一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术，属于中药制剂及制备工艺领 域。
【背景技术】
[0002] 中药一般来源于天然，其药效组分没有经过ADME设计或化学修饰，普遍具有低溶 解度、低渗透性的特点从而导致其口服生物利用度很低，极大制约了中药临床药效的发挥。 例如黄酬类成分是中药多成分、多环节、多祀点整合调节作用的重要物质基础，但口服给药 后，大量黄酬类成分存在生物利用度低的现象，如水飞劑素、淫羊蕾总黄酬、葛根总黄酬、齐 域果酸等。
[0003] 采用纳米技术可W提高中药难吸收成分的口服生物利用度，但纳米粒子例如脂质 体、固态脂质纳米粒、纳米结构脂质体等口服后主要经化yer结上的M细胞或胞饮作用转 运，在胃肠道中的吸收较为有限。微乳和自微乳给药系统促进口服吸收的作用较好，但是由 于中药用量大、给药周期长，微乳中表面活性剂的造成的肠道毒性问题有待解决。
[0004] 近年来，乳铁蛋白（lactoferrin，LF)因其安全高效的促吸收功能，在新型给药系 统中的研究与应用逐渐引起关注。现已证实多种生物的肠道上皮细胞表面均存在大量转铁 蛋白受体，能够介导LF通过内吞方式进入体内，同时，LF具有部分对抗膜蛋白酶和膜凝乳 蛋白酶的降解作用，在胃肠道中稳定性好，可用于改善口服给药吸收情况较差的众多药物。 目前载药乳铁蛋白给药系统的研究通常采用化学合成的方式将药物分子与载体材料结合， 如将乳铁蛋白琉基化后与聚合物马来献亚胺-聚乙二醇-聚乳酸一端的马来酷亚胺基相连 接，或有研究将乳铁蛋白通过聚乙二醇连接到阳离子高分子聚酷胺-胺为基础的载体上， 实现载药，其制备过程复杂，合成高分子材料中残留的引发剂和未聚合的单体，具有较大毒 性，可能对人体造成严重后果。因此，无需要化学合成就能将药物与载体相连构新型给药传 输系统的制备方法成为研究者关屯、的问题。 阳〇化]本发明的主要优势在于仅通过超高压力作用即可使转铁蛋白分子结构中富含的 二硫键发生交联反应，包裹药物形成载药纳米粒，同时借助于转铁蛋白分子荷电所形成的 空间静电排斥力进一步稳定的纳米粒子，该纳米制剂制备工艺简单，条件溫和，可显著改善 药物的体外溶出及体内吸收状况，是一种新型纳米粒口服吸收增强技术，具有良好的应用 潜能。
【发明内容】
[0006] 本
【发明内容】
提供了一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术，其特征在于仅采用溶 剂注入-超高压匀质法即可制备W乳转铁蛋白为载体的纳米粒。
[0007] 本发明所述载药转铁蛋白的纳米粒制备方法如下：将处方量药物溶于适当有机溶 剂中，作为油相。按重量比取相应浓度的乳转铁蛋白溶于纯水中并W有机酸调节抑为3~ 5,37°C水浴保溫，作为水相。揽拌条件下，将油相缓慢注入水相中形成粗乳。粗乳经超高压 匀质循环数次，减压挥去溶剂，干燥后即得W乳转铁蛋白为载体的纳米粒。
[0008] 所载药物可包括中药黄酬类药物如水飞劑素、淫羊蕾总黄酬、葛根总黄酬、齐墳果 酸等，并W水飞劑素、齐墳果酸为优选药物。
[0009] 制备方法中的有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙酬、乙酸、二氯甲烧、S氯甲烧等。
[0010] 制备方法中的有机酸包括构祿酸、班巧酸、酒石酸、草酸、苹果酸等。
[0011] 制备方法中的干燥方法包括冷冻干燥、喷雾干燥等。
[0012] 制备方法中选定乳铁蛋白水溶液的配制浓度范围为0. 4~1. 2g/ml，乳铁蛋白水 溶液的PH值范围为3.0~5.0,乳铁蛋白与药物的质量比范围为1 : 1~1 : 9。
