一种检测实验鼠怀孕的装置及方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于实验动物妊娠诊断技术和免疫学技术领域，具体涉及一种检测实验鼠 怀孕的装置及方法。
【背景技术】
[0002] 实验动物是从事科学研究、教学、生产、检测及其科学实验的动物，被广泛应用于 生物医学、医药研发、教学实验、生物检测等方面，在生命科学研究中起着非常重要的作用。 因为小鼠和人的基因相似度有99%，且小鼠和大鼠的繁殖和饲养均相对廉价，繁殖迅速。目 前，每10只实验动物中有大约9只是小鼠或大鼠，应用领域包括免疫学、肿瘤学、生理学。病 理学、胚胎学和毒理学等，而且在神经科学中的应用也在不断增多，实验鼠也成了实验动物 的代名词。
[0003] 实验鼠的繁殖是实验动物生产和实验过程的关键。在实验鼠繁殖过程中，怀孕天 数和妊娠时间是确定实验鼠分笼饲喂时间和实验孕鼠制备的决定性因素。准确的妊娠诊断 可以使实验动物生产厂家和研究人员掌握准确的妊娠时间，更合理有效的安排饲养空间， 并进一步减少漏检提高实验动物的利用率，并减少饲养成本。目前常用的实验鼠妊娠的诊 断方法有阴栓目测检测法和阴道精子涂片检查法。
[0004] (1)阴栓检测法：阴栓是老鼠在交配4-5min后形成的一种白色浆液性物质，堵塞在 阴道至子宫颈的腔内，阴栓一般在交配后12_24h自动脱落。阴栓检测法就是在老鼠合笼后 次日清晨把是否检查到阴栓作为其交配和妊娠的标志，目前主要通过目测和探测来确定。 目测就是直接用眼睛观察，探测需要持探测棒轻触老鼠阴道口，如有明显抵触感则表明有 阴栓，如无抵触感且探测棒可无阻力的插入则无阴栓。该方法简单方便，但由于老鼠阴栓大 小不一，大则凸出于阴道口易于观察，而小则在子宫颈内，需要翻开阴道口仔细检查，因此 仅靠目测很难确诊，且漏检的几率也很大，使得饲养成本提高，造成了生产浪费。探测检查 用的探测棒大都自制，探测过程中易对雌鼠产生较大刺激。由漏检所导致的孕鼠和初生的 小鼠因无法确定相关指标，也必须处理，在动物伦理方面也存在消极影响。
[0005] (2)阴道精子涂片检查法:在老鼠合笼后次日清晨将沾有生理盐水的棉签轻柔旋 入雌鼠的阴道，旋转一圈后拿出，再将棉签涂片，巴氏染色镜检。该方法虽然准确性较高，但 程序繁琐。在实际大规模生产和实验过程中，因动物数量较多，需耗费大量时间，并不实用。
【发明内容】
[0006] 为了解决现有条件下不能快速简单而准确检测的不足，本发明设计提供一套全面 快速的检测方法，具有携带方便、检测快速准确、操作简单的特点。
[0007] 实现本发明目的的技术方案是：
[0008] -种检测实验鼠怀孕的装置，包括中空的检测盒、探测棒、滑动开关、胶体金试纸 条和观测窗，所述的探测棒收纳于检测盒内，检测盒上开有探测棒出口，探测盒侧壁上开有 滑动槽，滑动开关设于探测盒侧壁外并穿过滑动槽固定在探测棒上，探测棒由滑动开关控 制进出，所述的胶体金试纸条固定于检测盒内，胶体金试纸条最前端的样品接触端头伸出 至检测盒外，胶体金试纸条包括吸收垫、硝酸纤维素膜、胶体金垫、样品垫、pH试纸层和PVC 底板，所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，所述的样品垫样作为样品接触端头设在 胶体金试纸条最前端，胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸收垫再自前向后依次粘贴在PVC底板 上，所述的pH试纸层连接在吸收垫中段，检测盒上开有观测窗，所述的观测窗开设于胶体金 试纸条的检测线、质控线和pH试纸层的上方，所述的胶体金垫包被有胶体金标记的能识别 鼠精子抗原的鼠抗精子抗体，所述检测线包被有鼠抗精子抗体包被原，所述质控线包被有 山羊抗鼠 IgG。
[0009] 所述的一种检测实验鼠怀孕的装置，所述的能识别鼠精子抗原的鼠抗精子抗体是 提取于免疫性不育小鼠精液。
