水里加入5. 71gMg Cl 2 和33. 29gCaCl2)，125 μ L的40g/L胰酶溶液，200 μ L淀粉转葡萄糖苷酶，迅速补充蒸馏水至 50ml ；
[0030] 5、蒸馏水补充完毕立即开始计时，并在0min、5min、lOmin、15min、30min、45min、 60min、90min、120min时间点取lmL样品于离心管中，并立即沸水浴灭酶5min ;灭酶后自然 冷却，并在8000rpm，4°C条件下离心15min ;
[0031] 6、取250 μ L上清液放入预先加有lmL体积分数95%乙醇溶液的离心管中，在 8000rpm，4°C条件下离心；（离心目的：去除杂蛋白，防止过滤不彻底对HPLC柱子的影响） 取含乙醇的上清液300 μ 1于小试管中，并加入900 μ 1的蒸馏水；此处与水的比例可以适量 更改；
[0032] 7、用进样用注射器吸取完上述溶液，过0.45μπι尼龙虑膜进入上样瓶中；
[0033] 8、检测采用Hypersil-P'ffyi，示差检测器，测定条件设为：流动相为乙腈：水= 70:30 (v/v)，流速：1. OmL/min，柱温：40°C ;(色谱柱和检测器的选择是通常检测葡萄糖的 一般选择）
[0034] 9、条件设定好之后，先将配制好的2mg/ml、4mg/ml、6mg/ml、8mg/ml、10mg/ml葡萄 糖标准溶液进样检测，葡萄糖标准液的出峰时间及峰面积，作出标准曲线如图1所示；
[0035] 10、之后在对取样样品进行检测，根据样品的峰面积代入得到的标准曲线，得到葡 萄糖的浓度，进而计算淀粉消化率，（根据文献：生成lg葡萄糖需要消化〇. 9g的淀粉，由此 可以计算样品生成以上所得葡萄糖的量需要消化的淀粉的量，用淀粉的量比1*100即淀粉 的消化率，此处1即为lg碳水化合物））并计算出HI的值，根据GI = 0. 862HI+8. 189计算 样品的GI。
[0036] 上述HI的计算是以白面包为参照物，以上述方法测量计算出白面包的淀粉消化 率（实施例试验中选用的白面包的碳水化合物含量是51. 5g/100g，实验时称取1. 94g白面 包，实验步骤同样品），按白面包的HI为100,根据图2和图3所得多项式，对多项式进行积 分，计算曲线下面积然后根据样品与白面包的面积比计算样品的HI。再由计算得出的HI， 根据GI = 0. 862HI+8. 189计算样品的GI。
[0037] 下表1为采用上述实验方法测定的样品和白面包在不同时间的出峰面积和葡糖 糖浓度值：
[0038] 表 1
[0039]
[0040] 白面包的淀粉消化速率与测定时间如下表2 :
[0043] 上面对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制， 只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种非实质性的改进，或未经改进将本发 明的构思和技术方案直接应用于其它场合的，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护 范围应该以权利要求书所限定的保护范围为准。
【主权项】
1. 一种血糖生成指数体外检测方法，其特征在于，该检测方法是先对食品样品的水 分、灰分、脂肪、蛋白质进行检测，得出含lg碳水化合物的食品样品的量；通过模拟人体内 的消化系统消化lg碳水化合物的食品样品，针对不同消化时间点取样检测，计算淀粉消耗 速率和血糖值，进而通过理论计算公式可得出血糖生成指数。2. 根据权利要求1所述血糖生成指数体外检测方法，其特征在于：所述含lg碳水化合 物的食品样品的量是通过减重法计算碳水化合物=100-水分-灰分-脂肪-蛋白-膳食 纤维计算得出。3. 根据权利要求1所述血糖生成指数体外检测方法，其特征在于：所述理论计算公式 为GI= 0. 862HI+8. 189,其中GI为血糖生成指数，HI为血糖值。4. 根据权利要求1所述血糖生成指数体外检测方法，其特征在于：所述模拟人体内的 消化系统包括加入淀粉酶或胰酶，模拟口腔消化的步骤；加入胃蛋白酶，模拟胃消化的步 骤；加入胰酶、淀粉转葡萄糖苷酶，模拟小肠消化的步骤。5. 根据权利要求4所述血糖生成指数体外检测方法，其特征在于：所述口腔消化的 步骤为取含lg碳水化合物的食品样品，加入磷酸缓冲液调节pH= 6. 6-6. 9,然后加入预 先加热到37°C的淀粉酶或胰酶溶液，所述lg碳水化合物与淀粉酶或胰酶溶液的质量比为 1:0.0025。6. 根据权利要求4所述血糖生成指数体外检测方法，其特征在于：所述模拟胃消化 的步骤为将含NaCl、胃蛋白酶和瓜尔豆胶的0.lmol/L磷酸缓冲液加入到上述口腔消化 后的溶液中，所述lg碳水化合物与NaCl、胃蛋白酶和瓜尔豆胶的质量比为1:0. 0024 : 0. 05:0. 05,用HC1调pH到1. 3-1. 5,在37°C的恒温振荡器中保温30min。7. 根据权利要求4所述血糖生成指数体外检测方法，其特征在于：所述模拟小肠消化 的步骤为调节上述胃消化后的溶液pH= 6. 8-6. 9,加入体积比为5:5:8的氯化镁-氯化钙 溶液、40g/L胰液、淀粉葡萄糖苷酶溶液，lg碳水化合物与氯化镁-氯化钙溶液的质量体积 比为1:0. 125g/ml，用蒸馏水定容，定容后的总体积为氯化镁-氯化钙溶液体积的400倍，在 37°C中恒温振荡180min。8. 根据权利要求1所述血糖生成指数体外检测方法，其特征在于：所述针对不同消化 时间点取样检测包括在〇、5、10、15、30、45、60、90、120min时取样品，放入含有4倍样品体积 的的95%乙醇溶液中；经离心沉淀、过膜、用氨基柱和示差检测器进行检测；再以高效液相 色谱法检测样品的出峰时间及峰面积。9. 根据权利要求8所述血糖生成指数体外检测方法，其特征在于：所述离心沉淀前还 包括沸水浴灭酶的步骤。
【专利摘要】本发明公开了一种血糖生成指数体外检测方法，该检测方法是先对食品样品的水分、灰分、脂肪、蛋白质进行检测，得出含1g碳水化合物的食品样品的量；通过模拟人体内的消化系统消化1g碳水化合物的食品样品，针对不同消化时间点取样检测，计算淀粉消耗速率和血糖值，进而通过理论计算公式可得出血糖生成指数。发明血糖生成指数体外检测方法通过体外模拟人体消化的方法，缩短了检测时间，降低了检测要求，解决了体内检测耗费大量的人力物力的问题。
【IPC分类】G01N33/02, G01N30/02
【公开号】CN105353049
【申请号】CN201510646660
【发明人】刘辉, 段盛林, 苑鹏, 刘山国, 柳嘉
【申请人】同福碗粥股份有限公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年9月30日