一种酶标板的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及免疫检测装置领域，尤其涉及一种酶标板。
【背景技术】
[0002] 免疫检测是生命科学领域最常见的检测目标分子的方法，酶联免疫吸附试验 (ELISA)是免疫检测的重要组成部分。ELISA主要分为两种反应:一种是抗原与抗体之间的 免疫反应，另一种是生物分子与所吸附的固相表面。在酶联免疫吸附试验(ELISA)中，参与 免疫学反应的抗原、抗体、标记抗体或抗原的纯度、浓度和比例;缓冲液种类、浓度和离子强 度、pH值和反应温度、时间等条件起着关键作用。此外，作为载体的酶标板表面对抗原、抗体 或抗原抗体复合物的吸附也起着非常重要的作用。
[0003] 现有技术中，ELISA酶标板最常用的材质是聚苯乙烯。近年来，为了增加生物分子 与固相表面的亲和力、提高反应的灵敏度，增强检测的稳定性等，酶标板固相材料的选择和 处理引起了本领域研究人员的极大关注。目前，本领域研究人员多致力于研究通过共价交 联化学基团活化官能基、化学反应修饰聚苯乙烯表面以及紫外辐照等方法改变聚苯乙烯表 面的化学性质，进而提高酶标板孔表面对生物分子的亲和力，且已经取得了长足的进步。
[0004] 然而，聚苯乙烯酶标板仍存在另一问题即酶标板孔与生物分子反应的表面积问 题。现有技术中的酶标板多数为平底(结构如说明书附图1)、U型底或V型底，平底的折射率 低，适于酶标仪检测，U型底的酶标板折射率较高，方便加样、吸样、混匀等操作，V底的酶标 板可以精确的吸取样品。但是上述的几种酶标板的酶标板孔与生物分子反应的表面积较 小，不利于反应的充分快速进行。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种表面积大、上样量小的酶标板。为了实现上 述发明目的，本发明提供以下技术方案：
[0006] 本发明提供了一种酶标板，其特征在于，包括若干酶标板孔，每个酶标板孔包括半 球状底部、与所述半球状底部上边缘相接的漏斗形结构和与所述漏斗形结构上边缘相接的 凸出壁。
[0007] 优选的，所述的半球状底部包括初级半球体结构和位于初级半球体结构内部向内 凸起的次级半球体结构。
[0008] 优选的，所述的初级半球体结构的直径为0.2~10mm，壁厚为0.1~1.0mm。
[0009] 优选的，每个初级半球体结构内部的次级半球体的个数为3~50个，所述次级半球 体结构平均分布于初级半球体结构的内表面。
[00?0] 优选的，所述的次级半球体结构的直径为0 · 1~5mm，，壁厚为0 · 1~1 · 0mm，相邻次 级半球体结构间的孔隙为0.1~1.0mm。
[0011]优选的，所述漏斗形结构由位于下部的空心球缺和与所述空心球缺上边缘相接的 空心圆台两部分组成，所述的空心球缺状的下边缘与所述半球状底部的上边缘相接;所述 的空心圆台的上边缘与所述凸出壁的下边缘连接。
[0012] 优选的，所述的空心球缺的直径为0.2~10mm，高度为0.1~5.0mm，壁厚为0.1~ 1.0mm〇
[0013] 优选的，所述的空心圆台的高度为0.2~6.0mm，壁厚为0· 1~1.0mm，上口半径为 0 · 1~5 · 0mm，下口半径为0 · 1~5 · 0mm〇 〇
[0014]优选的，所述凸出壁为空心的柱状结构，所述凸出壁的高度为0.1~20mm，壁厚为 0.1~1.0_，半径为0.1~5.0mm。
[0015]优选的，酶标板的面积为10~200X5~200mm酶标板，每个酶标板上优选的包括1 ~500个酶标板孔。
[0016] 本发明的有益效果：
[0017] 本发明提供的酶标板包括若干酶标板孔，每个酶标板孔包括半球状底部、与所述 半球状底部上边缘相接的漏斗形结构和与所述漏斗形结构上边缘相接的凸出壁。在本发明 提供的酶标板中，所述半球状底部结构可以增大酶标板的表面积，从而增加目标物质与固 相表面靶分子接触的机会，同时可以用较少的样本量检测目标物质的含量;所述的漏斗形 结构的设置连接酶标板孔的底部和上部，进一步增大酶标板孔的表面积;所述的凸出壁的 设置可防止酶标板孔与酶标板孔之间交叉污染。
【附图说明】
[0018] 图1为现有技术公开的酶标板孔的立体图；
[0019]图2为本发明实施例1中的酶标板孔结构的俯视图（2A)和主视图（2B);
[0020]图3为实施例1中的酶标板孔结构的剖视图；
[0021 ]图4为实施例1中的酶标板孔结构的立体图；
[0022]图5为实施例1中20孔及28孔酶标板的俯视图（5A-1、5B-1)和侧视图（5A-2、5B-2); [0023]图6为实施例1和2中20孔及28孔酶标板的剖视图（6A、6B);
