诊断或监测肾功能或者诊断肾功能异常的方法
【专利说明】诊断或监测肾功能或者诊断肾功能异常的方法
[0001] 本发明的主题为方法，其被用于（a)诊断或监测对象的肾功能，或（b)诊断对象的 肾功能异常，或（c)预测或监测患病对象中的不良事件的风险，其中所述不良事件选自包 含以下的组：包括肾衰竭、肾功能丧失和终末期肾病在内的肾功能异常的恶化，或由包括肾 衰竭、肾功能丧失和终末期肾病在内的肾功能异常导致的死亡，或（d)预测或监测治疗或 干预的成功，所述方法包括：
[0002] ?测定获自所述对象的体液中的脑啡肽原（PEN)或其具有至少5个氨基酸的片段 的水平；以及
[0003] (a)将所述脑啡肽原或其片段的水平与对象的肾功能相关联，或
[0004] (b)将所述脑啡肽原或其片段的水平与肾功能异常相关联，其中升高的大于某个 阈值的水平预测或诊断所述对象的肾功能异常，或
[0005] (C)将所述脑啡肽原或其片段的水平与所述患病对象中的不良事件的风险相关 联，其中升高的大于某个阈值的水平预测所述不良事件的风险增加，或
[0006] (d)将所述脑啡肽原或其片段的水平与患病对象的治疗或干预的成功相关联，其 中低于某个阈值的水平预测治疗或干预的成功。
[0007] Met-脑啡肽为来源于脑啡肽前体（前脑啡肽原）的具有5个氨基酸的肽，也称为 "阿片生长因子" (OGF)，其与脑啡肽原片段一起释放。成熟肽结合不同的阿片受体（Koneru et al，2009)。已发现脑啡肽（OGF)具有多种生理功能。在CNS中，其下调P物质相关的疼 痛信号，作为细胞因子起作用（Plotnikoff et al，1997)。脑啡肽原相关的肽展现抗菌作用 (Goumon et al, 1998)。脑啡肽原和脑啡肽展现抗肿瘤作用，并用作促细胞凋亡剂（Tavish et al, 2007, Donahue et al, 2011，Zagon et al, 2009)。据报道，肾功能异常中脑啡肽升高 (Smith et al, 1985, Zoccali et al·，1987, Smith et al, 1981)。脑啡肽产生为较大的脑 啡肽原，并通过蛋白水解转化为成熟五肽。在成熟过程中，生成了多种脑啡肽原片段，其与 脑啡肽一起释放（Ernst et al.，2006)。
[0008] 本发明的主题为脑啡肽原（PENK)或其片段作为肾功能和肾功能异常的标志物的 用途，以及其在健康和患病对象中的临床应用。本发明的主题为用于诊断或监测对象的肾 功能或者诊断对象的肾功能异常或预测患病对象的死亡或不良事件的风险的方法。
[0009] 本发明的主题还为提供PENK或其片段对诊断患病对象的肾功能、肾功能异常的 预后和诊断力以及预后价值。
[0010] 令人吃惊地，显示出PENK或片段为用于肾、其功能、功能异常、死亡或不良事件的 风险以及预后和监测治疗或干预的成功的有力和高度显著的生物标记。
[0011] 本发明的主题为方法，其被用于（a)诊断或监测对象的肾功能，或（b)诊断对象的 肾功能异常，或（c)预测或监测患病对象中的不良事件的风险，其中所述不良事件选自包 含以下的组：包括肾衰竭、肾功能丧失和终末期肾病在内的肾功能异常的恶化，或由包括肾 衰竭、肾功能丧失和终末期肾病在内的肾功能异常导致的死亡，或（d)预测或监测治疗或 干预的成功，所述方法包括：
[0012] ?测定获自所述对象的体液中的脑啡肽原（PENK)或其具有至少5个氨基酸长的片 段的水平；以及
[0013] (a)将所述脑啡肽原或其片段的水平与对象的肾功能相关联，或
[0014] (b)将所述脑啡肽原或其片段的水平与肾功能异常相关联，其中升高的大于某个 阈值的水平预测或诊断所述对象的肾功能异常，或
[0015] (C)将所述脑啡肽原或其片段的水平与所述患病对象中的不良事件的风险相关 联，其中升高的大于某个阈值的水平预测所述不良事件的风险增加，或
[0016] (d)将所述脑啡肽原或其片段的水平与患病对象治疗或干预的成功相关联，其中 小于某个阈值的水平预测治疗或干预的成功。
[0017] 根据本发明，在一个具体的实施方案中，所述脑啡肽原或其片段不为Ieu-脑啡 肽，且不为met-脑啡肽。在另一具体的实施方案中，所述脑啡肽原片段为MR-脑啡肽原 (MRPENK)或其具有至少5个氨基酸的片段。
[0018] 换句话说：本发明的主题为方法，其被用于：(a)诊断或监测对象的肾功能，或（b) 诊断对象的肾功能异常，或（c)预测或监测患病对象中的不良事件的风险，其中所述不良 事件选自包含以下的组：包括肾衰竭、肾功能丧失和终末期肾病在内的肾功能异常的恶化， 或由包括肾衰竭、肾功能丧失和终末期肾病在内的肾功能异常导致的死亡，或（d)预测或 监测治疗或干预的成功，所述方法包括：