【附图说明】
[0013] 图1齐墳果酸乳铁蛋白纳米粒粒径测定结果
[0014] 图2齐墳果酸乳铁蛋白纳米粒Zeta电位测定结果
[0015] 图3齐墳果酸乳铁蛋白纳米粒透射电镜照片
[0016] 图4原料药、物理混合物及齐墳果酸乳铁蛋白纳米粒溶出结果
【具体实施方式】
[0017] 实施例1 :齐墳果酸乳铁蛋白纳米粒的制备
[0018] 精密称取处方量齐墳果酸溶于无水乙醇中，50°C水浴加热使其完全溶解。按重量 比1 : 6称取适量Lf加水于37°C条件下超声，使之溶解完全，用巧樣酸调节Lf水溶液抑 为4. 0,揽拌条件下将齐墳果酸注入LF水溶液中形成粗乳。粗乳移置高压均质机中，采用 15(K)bar压力循环3次，后将其转入旋转蒸发器，45°C下旋转蒸发除尽乙醇，过0. 45ym微孔 滤膜，即得齐墳果酸乳铁蛋白纳米混悬液。将上述混悬液置冷冻干燥机中冷冻干燥4她，即 得。
[0019] 实施例2 :齐墳果酸乳铁蛋白纳米粒的制备
[0020] 精密称取处方量齐墳果酸溶于甲醇中，50°C水浴加热使其完全溶解。按重量比 1 : 9称取适量Lf加水于37°C条件下超声，使之溶解完全，用巧樣酸调节Lf水溶液抑 为5. 0,揽拌条件下将齐墳果酸注入LF水溶液中形成粗乳。粗乳移置高压均质机中，采用 25(K)bar压力循环3次，后将其转入旋转蒸发器，45°C下旋转蒸发除尽甲醇，过0.45ym微孔 滤膜，即得齐墳果酸乳铁蛋白纳米混悬液。将上述混悬液经喷雾干燥后，即得。
[0021] 实施例3 :水飞劑素乳铁蛋白纳米粒的制备
[0022] 精密称取处方量水飞劑素溶于丙酬中，40°C水浴加热使其完全溶解。按重量比 1 : 8称取适量Lf加水于37°C条件下超声，使之溶解完全，用酒石酸调节Lf水溶液抑 为5. 0,揽拌条件下将水飞劑素注入LF水溶液中形成粗乳。粗乳移置高压均质机中，采用 250化ar压力循环3次，后将其转入旋转蒸发器，45°C下旋转蒸发除尽乙醇，过0. 45ym微孔 滤膜，即得水飞劑素乳铁蛋白纳米混悬液。将上述混悬液经喷雾干燥后，即得。
[0023] 试验例1，按照实施例1的方法制备齐墳果酸乳铁蛋白纳米粒，其表征结果如附图 1~3。图中可见，齐墳果酸乳铁蛋白纳米粒制剂的粒径约为205nm，PDI为0. 148,Zeta电 位为26. 3mv，纳米粒外观呈类球形结构，具有明显的核壳结构。
[0024] 试验例2,体外溶出度测定，采用中国药典规定方法（浆法），W含有1 %十二烷基 硫酸钢1000 ml为溶出介质，转速为每分钟100转，溫度37 + 0. 5°C，分别称取齐墳果酸原料 药、齐墳果酸/乳铁蛋白物理混合物W及齐墳果酸乳铁蛋白纳米粒制剂（相当于齐墳果酸 20mg)，均匀撒布在介质液面上，当粉末接触溶液时开始计时，分别于5、10、20、40、60、90、 120min，取样5ml，经0. 45Jim微孔滤膜过滤，同时补加等量介质，采用高效液相法进行含量 测定，计算溶出介质中的药物量，见附图4。
[0025] 溶出度测定结果显示，在齐墳果酸乳铁蛋白纳米粒在溶出介质中迅速释放，IOmin 溶出度超过90 %，20min接近100% ;而原料药溶出度较低，IOmin接近40 %，20min时约为 68% ;两者物理混合物的溶出行为与原料药基本一致未见明显改善。
[00%] 试验例3,按照实施例2的方法制备水飞劑素乳铁蛋白纳米粒并与水飞劑素原料 药进行药代动力学比较研究。
