯一的实施方式。
40.除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中使用的术语只是为了描述具体的实施方式的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
41.请参考图1，本技术第一实施例提供一种调制器100。调制器100用以与常规液相色谱系统10连接以进行组合使用。调制器100包括第一两位多通阀110、收集器120、第二维色谱柱130、第二维梯度泵140以及调制控制器150。
42.常规液相色谱系统10用于进行第一维液相色谱分离。常规液相色谱系统10包括第一维控制器11、第一维梯度泵12、第一维进样器13、第一维色谱柱14以及第一维检测器15。
第一维控制器11分别控制第一维梯度泵12、第一维进样器13以及第一维检测器15。第一维梯度泵12将第一维流动相经过第一维进样器13输送至第一维色谱柱14，从而第一维色谱柱14内的待分离样品在第一维流动相的作用下分离，进而得到经第一维色谱柱14分离后的样品馏分。
43.第一两位多通阀110具有第一端口111、第二端口112以及第三端口113。第一端口111用以接收来自常规液相色谱系统10的样品馏分。第二端口112用以与常规液相色谱系统10的第一维检测器15连通。第一两位多通阀110具有第一状态和第二状态。请参考图1，在第一状态，第一端口111与第二端口112连通。请参考图2和图3，在第二状态，第一端口111与第三端口113连通。
44.具体地，在本实施例中，第一两位多通阀110为两位六通阀。可以理解的是，第一两位多通阀110还可以为两位三通阀等。常规液相色谱系统10与调制器100组合使用时，调制器100的入口与常规液相色谱系统10的出口连接，以致第一维色谱柱14的出口端与第一端口111连通，从而经过第一维色谱柱14分离的样品馏分可以进入第一端口111。
45.请参考图2和图3，第一两位多通阀110处于第二状态时，常规液相色谱系统10与调制器100联通组成二维液相色谱系统，第一维组分可以进入调制器进行第二维进行收集和分离。第三端口113与第一端口111连通，从而经第一维色谱柱14分离的样品馏分从第一端口111流入第三端口113。收集器120的一端与第三端口113连通，另一端与第二维色谱柱130连通，从而经第一维色谱柱14分离的样品馏分从第三端口113流入收集器120，再从收集器120转入到第二维色谱柱130。
46.第二维梯度泵140与第二维色谱柱130连通。第二维梯度泵140用以泵出与第一维流动相不同的第二维流动相，并将第二维流动相注入第二维色谱柱130，以对经第一维色谱柱14分离的样品馏分进行分离。第二维色谱柱130的出口端可连接至第一维检测器15的入口端，从而经第二维色谱柱130分离后的样品馏分可进入第一维检测器15进行检测。
47.在本实施例中，收集器120的一端与第二维梯度泵140连通，另一端与第二维色谱柱130连通，从而第二维梯度泵140的第二维流动相可以进入收集器120，进而第二维流动相与收集器120内的样品馏分混合后进入第二维色谱柱130。
48.可以理解的是，第一维梯度泵12内的第一维流动相和第二维梯度泵140内的第二维流动相均是具有浓度梯度的，对应的洗脱程序为梯度洗脱。
49.调制控制器150可以是工控机(ipc)、plc控制器、单片机等。调制控制器150用以分别控制第一两位多通阀110在第一状态和第二状态之间切换以及第二维梯度泵140的工作状态。
50.具体地，常规液相系统10中的第一维控制器11启动时触发调制控制器150的启动，以便调制控制器150对第二维梯度泵140进行控制。调制控制器150可以控制第二维梯度泵140的启动和停止。调制控制器150还可以控制第二维梯度泵140泵出的第二维流动相的流速。调制控制器150可以控制第一两位多通阀110在在第一状态和第二状态之间切换。
51.可以理解的是，在其他实施例中，还可以通过手动操作的方式单独启动调制控制器150。
52.请参考图1，第一两位多通阀110切换至第一状态时，第一端口111与第二端口112连通，常规液相色谱系统10构成一维液相色谱系统。经第一维色谱柱14分离的样品馏分从
第一端口111经第二端口112直接进入第一维检测器15进行检测。
53.上述的调制器100，与常规液相色谱系统10可以组合使用。第一两位多通阀110处于第二状态时，可通过收集器120收集经第一维色谱柱14分离的样品馏分，再将收集器120收集的样品馏分转入到第二维色谱柱130。第二维梯度泵140泵出的第二维流动相注入第二维色谱柱130，用以对样品馏分进行分离。经第二维色谱柱130分离的样品馏分可进入第一维检测器15进行检测。第一两位多通阀110切换至第一状态时，也可以仅使用常规液相色谱系统10作为一维液相色谱系统进行第一维分离。通过控制第一两位多通阀110的状态切换，能够选择进行一维液相色谱分离或二维液相色谱分离。
