一种忍冬藤配方颗粒的质量检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种忍冬藤配方颗粒的薄层色谱鉴别方法和含量测定方法，属于中药 质量检测领域。
【背景技术】
[0002] 忍冬藤配方颗粒为忍冬科植物忍冬Lonicerajaponica化unb.的干燥茎枝经加 工制成的配方颗粒，气微，味微苦，具有清热解毒，疏风通络等功效，主要用于；温病发热，热 毒血痴，痛肿疮瘍，风湿热瘦，关节红肿热痛。
[0003] 中药配方颗粒是W符合炮制规范的单味中药饮片为原料，采用现代制药工业的先 进工艺和方法，经提取、浓缩、干燥、制粒制成一定规格供医疗机构临床配方使用的制成品， 是中药饮片的一种补充形式，可供临床医生替代中药饮片使用，变传统中药汤剂的大包饮 片用砂锅合煎、过滤饮服等繁杂操作为规范化工业大生产、小包装、水冲即服。与传统中药 饮片相比，工业化批量生产的中药配方颗粒，品质更加均一，依据质量标准检测的结果（数 据和图谱）重现性好，既保持了原中药饮片的药性、药味和药效，又具有不需煎煮，疗效确 切，使用、携带方便，安全等优点，是传统中药饮片与时俱进的产物，是"源于饮片，高于饮 片"的现代中药汤剂。中药配方颗粒不仅用于中医临床配方，还可用作中成药的原料药品、 保健食品、食品、日用化妆品、精细化工品、兽用药品等方面。它将成为介于中药饮片和中成 药之间的一个新兴产业。
[0004] 与传统的中药煎剂相比，中药配方颗粒具有免煎易服，易储存，携带方便等优点。 但中药配方颗粒经过一系列工序的加工后已失去药材的外形特征，难W靠性状鉴别来对药 材进行鉴定，且在其质量控制上也与原药材有所不同。薄层色谱法操作简单，方便，适用于 中药材及各种中药制剂的定性鉴别，高效液相色谱法灵敏度高，适用于各种制剂的定量分 析。本发明采用薄层色谱法对忍冬藤配方颗粒进行定性鉴别，同时采用高效液相色谱法对 其中的绿原酸进行含量测定，旨在建立一种忍冬藤配方颗粒的质量检测方法，该方法可用 于忍冬藤配方颗粒的质量控制，对保证产品质量的稳定性及临床用药的有效性与安全性具 有重要意义。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供忍冬藤配方颗粒的质量检测方法，该方法包括；（1)薄层 色谱鉴别方法测定方法和（2)高效液相色谱法含量测定方法。其中
[0006] (1)薄层鉴别；取本品粉末0. 7g，加己醇20ml，水浴回流30分钟，滤过，滤液浓缩 至1ml，作为供试品溶液；另取忍冬藤对照药材15g，加水60ml，煮沸30分钟，滤过，滤液蒸 干，残渣加己醇20ml，水浴回流30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为对照品溶液；照中国药 典2010年版一部附录VIB的薄层色谱法试验，供试品液5μ1、对照药材溶液5μ1，分别点 于同一硅胶G薄层板上，W己酸了醋一甲酸一水（7:2.5:2.5)的上层液为展开剂，展开，取 出，瞭干，置紫外光灯（365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显 相同颜色的英光斑点。
[0007] (2)含量测定；照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VID)测定；
[000引色谱条件；W十八烷基娃焼键合硅胶为填充剂；W甲醇-己腊-0.1 %磯酸溶液 (2:15:83)为流动相；DAD检测器检巧IJ，检测波长为327nm;柱温3(TC，流速；Iml/min。
[0009] 对照品溶液的制备；取绿原酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含绿 原酸8μg的溶液，即得。
[0010] 供试品溶液的制备；取忍冬藤配方颗粒粉末0.Ig，精密称定，置具塞锥形瓶中，精 密加入50%甲醇25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率35曲Z) 30分钟，放冷，再称定 重量，用50 %甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0011] 测定法：分别精密吸取对照品溶液?〇μ1、供试品溶液?〇μ1，注入液相色谱仪，测 定，即得。
[0012] 本发明的优点在于方法简单、准确，灵敏度高，精密度、稳定性好，采用HPLC法测 定忍冬藤配方颗粒中绿原酸的含量，峰形好，分离度高，可作为忍冬藤配方颗粒的质量控制 和考察工艺稳定性的有效技术手段，对提高产品质量具有重大意义。
【附图说明】
[0013] 图1 ;忍冬藤配方颗粒TLC图，1是忍冬藤配方颗粒对照品；2是对照药材；3~8是 六批忍冬藤配方颗粒供试品。
[0014] 图2 ;忍冬藤配方颗粒HPLC图谱，A是对照品图谱；Β是供试品1绿原酸。
【具体实施方式】
[0015] 实施例1 ;忍冬藤配方颗粒的薄层色谱鉴别
[0016] 薄层鉴别；取本品粉末0. 7g，加己醇20ml，水浴回流30分钟，滤过，滤液浓缩至 1ml，作为供试品溶液；另取忍冬藤对照药材15g，加水60ml，煮沸30分钟，滤过，滤液蒸干， 残渣加己醇20ml，水浴回流30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为对照品溶液；照中国药典 2010年版一部附录VIB的薄层色谱法试验，供试品液5μ1、对照药材溶液5μ1，分别点于 同一硅胶G薄层板上，W己酸了醋一甲酸一水（7:2. 5:2. 5)的上层液为展开剂，展开，取出， 瞭干，置紫外光灯（365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相 同颜色的英光斑点。
[0017] 实施例2 ;忍冬藤配方颗粒的含量测定方法
[0018] 含量测定；照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VID)测定；
