鸦胆子油乳注射液质量控制方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种鸦胆子油乳注射液质量控制方法。
【背景技术】
[0002] 鸦胆子油乳注射液质量标准收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十四册，标准 编号：WS3-B-2739-97,该标准含量测定采用滴定法测总酸量，方法落后，且不能真实反应鸦 胆子油的组成成份。
[0003] 还有很多文献报道采用气相色谱法测油酸或亚油酸的含量，但该方法首先专属性 不好，如鸦胆子油中85%为甘油三酯，油酸为其体内水解后转化而来，而且游离脂肪酸含量 较低，主要为结合形式的脂肪酸甘油酯；其次，气相色谱分析过程中，由于柱温很高，易使检 测成分油酸、亚油酸的双键断裂或产生双键的异构化现象，导致检测不准。
[0004] 最新文献报道的含量测定方法是采用HPLC-ELSD法测定甘油三酯的含量，如孔令 锋等采用HPLC-ELSD法测定鸦胆子油乳注射液中甘油三油酸酯的含量，但该方法只测定鸦 胆子油8种成分中的一种成分，且供试品的前处理较为繁琐，流动相溶解、超声、冷却、稀 释、过滤等步骤。田金苗等采用HPLC-ELSD法测定鸦胆子油中四种甘油三酯的含量，但该方 法测定的四种甘油三酯非鸦胆子油8种成分中含量最高的四种成分，含量测定代表性非最 佳，且供试品的前处理同样较为繁琐，流动相溶解、超声、冷却、稀释、过滤等步骤。
[0005] 在指纹图谱检测方面，郭辉等建立了鸦胆子油的HPLC-ELSD指纹图谱，但鸦胆子 油乳注射液的HPLC-ELSD指纹图谱尚无报道；制剂由于脂肪乳中乳化剂、渗透压调节剂等 对检测的干扰，其前处理方法不能直接套用鸦胆子油的前处理方法，需自行研宄摸索；而 且，流动相为三个溶剂组成，操作不便，混合易产生气泡等问题；同时，图中3号峰1，2_二亚 油酸-3-软脂酸甘油酯，8号峰1，2-二油酸-3-硬脂酸甘油酯峰面积比值过小，根据"中药 注射剂指纹图谱研宄的技术要求（暂行）"对各共有峰的峰面积大小及其相应的比值的规 定可知，峰面积比值如过小，相似度比较时会存在较大的误差。
【发明内容】
[0006] 为了解决现有技术对鸦胆子油乳注射液质量控制中存在的结果不准确，步骤繁琐 等问题，本发明实施例提供一种鸦胆子油乳注射液质量控制方法。
[0007] 本发明的一个方面，涉及一种鸦胆子油乳注射液质量控制方法，所述方法包括：
[0008] 以含1，2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1，2-二油酸-3-亚油酸甘油酯和甘油三油酸 酯的甲醇/二氯甲烷溶液作为参照物溶液I ;
[0009] 以含鸦胆子油的甲醇/二氯甲烷溶液作为参照物溶液II ;
[0010] 以含有鸦胆子油乳注射液的甲醇/二氯甲烷溶液作为供试品溶液；
[0011] 分别测定参照物溶液I、参照物溶液II和供试品溶液的液相图谱。
[0012] 具体来讲，所述方法包括：
[0013] 取每1ml含1，2-二亚油酸-3-油酸甘油酯0· 20mg、1，2-二油酸-3-亚油酸甘油酯 0. 50mg和甘油三油酸酯0. 66mg的，甲醇：二氯甲烷为I : 1的溶液，作为参照物溶液I ;
[0014] 取每1ml含Img鸦胆子油的，甲醇：二氯甲烷为I : 1的溶液作为参照物溶液II ;
[0015] 取含有鸦胆子油乳注射液的，甲醇：二氯甲烷为1 : 1的溶液作为供试品溶液；
[0016] 分别精密吸取参照物溶液I、参照物溶液II和供试品溶液各5 μ 1，注入液相色谱 仪，测定其图谱。
[0017] 更具体地，色谱条件为：
[0018] 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：二氯甲烷为60-70 : 40-30的乙腈 /二氯甲烷的混合溶液为流动相；流速为每分钟0. 3-0. 8ml ;柱温30-40°C;蒸发光散射检测 器；分析时间为40-130分钟。优选为，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：二氯甲 烷为65 : 35的乙腈/二氯甲烷的混合溶液为流动相；流速为每分钟0. 5ml ;柱温35°C ;蒸 发光散射检测器；分析时间为优选65分钟。
[0019] 更进一步地，上述鸦胆子油乳注射液质量控制方法，还包括与标准图谱比对的步 骤。所述标准图谱是通过如下方法测定的：
[0020] 选取若干批次鸦胆子油乳注射液，按照权利要求1-4任一项所述方法测定其液相 色谱，用色谱指纹图谱相似度评价系统，生成鸦胆子油乳注射液标准指纹图谱。
[0021] 又进一步地，上述鸦胆子油乳注射液质量控制方法，还包括成分含量测定的步骤。 所述成分含量测定是指，
[0022] 以含1，2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1，2-二油酸-3-亚油酸甘油酯和甘油三油酸 酯的甲醇/二氯甲烷溶液作为参照物溶液I ;
[0023] 以含有鸦胆子油乳注射液的甲醇/二氯甲烷溶液作为供试品溶液；