54.上述调制器100的入口端和出口端分别与常规液相色谱系统10连接，即可构成二维液相色谱系统。由于可以通过调制控制器150独立控制上述调制器100进行采样、进样以及第二维液相色谱分离，从而上述调制器100与各种厂家或各种品牌的常规液相色谱系统10进行组合时不存在技术壁垒，进而上述调制器100与各种厂家或各种品牌的常规液相色谱系统10组合均可以构成二维液相色谱系统，方便推广二维液相色谱系统。通过成本较低的调制器100和常规实验室大量配置的常规液相色谱系统10的组合，从而通过较低的投资即可获得二维液相色谱系统。
55.请参考图2和图3，在一实施例中，第一两位多通阀110与第二维色谱柱130之间设有两个收集器120。其中一个收集器120与第三端口113连通，用以收集来自第三端口113的样品馏分，另一个收集器120与第二维色谱柱130连通，用以向第二维色谱柱130转入样品馏分。其中，两个收集器120中交替地收集来自第三端口113的样品馏分，且交替地向第二维色谱柱130转入样品馏分。
56.在本实施例中，调制器100还包括由调制控制器150控制的切换阀160。收集器120与切换阀160连通。切换阀160能够切换状态，以致收集器120交替地收集来自第三端口113的样品馏分和向第二维色谱柱130转入样品馏分。
57.具体地，如图2和图3所示，切换阀160为两位十通阀。可以理解，切换阀160还可以为两位八通阀。第一两位多通阀110与第二维色谱柱130之间设有的两个收集器120分别为第一收集器和第二收集器。收集器120收集样品馏分的过程称为采样。收集器120向第二维色谱柱130转入样品馏分的过程称为进样。切换阀160具有第一状态和第二状态。
58.在切换阀160处于第一状态时，第一收集器采样，第二收集器120进样。具体地，切换阀160在第一状态时，第一收集器与第三端口113连通，从而经第一维色谱柱14分离的样品馏分从第三端口113进入第一收集器，以致被第一收集器收集；第二收集器一端与第二维梯度泵140连通，另一端与第二维色谱柱130连通，从而第二维梯度泵140泵出的第二维流动相进入第二收集器，与第二收集器内的样品馏分共同进入第二维色谱柱130，以进行第二维分离。
59.在切换阀160处于第二状态时，第一收集器进样，第二收集器120采样。具体地，切换阀160在第二状态时，第二收集器120与第三端口113连通，从而经第一维色谱柱14分离的样品馏分从第三端口113进入第二收集器120，以致被第二收集器120收集；第一收集器一端与第二维梯度泵140连通，另一端与第二维色谱柱130连通，从而第二维梯度泵140泵出的第二维流动相进入第一收集器，与第一收集器内的样品馏分共同进入第二维色谱柱130，以进行第二维分离。
60.调制器100工作时，收集器120的采样时序与进样时序精密匹配，从而通过两个收集器120同时工作并交替地进行采样和进样，可以同时进行第二维分离前的进样和采样，进而能够提高第二维分离的效率。
61.通过调制控制器150控制切换阀160切换状态的时刻，使得切换阀160的切换状态的时序与收集器120的采样时序和进样时序相匹配，从而切换阀160可以通过切换状态而实现两个收集器120同时工作且交替地进行采样和进样，进而可以同时进行第二维分离前的进样和采样，以致提高第二维分离的效率。
62.由于调制控制器150可独立地对切换阀与第二维梯度泵140进行程序控制，使得收集器120的采样时间、进样时间以及样品的第二维梯度循环分离时间高度同步，从而可以实现每个调制周期中采样时间、进样时间以及第二维梯度循环分离时间之间高度同步，进而上述调制器100与各种厂家或各种品牌的常规液相色谱系统10进行组合时不存在技术壁垒。通过成本较低的调制器100和常规实验室大量配置的常规液相色谱系统10的组合，从而通过较低的投资即可获得二维液相色谱系统，方便推广二维液相色谱系统。
63.在一实施例中，收集器120为定量环或捕集柱。具体在本实施例中，收集器120为反向捕集柱。
64.请参考图2和图3，在一实施例中，收集器120为反相捕集柱。调制器100还包括由调制控制器150控制的稀释泵170。稀释泵170与收集器120连通于第三端口113的一端连通，以致稀释泵170泵出的稀释溶剂与来自第三端口113的样品馏分汇合后进入收集器120。
65.具体地，经第一维色谱柱14分离的样品馏分经第三端口113进入收集器120。稀释泵170泵出的稀释溶剂进入收集器120。在进入收集器120之前，经第一维色谱柱14分离的样品馏分和稀释液先在管路汇合，然后一起进入收集器120。