[0010] 所述的一种检测实验鼠怀孕的装置，还包括试纸保护盖，试纸保护盖盖在检测盒 上，以保护伸出至检测盒外的胶体金试纸条，且试纸保护盖与探测棒出口处于检测盒相反 的两端。
[0011] 所述的一种检测实验鼠怀孕的装置，还包括试纸固定突起，所述的试纸固定突起 为中空的棱台体，试纸固定突起固定在伸出至检测盒外的胶体金试纸条处，胶体金试纸条 从试纸固定突起的上底面伸出。
[0012] -种检测实验鼠怀孕的方法，利用如权利要求1-4任一所述的装置，包括以下步 骤：
[0013] 步骤1:首先查看待测母鼠阴部有无肉眼可见的阴栓，有则完成检测并判断为怀 孕，否则伸出装置上的探测棒，对待测母鼠阴部内部进行探测，若有阻塞感则判断为有阴 栓，完成检测并判断为怀孕，否则执行步骤2;
[0014] 步骤2:往待测雌鼠阴道内插入检测试纸，并将试纸检测接触端头与待测母鼠阴道 内部分泌物充分接触，然后读取试纸上显示的结果，若检测PH值呈中性，PH试纸为褐色，并 发生抗精子抗体免疫反应即免疫试纸条呈现两条红色指示线，则为强阳性，判断为怀孕;若 检测PH值呈弱酸性，PH试纸为红色或橙色，且发送抗精子抗体免疫反应免疫试纸条呈现两 条红色指示线则为阳性，判断为怀孕;若检测PH值呈中性，PH试纸为褐色，未发生免疫反应 则为假阳性，判断为未怀孕;若检测PH值呈弱酸性，PH试纸为红色或橙色，未发生免疫反应 则为阴性，判断为未怀孕。
[0015]本发明的技术效果在于，本发明采用探测法、胶体金试纸法与PH值测定法三种方 法结合的评价体系。并开发出一种新的胶体金试纸与探测结合装置。
[0016]胶体金免疫层析技术是新型免疫测定技术，主要用于检测各类疾病。该技术可以 减少分析时间和样品采集量、提高检测灵敏度和准确度。鼠抗精子抗体(AsAb)是免疫性不 育的雄鼠产生的一种病理性抗体，它可以与精子抗原结合。当雄鼠与雌鼠交配射精后，会在 雌鼠阴道内残留大量精液，精液中含有大量精子抗原。本发明通过该原理，提出一种利用抗 精子抗体与精子抗原结合的定性检测方法对实验鼠进行妊娠诊断。
[0017]正常雄鼠的精液PH值范围在6.4-7.5,呈中性，然而在发情期，雌鼠阴道内乳杆菌 含量表达增高，使阴道内环境PH值降低，范围在5.6-4.5,呈弱酸性。因此，当雄鼠与母鼠进 行交配射精后，精液与阴道内环境液体会有PH值中和的作用，PH值会发生变化。本发明通过 这一原理，在检测试纸上同时对PH值进行检测。进一步验证雌鼠妊娠的准确性。
[0018] 检测时，若阴道内残留有精子抗原，检测线不会形成红色沉淀线，质控线上，形成 红色沉淀线;若阴道内残留无精子抗原，检测线和质控线上均形成红色沉淀线。
【附图说明】
[0019] 图1为本发明装置的结构示意图；
[0020] 图2为试纸条的结构示意图；
[0021 ]其中1为探测棒;2为滑动开关;3为试纸保护盖;4为胶体金试纸条;5为试纸固定突 起;6为读数显示屏；7为试纸接触端头;8为滑动槽;9为吸收垫；10为PVC底板；11为胶体金 垫;12为检测线；13为质控线；14为硝酸纤维素膜;15为PH试纸层;16为吸收垫。
【具体实施方式】
[0022] 下面结合实施例说明本发明，这里所述实施例的方案，不限制本发明应用范围。
[0023] 本实施例的装置包括中空的检测盒、探测棒、滑动开关、胶体金试纸条和观测窗， 探测棒收纳于检测盒内，检测盒上开有探测棒出口，探测盒侧壁上开有滑动槽，滑动开关设 于探测盒侧壁外并穿过滑动槽固定在探测棒上，探测棒由滑动开关控制进出，胶体金试纸 条固定于检测盒内，胶体金试纸条最前端的样品接触端头伸出至检测盒外，胶体金试纸条 包括吸收垫、硝酸纤维素膜、胶体金垫、样品垫、pH试纸层和PVC底板，所述硝酸纤维素膜上 设有检测线和质控线，样品垫样作为样品接触端头设在胶体金试纸条最前端，胶体金垫、硝 酸纤维素膜和吸收垫再自前向后依次粘贴在PVC底板上，pH试纸层连接在吸收垫中段，检测 盒上开有观测窗，观测窗开设