[0024] 分别测定Vl体积参照物溶液I、V2体积参照物溶液I以及V3体积供试品溶液的 液相图谱，其中，Vl < V3 < V2 ;
[0025] 用外标两点法对数方程计算成分含量，公式如下：
【主权项】
1. 鸦胆子油乳注射液质量控制方法，其特征在于，所述方法包括： 以含1，2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1，2-二油酸-3-亚油酸甘油酯和甘油三油酸酯的 甲醇/二氯甲烷溶液作为参照物溶液I; 以含鸦胆子油的甲醇/二氯甲烷溶液作为参照物溶液II; 以含有鸦胆子油乳注射液的甲醇/二氯甲烷溶液作为供试品溶液； 分别测定参照物溶液I、参照物溶液II和供试品溶液的液相图谱。
2. 鸦胆子油乳注射液质量控制方法，其特征在于，所述方法包括： 取每lml含1，2_二亚油酸-3-油酸甘油酯0. 20mg、l，2-二油酸-3-亚油酸甘油酯 0. 50mg和甘油三油酸酯0. 66mg的，甲醇：二氯甲烷为1 : 1的溶液，作为参照物溶液I; 取每lml含lmg鸦胆子油的，甲醇：二氯甲烷为1 : 1的溶液作为参照物溶液II; 取含有鸦胆子油乳注射液的，甲醇：二氯甲烷为1 : 1的溶液作为供试品溶液； 分别精密吸取参照物溶液I、参照物溶液II和供试品溶液各5y1，注入液相色谱仪，测 定其图谱。
3. 权利要求2所述鸦胆子油乳注射液质量控制方法，其特征在于，色谱条件为： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：二氯甲烷为60-70 : 40-30的乙腈/二 氯甲烷的混合溶液为流动相；流速为每分钟0. 3-0. 8ml;柱温30-40°C;蒸发光散射检测器； 分析时间为40-130分钟。
4. 权利要求3所述鸦胆子油乳注射液质量控制方法，其特征在于，色谱条件为： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：二氯甲烷为65 : 35的乙腈/二氯甲烷 的混合溶液为流动相；流速为每分钟0. 5ml;柱温35°C;蒸发光散射检测器；分析时间为优 选65分钟。
5. 权利要求1-4任一项所述鸦胆子油乳注射液质量控制方法，其特征在于，所述方法 还包括与标准图谱比对的步骤。
6. 权利要求5所述鸦胆子油乳注射液质量控制方法，其特征在于，所述标准图谱是通 过如下方法测定的： 选取若干批次鸦胆子油乳注射液，按照权利要求1-4任一项所述方法测定其液相色 谱，用色谱指纹图谱相似度评价系统，生成鸦胆子油乳注射液标准指纹图谱。
7. 权利要求1-4任一项所述鸦胆子油乳注射液质量控制方法，其特征在于，所述方法 还包括成分含量测定的步骤。
8. 权利要求7所述鸦胆子油乳注射液质量控制方法，其特征在于，所述成分含量测定 是指， 以含1，2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1，2-二油酸-3-亚油酸甘油酯和甘油三油酸酯的 甲醇/二氯甲烷溶液作为参照物溶液I; 以含有鸦胆子油乳注射液的甲醇/二氯甲烷溶液作为供试品溶液； 分别测定VI体积参照物溶液I、V2体积参照物溶液I以及V3体积供试品溶液的液相 图谱，其中，VI<V3 <V2 ; 用如下公式计算成分含量： 式中：
A为峰面积； N为进样体积，单位y1 ; C为浓度，单位mg/ml; V为取样体积，单位ml;a为线性方程LgA=aLg(NC)+b的斜率； b为线性方程LgA=aLg(NC)+b的截距。
9. 权利要求8所述鸦胆子油乳注射液质量控制方法，其特征在于，色谱条件为： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：二氯甲烷为60-70 : 40-30的乙腈/二 氯甲烷的混合溶液为流动相；流速为每分钟0. 3-0. 8ml;柱温30-40°C;蒸发光散射检测器； 分析时间为40-130分钟。
10. 权利要求9所述鸦胆子油乳注射液质量控制方法，其特征在于，色谱条件为： 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：二氯甲烷为65 : 35的乙腈/二氯甲烷 的混合溶液为流动相；流速为每分钟0. 5ml;柱温35°C;蒸发光散射检测器；分析时间为优 选65分钟。
【专利摘要】本发明提供一种鸦胆子油乳注射液质量控制方法，所述方法包括：以含1.2-二亚油酸-3-油酸甘油酯、1，2-二油酸-3-亚油酸甘油酯和甘油三油酸酯的甲醇/二氯甲烷溶液作为参照物溶液I；以含胆子油的甲醇/二氯甲烷溶液作为参照物溶液II；以含有鸦胆子油乳注射液的甲醇/二氯甲烷液作为供试品溶液；分别测定参照物溶液I、参照物溶液II和供试品溶液的液相图谱。本发明用同一种方法既测含量，也检测指纹图谱，既有定量，也有定性，提供了一个快速、简便、准确、多角度的鸦胆子油乳注射液质量控制方法。
【IPC分类】G01N30-88
【公开号】CN104777260
【申请号】CN201410827734
【发明人】麻军法, 李海鹏, 岳昌林, 李宏
【申请人】李宏, 江苏九旭药业有限公司
【公开日】2015年7月15日
【申请日】2014年12月26日