算得金纳米(AuNPs)溶液浓度为8.8nM。
[0028]实施例2:纳米界面能量转移供体选择
[0029]本实施例试验了 4种纳米界面能量转移供体:1种阴离子荧光染料(曙红B)和3种阳离子荧光染料(罗丹明6G，吖啶橙，番红花红T)。四种纳米界面能量转移供体的终浓度分别为 2.50X 10 5mol.?\2.50X10 mo I.L \ 1.25 X 10 6mol.?\2.50X 10 5mol.?Λ根据AuNPs对有机荧光染料的猝灭效率公式:n = 1_(F/F。)，式中F、F。分别为在最佳测定条件下有、无猝灭剂时荧光分子的荧光强度，η为猝灭效率。
[0030]通过公式计算得出AuNPs对罗丹明6G、吖啶橙、番红花红T和曙红B的猝灭效率分别为:96%，57%，55%，60%，由此得之AuNPs对罗丹明6G的猝灭效果最好，猝灭效率达96%，其主要的原因是在金纳米表面发生了荧光能量转移即纳米界面能量转移，因此后续实验选择罗丹明6G作为纳米界面能量转移供体。本发明进一步探讨了金纳米对罗丹明6G的猝灭机制，在298Κ，308Κ，318Κ温度下，R6G_AuNPs体系的Stern-Volmer曲线斜率分别为
8.68X 109、7.32X 109和7.23X 10 9L.mol \说明随着温度升高，曲线斜率逐渐减小，即荧光猝灭常数(Ksv)依次降低，所以金纳米对罗丹明6G为静态猝灭。
[0031]实施例3:选择性实验
[0032]当邻苯二胺的浓度为6.0X 10 7H1l.L 1时，考察了可能存在的干扰物质对该体系的影响，在相对偏差不大于 ±10%时，6.0X10 6mol.L 1 的 Cd2、Ba2、Ni2、Pb2、Cu2、Zn2、Cr3+，PO43，CO32，PO43，SO42，硝基苯，苯酚，乙醇，葡萄糖，色氨酸均不干扰。
[0033]实施例4绘制标准曲线
[0034]按优化后的最佳实验条件，移取3X 10 6mol -L 1邻苯二胺标准工作液于2mL EP管中。具体如下操作:
[0035]在2mL EP管中，依次加入40 μ L的1mmol.L 1柠檬酸钠缓冲溶液(ρΗ4.5)，实施例I制金纳米溶液8.8nmol.L \ 40 μ L，1.0X 10 5mol.L 1罗丹明6G溶液10 μ L，混匀后，加入一定量的3.00X 10 6H1l -L 1的邻苯二胺标准工作溶液，用蒸馏水定容至500 μ L，混匀，室温放置20min。在F-4500荧光分光光度计上扫描，得到荧光光谱。激发波长为529nm，最大发射波长为550.2nm，测量体系的荧光强度F和试剂空白F。，得到AF = F-F。。激发和发射狭缝宽度分别为5nm和5nm，光电倍增管(PVM)负电压为700V。
[0036]按实验方法分别测定550.2nm处荧光光强度F，以AF为纵坐标，邻苯二胺的浓度c为横坐标，绘制标准曲线(图1)。邻苯二胺浓度在1.5X 10 sH1l.L 1^7.2X 107mol.L范围内与荧光光强度呈现良好的线性关系。其回归方程为AFi3pd =9.236c (ΧΙΟ 8mol.L )-42.66，r = 0.9913。
[0037]实施例5检出限和精密度
[0038]经11次空白平行测定，按照c = 3Sb/k(Sb表示空白溶液的标准偏差，k表示工作曲线的斜率)公式计算出邻苯二胺的检出限为4.5X10 9H1l.L ^对邻苯二胺为
1.8X10 mol *L \3.6X10 mol.L 1和5.0X 10 mol.L 1的三种标准溶液进行7次平行测定的相对标准偏差为9.2 %，4.5 %和8.6%，实验结果充分表明本方法精密度良好。