[0024]图7为实施例1和2中酶标板的立体图（7A、7B);
【具体实施方式】
[0025]本发明提供了一种酶标板，包括若干酶标板孔，所述的酶标板孔包括三个组成部 分:每个酶标板孔包括半球状底部、与所述半球状底部相接设置于中部的漏斗形结构和与 所述漏斗形结构相接设置于上部的凸出壁。
[0026]本发明中，对所述的酶标板的面积为10~200X5~200mm酶标板，每个酶标板上优 选的包括1~500个酶标板孔，更优选的包括10~400个酶标板孔，最优选的为包括16或40个 酶标板孔。所述酶标板上酶标板孔的密度优选的为〇. 2~8.0个/cm2，更优选的为0.5~4个/ cm2。本发明对所述酶标板孔的排列方式没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的酶标 板中酶标板孔排列的方式即可;在本发明的实施例中，所述酶标板孔优选的采用矩形阵列 排列，更优选采用4 X 5矩形阵列排列的20孔酶标板或4 X 7矩形阵列排列的28孔酶标板。
[0027]本发明中，酶标板孔的结构如图3所示，每个酶标板孔包括半球状底部，底部设置 为半球状结构增加了酶标板的表面积，从而增加目标物质与固相表面靶分子接触的机会， 同时可以用较少的样本量检测目标物质的含量。在本发明中，所述的半球状底部优选包括 初级半球体结构(2)和位于初级半球体结构内部向内凸起的次级半球体结构(3)。本发明中 所述的初级半球体结构的直径优选的为0.2~10_，更优选的为2~8mm，最优选的为6-7_。
[0028] 本发明优选的在每个初级半球体结构内部设置向内凸起的次级半球体结构，每个 初级半球体结构中次级半球体的个数优选的为3~50个，更优选的为5~15个，最优选的为7 ~9个;在本发明中所述次级半球体结构平均分布于初级半球体结构的内表面。
[0029] 本发明中所述的次级半球体结构的直径优选的为0.1~5mm，更优选的为0.5~ 3mm，最优选的为1~2mm。在本发明中所述相邻次级半球体结构间的弧长优选的为0.1~ 2 · 0mm，本发明中相邻次级半球体结构间的孔隙优选的为0 · 1~1 · 0mm，更优选的为0 · 4~ 0 · 6mm，最优选的为0 · 5mm。在本发明中，所述相邻次级半球体结构间的孔隙为酶标板孔的液 体流动通道，从而允许液体在酶标板孔内部自由流动，增加目标物质与固相表面靶分子接 触的机会。
[0030] 在本发明中，每个酶标板孔包括与所述半球状底部上边缘相接的漏斗形结构(4)， 所述的漏斗形状结构设置于酶标板孔的中部，向上与所述凸出壁(7)的下边缘相连接。在本 发明中，所述漏斗形结构由漏斗形结构下部的空心球缺结构(5)和漏斗形结构上部的空心 圆台（6)两部分组成;所述的空心球缺状结构的下边缘与酶标板孔底部的半球状底部的上 边缘连接;所述的空心圆台的上边缘与所述凸出壁的下边缘连接。
[0031] 在本发明中，所述的空心球缺的直径优选的为0.2~10mm，更优选的为3~8mm，最 优选的为4.8mm;所述的空心球缺的高度优选的为0.1~5.0mm，更优选的为0.5~3mm，最优 选的为〇 · 8mm;所述的空心球缺的壁厚优选的为0 · 1~1 · 0mm，更优选的为0 · 3~0 · 8mm，最优 选的为〇.7mm
[0032] 在本发明中，漏斗形结构上部的空心圆台的高度优选的为0.2~mm，更优选的0.3 ~3mm，最优选的为0 · 4mm;所述空心圆台的壁厚优选的为0 · 1~1 · 0mm，更优选的为0 · 2~ 0 · 8mm，最优选的为0 · 7mm;所述空心圆台的上口半径优选的为0 · 1~5 · 0mm，更优选的为1~ 4mm;下口半径优选的为0.1~5mm，更优选的为1~4mm。
[0033] 在本发明中，与漏斗形结构上边缘相接且设置于上部的凸出壁优选的为空心的柱 状结构，所述凸出壁的高度优选的为〇. 1~20mm，更优选的为0.5~5.0,最优选的为1.0mm; 所述凸出壁的壁厚优选的为0 · 1~1 · 〇mm，更优的为0 · 3~0 · 8mm，最优选的为0 · 7mm;所述凸 出壁空心的柱状结构的半径优选的为0.1~5.0mm，更优选的为1.0~4.0;本发明中凸出壁 的作用是防止实验过程中酶标板孔之间的交叉污染。
[0034] 在本发明中，每个酶标板孔中半球状底部内壁与所述漏斗形结构的内壁平滑相 连，所述漏斗形结构上边缘内壁与所述的凸出壁的内壁平滑相连。
[0035] 下面结合实施例对本发明提供的酶标板进行详细的说明，但是不能把它们理解为 对本发明保护范围的限定。
[0036] 实