[0019] ?通过使用与获自所述对象的体液中的脑啡肽原（PENK)的氨基酸序列中的区域 结合的至少一种结合剂来测定免疫反应性分析物的水平；以及
[0020] (a)将所述免疫反应性分析物的水平与对象的肾功能相关联，或
[0021] (b)将所述免疫反应性分析物的水平与肾功能异常相关联，其中升高的大于某个 阈值的水平预测或诊断所述对象的肾功能异常，或
[0022] (C)将所述免疫反应性分析物的水平与所述患病对象中的不良事件的风险相关 联，其中升高的大于某个阈值的水平预测所述不良事件的风险增加，或
[0023] (d)将所述免疫反应性分析物的水平与患病对象治疗或干预的成功相关联，其中 小于某个阈值的水平预测治疗或干预的成功。
[0024] 根据本发明，在具体的实施方案中，所述免疫反应性分析物不为Ieu-脑啡肽，并 且不为met-脑啡肽。在另一具体的实施方案中，所述免疫反应性分析物为MR-脑啡肽原 (MR ENK)或其具有至少5个氨基酸的片段。
[0025] 这意味着在将与体液中的脑啡肽原（PENK)的氨基酸序列中的区域结合的结合剂 用于本发明的方法的情况下，则术语"测定获自所述对象的体液中的脑啡肽原（PENK)或其 具有至少5个氨基酸的片段的水平"等价于"通过使用与获自所述对象的体液中的脑啡肽 原（PENK)的氨基酸序列中的区域结合的至少一种结合剂测定免疫反应性分析物的水平"。 在具体的实施方案中，在本发明的方法中使用了与体液中的脑啡肽原（PENK)的氨基酸序 列中的区域结合的结合剂。在具体的实施方案中，用于本发明的方法的所述结合剂不结合 体液中的Ieu-脑啡肽或met-脑啡肽的氨基酸序列中的区域。在本发明的另一具体的实 施方案中，所述至少一种结合剂结合MR-脑啡肽原（MRPENK)或其具有至少5个氨基酸的片 段。
[0026] 如本文所使用，术语"对象"是指活的人或非人的生物。优选地，在本文中，所述对 象为人对象。如果在其他地方没有叙述，对象可为健康的或患病的。在本发明的一个实施 方案中，所述对象未患中风。在另一实施方案中，所述对象不为急性中风患者。
[0027] 术语"升高的水平"是指大于某个阈值水平的水平。术语"升高的"水平可指大于 被当做参照水平的值的水平。
[0028] 预测或监测治疗或干预的成功可为，例如使用脑啡肽原（PENK)或其具有至少5个 氨基酸的片段的测量，来预测或监测肾脏替代疗法的成功。
[0029] 预测或监测治疗或干预的成功可为，例如使用脑啡肽原（PENK)或其具有至少5个 氨基酸的片段的测量，利用已接受肾脏替代疗法的患者中的透明质酸来预测或监测治疗的 成功。
[0030] 预测或监测治疗或干预的成功可为，例如使用PENK或其具有至少5个氨基酸的片 段的测量，预测或监测肾脏替代疗法和/或药物干预之前和之后肾功能受损患者的肾功能 恢复。
[0031] 体液可选自包含以下的组：血液、血清、血浆、尿液、脑脊液（csf)和唾液。
[0032] 脑啡肽原或其片段的测定显示对象的肾功能。增加的脑啡肽原或其片段的浓度指 示降低的肾功能。在随访测量中，脑啡肽原或其片段的相对改变与对象肾功能的改善（降 低的脑啡肽原或其片段）和恶化（增加的脑啡肽原或其片段）相关。
[0033] 脑啡肽原或其片段可用于诊断肾功能异常，其中升高的大于某个阈值的水平预测 或诊断所述对象中的肾功能异常。在随访测试中，脑啡肽原或其片段的相对改变与对象肾 功能异常的改善（降低的脑啡肽原或其片段）和恶化（增加的脑啡肽原或其片段）相关。
[0034] 脑啡肽原或其片段比用于肾功能/功能异常诊断和随访的其他标记（NGAL、血液 肌酸酐、肌酐清除率、胱抑素C、尿素）更优异。优异性是指更高的特异性、更高的灵敏度和 与临床终点的更好的相关性。
[0035] 将所述脑啡肽原或其片段的水平与患病对象的不良事件或死亡风险相关联，其中 升高的大于某个阈值的水平预测死亡或不良事件的风险增加。同样在该方面，脑啡肽原或 其片段优于上述临床标记。
[0036] 根据本发明的风险与如RIFLE标准（Venkatamaran and Kellum, 2006)所定义的 风险相关。
[0037] 病人可患有选自下述的疾病：对炎症的免疫反应引起的慢性肾衰竭、由减少的血 流引起的急性肾衰竭（其可与由创伤引起的极低血压一起发生）、创伤患者、手术、中风、急 性和慢性肾衰竭、SIRS患者、败血症、败血性休克、中风、急性心肌梗死和心肌梗死后、急性 和慢性心力衰竭、局部和系统性细菌和病毒感染、自身免疫性疾病、烧伤患者、癌症、肝病、 肺病、接受肾毒素如环孢霉素、抗生素（包括氨基糖苷类和抗癌药物如顺铂）的患者。
[0038] 支持或替代肾功能的治疗或干预可包括各种肾替代疗法的方法，包括但不限于： 血液透析、腹膜透析、血液滤过和肾移植。<