[0039]以上的实施例仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术人员对本发明的技术方案作出的各种变型和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。
【主权项】
1.一种基于纳米界面能量转移的邻苯二胺检测方法，其特征在于，包括步骤: 1)柠檬酸钠缓冲溶液、金纳米溶液、能量转移供体溶液以体积比2?7:2?6:1混合，然后加入邻苯二胺标准工作溶液； 2)步骤I)制得的混合溶液在荧光分光光度计上扫描，用激发波长为529nm，最大发射波长为550.2nm的荧光测量体系的荧光强度F和试剂空白F。，获得邻苯二胺浓度c和荧光强度AF关联的数学模型。2.根据权利要求1所述的邻苯二胺检测方法，其特征在于，所述步骤I)中柠檬酸钠缓冲溶液的PH值为3.0?5.5。3.根据权利要求1所述的邻苯二胺检测方法，其特征在于，所述金纳米溶液的制备方法为:向35?40mL的蒸馈水中加入I?2%说11(314溶液(w/v)0.5?1.0mL，混勾，边加热边搅拌至沸，再加入柠檬酸钠，Imin内可见溶液颜色由黄色变黑直至酒红色，继续加热搅15min后，停止加热。4.根据权利要求3所述的邻苯二胺检测方法，其特征在于，加入的柠檬酸钠溶液浓度为35?40mmol.L \加入的体积为4?7mL ;停止加热后继续搅拌至溶液冷却至室温，用0.22 μπι滤膜过滤，储存于棕色试剂瓶。5.根据权利要求1?4任一所述的邻苯二胺检测方法，其特征在于，所述步骤I)中能量转移供体为阴离子荧光染料或阳离子荧光染料，所述阴离子荧光染料为曙红B;所述阳离子荧光染料为罗丹明6G、吖啶橙、番红花红T中的一种；能量转移供体溶液浓度为2.5X10 7?2.5X10 5mol.L 1O6.根据权利要求1?4任一所述的邻苯二胺检测方法，其特征在于，所述步骤I)中加入邻苯二胺标准工作溶液后定容，使得到的混合溶液中邻苯二胺浓度在1.5X10 smol.L 1?7.2X10 7Ii1I^L1范围内。7.根据权利要求1?4任一所述的邻苯二胺检测方法，其特征在于，所述步骤2)中，荧光分光光度计的激发和发射狭缝宽度分别为5nm和5nm，光电倍增管(PVM)负电压为700V。8.根据权利要求1?4任一所述的邻苯二胺检测方法，其特征在于，还包括步骤:对待测样品用步骤I)和步骤2)同样方法进行荧光检测，根据步骤2)建立的数学模型确定待测样品中邻苯二胺的含量。
【专利摘要】本发明提出一种基于纳米界面能量转移的邻苯二胺检测方法，包括步骤：1)柠檬酸钠缓冲溶液、金纳米溶液、能量转移供体溶液以体积比2～7：2～6：1混合，然后加入邻苯二胺标准工作溶液；2)混合溶液在荧光分光光度计上扫描，用激发波长为529nm，获得邻苯二胺和荧光强度F关联的数学模型。本发明以金纳米为荧光能量转移受体，优选罗丹明6G为荧光能量转移供体组建高效纳米界面能量转移体系。以此作为开发邻苯二胺检测新方法的基础，本发明方法能准确灵敏地检测水中邻苯二胺含量，最低检出限为4.5×10-9mol·L-1。样品不需要复杂的前处理过程，耗时少，检测成本远低于传统的仪器检测方法，而且检出限低，操作简单。
【IPC分类】G01N21/64
【公开号】CN105203521
【申请号】CN201510695260
【发明人】周斌, 张洁, 郑小莉, 王永生, 杨慧仙, 徐小娜, 薛金花, 杨胜园
【申请人】南华大学
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年10月22日