[0019] 1、仪器与试药
[0020] (1)仪器；Dioex叫tiMate3000高效液相色谱仪，DAD检测器，四元梯度泉，变色 龙数据处理系统。
[002。似试药；甲醇、己腊为色谱纯试剂化sher Scientific),水为双蒸水，其它试剂 均为分析纯。绿原酸对照品（批号：110753-201314)购于中国药品生物制品检定所。
[00过 2、实验条件
[0023] (1)色谱条件；色谱柱：色谱柱；UnitaryC185um100A(4. 6mmX150mm);流动相： 甲醇-己腊-0. 1 %磯酸溶液（2:15:83);检测波长为327nm;柱温：30。流速：1. 0血/min。
[0024] 3、方法学考察
[00巧](1)线性范围的考察：
[0026] 精密量取绿原酸对照品溶液2. 0, 5. 0,10. 0μ1及对照品储备液2. 0, 3. 0,4. 0μ1， 注入液相色谱仪进行色谱测定，按上述色谱条件测定峰面积，并W峰面积灯）对进样量狂） 进行线性回归，得标准曲线。
[0027] 得回归方程；Υ= 21. 0059Χ-2. 4404,r= 0. 99998 ;表明绿原酸在 0.0789-1. 5782μg范围内呈线性关系。结果见表1。
[0028] 表1绿原酸对照品测定结果
[0029]
[0030] (2)精密度试验；精密吸取对照品溶液5μ1重复进样6次，测得峰面积积分值RSD < 2%，结果见表2。
[0031] 表2精密度试验结果
[0032]
[0033] (3)稳定性试验；取同一供试品（批号：120717)溶液10μ1，按含量测定项下方法 测定5次，结果绿原酸峰面积积分值的RSD(η= 5) < 2%，表明8小时内稳定。结果见表 3。
[0034] 表3稳志性试验结果
[0035]
[003引 （4)重复性试验；(4)重复性试验；按拟定的含量测定方法，对同一批样品（批号： 120717)分别制备5份供试液，测得绿原酸峰面积并计算含量，RSD< 2%，结果见表4。
[0037] 表4样品重复性试验（η= 2)
[0038]
[0039] (5)同收率试验；取已知含量的样品（批号120717)，分别精密加入一定量的绿原 酸对照品，按供试品制备与测定方法，平行做6组，结果见表5。
[0040] 表5绿原酸回收率测定结果
[0041]
[004引 （6)样品测定：
[0043] 取忍冬藤配方颗粒约0.Ig，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml， 称定重量，超声处理（功率250W，频率35曲Z) 30分钟，放冷，再称定重量，用50 %甲醇补足 减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；分别精密吸取对照品溶液10μ1，样品供试液各 10μ1，按上述色谱条件测定，结果见表6。
[0044] 表6样品含量测定结果（η= 2)
[0045]
【主权项】
1. 一种忍冬藤配方颗粒的检测方法，该方法包括： (1) 薄层色谱鉴别方法，和 (2) 高效液相色谱法含量测定方法。2. 权利要求1所述忍冬藤配方颗粒的检测方法，其中所述薄层色谱鉴别方法为：（1)供 试品溶液配制：取忍冬藤配方颗粒粉末〇. 7g，加乙醇20ml，水浴回流30分钟，滤过，滤液浓 缩至lml，作为供试品溶液；（2)对照品溶液配制：另取忍冬藤对照药材15g，加水60ml，煮 沸30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇20ml，水浴回流30分钟，滤过，滤液浓缩至lml，作 为对照品溶液；(4) (3)测定法：照中国药典2010年版一部附录VIB的薄层色谱法试验，供 试品液5μ1、对照药材溶液5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯一甲酸一水 (7:2. 5:2. 5)的上层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm)下检视，供试品色 谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。3. 权利要求1所述牡丹皮配方颗粒的质量检测方法，其中所述高效液相色谱法：含量 测定方法为：（1)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-〇. 1 %磷酸 溶液（2:15:83)为流动相；DAD检测器检测，检测波长为327nm;柱温30°C，流速：lml/min; (2)对照品溶液的制备：取绿原酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每lml含绿原酸 8μg的溶液，即得；（3)供试品溶液的制备：取忍冬藤配方颗粒粉末0.lg，精密称定，置具塞 锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率35kHz) 30分钟， 放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得（4)测定法：分 别精密吸取对照品溶液?〇μ1、供试品溶液?〇μ1，注入液相色谱仪，测定，即得。
【专利摘要】一种忍冬藤配方颗粒的质量检测方法，该方法包括薄层色谱鉴别方法和含量测定方法。采用薄层色谱法对忍冬藤配方颗粒进行定性鉴别，同时采用高效液相色谱法对其中的绿原酸进行含量测定，建立一种忍冬藤配方颗粒的质量检测方法，使产品质量得到了有效控制。
【IPC分类】G01N30/90, G01N30/02
【公开号】CN105445385
【申请号】CN201410431358
【发明人】陈钟, 李军山, 姜国志, 刘铁军, 高晗, 郝磊, 胡雪娇
【申请人】神威药业集团有限公司
【公开日】2016年3月30日
【申请日】2014年8月28日