66.当构建反向色谱与亲水色谱的二维系统时，第一维流动相为富水流动相，稀释泵170泵出的稀释溶剂为高水相，经第一维色谱柱14分离的样品馏分经过稀释溶剂的稀释，含水量提高。由于收集器120为反相捕集柱，从而待进入反相捕集柱的样品的含水量提高，有机相降低，进而样品馏分中的目标分析物能够更高效地被反相捕集柱捕集。
67.请参考图4和图5，本技术第二实施例提供一种调制器200。第二实施例的调制器200的结构与第一实施例的调制器100的结构基本一致，在此不再赘述。下面重点介绍第二实施例的调制器200与第一实施例的调制器200的不同之处。
68.调制器200还包括由调制控制器250控制的第二维进样器280。第二维进样器280与收集器220的一端连通，用以向收集器220内注入驱动流动相。收集器220的另一端与第二维色谱柱230连通。第二维梯度泵240与第二维色谱柱230的连通于收集器220的一端连通，以向第二维色谱柱230注入第二维流动相。
69.具体地，收集器220的一端与第二维进样器280连通，另一端与第二维色谱柱230连通。第二维进样器280泵出的驱动流动相驱动收集器220内的样品馏分流向第二维色谱柱230。第二维梯度泵240泵出的第二维流动相流向第二维色谱柱230。样品馏分在驱动流动相的驱动下与第二维流动相汇合，并在第二维色谱柱230内进行分离。
70.由于收集器220中的样品馏分带有第一维流动相，因此转入第二维色谱柱230进行分离时会存在第一维流动相和第二维流动相两种流动相不兼容导致色谱峰展宽的问题。而本实施例将第二维梯度泵240设置在收集器220下游，使得第二维流动相的洗脱流路不再流
经收集器220。第二维流动相和收集器220中转移的样品馏分在进入第二维色谱柱230之前先汇合，实现在线混合稀释，然后再进入第二维色谱柱230进行分离。由于可以通过调制控制器250控制第二维梯度泵240，则可以通过第二维梯度泵240控制第二维流动相的流速，因此收集器220转移的样品馏分在进入第二维色谱柱230之前可以被第二维流动相可控稀释，从而有利于其在进入第二维色谱柱230进行分离时实现柱头聚焦，从而抑制第二维分离过程中的峰展宽问题。
71.进一步地，通过调制控制器250控制第二维进样器280和第二维梯度泵240，可以简单通过改变第二维进样器280的流速和第二维梯度泵240的流速实现转移馏分的稀释倍数的大范围精确调节，且无需更换分流组件，更便于实际操作，进一步提升了分离效果。
72.在一实施例中，调制器200还包括混合器(未示出)。混合器分别与第二维色谱柱230和收集器220连通。混合器与第二维梯度泵240连通。混合器用以将第二维流动相和来自收集器220的样品馏分混合。
73.样品馏分进入第二维色谱柱230之前，在驱动流动相的驱动下进入混合器，第二维梯度泵240泵出的第二维流动相进入混合器，从而样品馏分与第二维流动相在混合器内混合，可以使第二维流动相更好地可控稀释，从而有利于第二维流动相在进入第二维色谱柱230进行分离时实现柱头聚焦，进而可以更好地抑制第二维分离过程中的峰展宽的问题。
74.可以理解是，在其他实施例中，也可以不设置混合器，样品馏分与第二维流动相直接在第二维色谱柱230之前的管路混合或第二维色谱柱230内在线混合稀释即可。
75.请参考图6和图7，第三实施例提供一种调制器300。第三实施例的调制器300的结构与第二实施例的调制器200结构基本一致，在此不再赘述。下面重点介绍第三实施例的调制器300与第二实施例的调制器200的不同之处。
76.切换阀为相连接的两个两位六通阀。第一收集器321与一个两位六通阀361连通。第二收集器322与另一个两位六通阀362连通。两个两位六通阀均能够切换状态。通过同时切换两个两位六通阀的状态，可以使切换阀在第一状态和第二状态之间转换，从而可以实现两个收集器交替地收集来自第三端口313的样品馏分，同时交替地向第二维色谱柱330转入样品馏分。
77.请参考图8～图15，第四实施例提供一种调制器400。第四实施例的调制器400的结构与第一、二、三实施例的结构基本一致，在此不再赘述。下面重点介绍第四实施例的调制器400与第一、二、三实施例实施例的调制器的不同之处。
78.第一两位多通阀410与第二维色谱柱430之间设有多个收集器。多个收集器依次交替地与第三端口413连通，用以依次交替地收集来自第三端口413的多种样品馏分，其中，收集器与样品馏分一一对应。多个收集器分别完成收集对应的样品馏分后，多个收集器依次交替地与第二维色谱柱430连通，用于依次交替地向第二维色谱柱430转入多种样品馏分。
79.多个收集器与切换阀连通。切换阀能够切换状态，以致多个收集器依次交替地收集来自第三端口413的样品馏分或依次交替地向第二维色谱柱430转入多种样品馏分。