[0027] 试验方案：将12只大鼠随机均分为2组，每组6只。实验前禁食12h，分别取 水飞劑素和水飞劑素乳铁蛋白纳米粒W30mg/kg剂量（W水飞劑宾计）灌胃，给药后 按0. 083、0. 167、0. 5、1、1. 5、2、4、7和IOh于大鼠眼眶底静脉丛取血400yL精密吸取大 鼠空白血浆IOOyL加内标溶液SOOiiL(含0.Siig/mL的内标溶液），震荡3min，离屯、 (15000Xg)lOmin，取上清液SiiL进样分析。应用DAS2.0软件计算药动学参数，结果见表 Io
[002引表1大鼠口服水飞劑素和水飞劑素乳铁蛋白纳米粒后的药动学参数
[0030] 体内药动学研究显示，采用乳铁蛋白对水飞劑素进行修饰后可显著改善药物的口 服生物利用度，Cm。、及AUC均增高约3倍左右。
【主权项】
1. 本
【发明内容】
提供了一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术，其特征在于仅采用溶剂 注入-超高压匀质法即可制备以乳转铁蛋白为载体的纳米粒。2. 根据权利要求1所述制备方法，将药物溶于适当有机溶剂中，作为油相。按重量比 取相应浓度的乳转铁蛋白溶于纯水中并以有机酸调节pH为3~5,37°C水浴保温，作为水 相。搅拌条件下，将油相缓慢注入水相中形成粗乳。粗乳经超高压匀质循环数次，减压挥去 溶剂，干燥后即得以乳转铁蛋白为载体的纳米粒。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于药物可包括中药黄酮类药物如水飞蓟 素、淫羊藿总黄酮、葛根总黄酮、齐墩果酸等，并以水飞蓟素、齐墩果酸为优选药物。4. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于溶剂包括乙醇、二氯甲烷、甲醇、乙醚 等。5. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于有机酸包括枸橼酸、琥珀酸、酒石酸、 草酸、苹果酸等。6. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于制备方法中的干燥方法包括冷冻干 燥、喷雾干燥等。7. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于制备方法中选定乳铁蛋白水溶液的配 制浓度范围为0. 4~1. 2g/ml，乳铁蛋白水溶液的PH值范围为3. 0~5. 0,乳铁蛋白与药物 的质量比范围为1 : 1~1 : 9。
【专利摘要】本发明涉及一种新型中药纳米粒口服吸收增强技术，属于中药制剂及制备工艺领域。本发明系采用溶剂注入-超高压匀质法制备以乳转铁蛋白为载体的纳米粒：将处方量药物溶于适当有机溶剂中，作为油相。按重量比取相应浓度的乳转铁蛋白溶于纯水中并以有机酸调节pH为3～5，37℃水浴保温，作为水相。搅拌条件下，将油相缓慢注入水相中形成粗乳。粗乳经超高压匀质循环数次，减压挥去溶剂，干燥后即得以乳转铁蛋白为载体的纳米粒。该纳米制剂制备工艺简单，条件温和，可显著改善药物的体外溶出及体内吸收状况，是一种新型纳米粒口服吸收增强技术，具有良好的应用潜能。
【IPC分类】A61K47/42, A61K31/357, A61K9/14, A61K31/56
【公开号】CN105343005
【申请号】CN201510759803
【发明人】赵志英, 刘昊炜, 张振海, 吕慧侠
【申请人】中国药科大学
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年11月6日