80.具体地，第一维色谱柱44将待分离样品按照极性变化依次分离，从而经第一维色谱柱44分离的样品馏分按照极性变化依次分离出多种馏分。在进行中心切割二维分离时，每个收集器收集一种馏分。本实施例以四种馏分为例，经第一维色谱柱44分离依次分离出第一馏分、第二馏分、第三馏分以及第四馏分。收集器的数量为四个，分别为第一收集器
421、第二收集器422、第三收集器423以及第四收集器424。
81.在本实施例中，切换阀由一个两位十通阀461、分别与两位十通阀461相连接的两个两位六通阀以及与两位十通阀461连接的一个两位四通阀462构成。两个两位六通阀分别为第一两位六通阀463和第二两位六通阀464。
82.第一收集器421和第二收集器422与第一两位六通阀463连通。第三收集器423和第四收集器424与第二两位六通阀464连通。第一两位六通阀463和第二两位六通阀464分别与两位十通阀461连通。第一两位六通阀463能够切换状态，以致第一收集器421或第二收集器422中的一个选择地与两位十通阀461连通。第二两位六通阀464能够切换状态，以致第三收集器423或第四收集器424中的一个选择地与两位十通阀461连通。
83.两位十通阀461与第一两位多通阀410的第三端口413连通，以致经第一维色谱柱44分离的样品馏分经过第三端口413进入两位十通阀461，从而样品馏分可以通过两位十通阀461和两个两位六通阀依次交替地进入各个收集器以进行采样。
84.两位四通阀462分别与两位十通阀461、第二维进样器480以及第二维色谱柱430连接。两位四通阀462能够切换状态，以致第二维进样器480与两位十通阀461连通或断开，第二维色谱柱430与两位十通阀461连通或断开。第二维进样器480与第二维色谱柱430分别与两位十通阀461连通时，第二维进样器480和第二维色谱柱430可以依次交替地与各个收集器连通，从而可以依次交替地对各个收集器进行进样，以对各个收集器转移至第二维色谱柱430的样品馏分进行第二维分离。
85.每种馏分从第一维色谱柱44分离出来的时间与对应的收集器的采样时间相匹配。切换阀切换状态的时间与收集器的采样时间相匹配。在本实施例中，切换阀具有至少八种状态。请参考图8至图11，切换阀在第一状态、第二状态、第三状态、第四状态之间依次交替切换时，第一馏分、第二馏分、第三馏分以及第四馏分依次交替从第一维色谱柱44分离出来，第一收集器421、第二收集器422、第三收集器423、第四收集器424依次采样。具体地，第二维进样器480与第二维色谱柱430分别与两位十通阀461断开，此时各个收集器不能进行进样。第三端口413通过十通阀和两个六通阀依次交替与第一收集器421、第二收集器422、第三收集器423、第四收集器424连通，第一馏分、第二馏分、第三馏分以及第四馏分依次交替从第一维色谱柱44分离出来，从而第一馏分完全收集到第一收集器421，第二馏分完全收集到第二收集器422，第三馏分完全收集到第三收集器423，第四馏分完全收集到第四收集器424。
86.多个收集器完成采样之后，进行进样。切换阀切换状态的时间与收集器的进样时间相匹配。请参考图12至图15，在本实施例中，在切换阀依次在第五状态、第六状态、第七状态、第八状态之间依次切换时，第一收集器421、第二收集器422、第三收集器423、第四收集器424依次交替进样，第一馏分、第二馏分、第三馏分以及第四馏分依次注入到第二维色谱柱430进行分离。具体地，第一维色谱柱44停止分离样品，各个收集器不能进行采样。第二维进样器480和第二维色谱柱430通过两位四通阀462分别与两位十通阀461连通。通过两位十通阀461和两个两位六通阀切换状态，第二维进样器480与第二维色谱柱430依次交替与第一收集器421、第二收集器422、第三收集器423、第四收集器424连通，从而第一收集器421、第二收集器422、第三收集器423、第四收集器424依次进样，第一馏分、第二馏分、第三馏分以及第四馏分依次从对应的收集器内流出，并依次注入到第二维色谱柱430内进行分离，进
而实现中心切割二维色谱分离。
87.可以理解的是，收集器的数量还可以为其他数量，可以进行该其他数量种馏分的中心切割二维色谱分离。
88.在一实施例中，调制器400与常规液相色谱系统40组合时，还可以进行全二维液相色谱分离。示例性地，请参考图16和图17，可以通过切换阀切换状态，使第二收集器422和第四收集器424中的一个与第三端口413连通，另一个与第二维进样泵连通。第二收集器422和第四收集器424同时工作，二者交替地与第三端口413连通且交替地与第二维进样泵连通，从而可以进行全二维液相色谱分离。
89.以上实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
90.以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。