胎膜早破便捷检测试纸条及胎膜早破便捷检测试纸的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及免疫检测技术领域，特别涉及到胎膜早破便捷检测试纸条及其组成的胎膜早破便捷检测试纸。
【背景技术】
[0002]胎膜在临产前破裂称胎膜早破，俗称破水。妊娠满37周后胎膜早破率10% ;妊娠不满37周的胎膜早破率2.0%-3.5%，发生率约占分娩总数的6?12%。胎膜早破常致早产、围产儿死亡、宫内及产后感染率升高。
[0003]诊断胎膜早破的金标准是羊膜腔内注入染料(如美蓝)，若阴道内有蓝色液体流出即可诊断，但该法临床很难操作，对患者造成一定的痛苦，故临床应用很少。目前临床上诊断胎膜早破大多通过病史、阴道液PH值、羊水结晶等检查而得出诊断。但阴道液pH值及羊齿状结晶法，均受尿液、精液、血液的影响，致使准确度和灵敏度均较低，研宄测得羊齿状结晶联合pH值法阳性的灵敏度仅为51.0%左右。
[0004]IGFBP-1即胰岛素样生长因子结合蛋白_1的检测是目前检测胎膜早破准确性最高的方法，准确率可达90%。“检测限”指某一分析方法在给定的可靠程度内可以从样品中检测待测物质的最小浓度或最小量。所谓检测是指定性检测，即断定样品中确定存在有浓度高于空白的待定物质。
[0005]目前IGFBP-1使用的检测限是大于等于25ng/ml。临床使用时，需要通过扩阴器取阴道后穹窿或宫颈分泌物进行测定；家庭自检使用时，需要使用棉签拭子深入阴道5cm至7cm取样；方可达到较高的准确率。取样不便且给使用者造成痛苦，极大的限制了其应用。
[0006]AFP即a FP，全称a-fetoprotein，中文名称甲胎蛋白。它是一种糖蛋白，正常情况下，这种蛋白主要来自胚胎的肝细胞，胎儿出生后约两周甲胎蛋白从血液中消失。在怀孕状态下，母亲血液和羊水中的甲胎蛋白浓度随着孕周的增加而增长，而到了妊娠末三个月开始逐渐减少。孕妇阴道分泌液中甲胎蛋白已经被证实可以用于诊断胎膜早破，尤其是在妊娠中三个月。
[0007]免疫胶体金技术是上世纪90年代发展起来的一种简便、快速、准确的检测技术，其原理与双夹心ELISA相似，不同的是使用胶体金结合蛋白质形成的复合物作为探针，且所使用的试剂事先都被固定在具有微孔的硝酸纤维素膜上。使用时将一端置于检测液中，硝酸纤维素膜可被液体穿过，若检测液中含有相关的抗原或抗体。在检测区就会出现淡红色线条。否则为阴性。该技术问世以来已在临床上不断被采用，该方法不依赖于精密的仪器、不依赖于熟练的技术人员、操作步骤简捷，比起目前常用的酶联免疫法具有更大的优点。整个反应过程约在5分钟内就可以完成。但胶体金免疫检测试纸在运用上具有以下缺点:单纯依靠显色深浅来判断结果的胶体金快速免疫检测试纸，只能作定性或半定量检测而不能做定量检测；由于方法学的限制，只使用胶体金为标记物的快速免疫检测试纸，其灵敏度较低；对于某些抗原含量较低的样品，由于胶体金免疫检测试纸受灵敏度限制，会造成假阴性，因而检出率较低。
【发明内容】
[0008]为了解决现有技术存在的上述问题，本实用新型提供了一种取样便捷无痛苦、应用范围广泛、灵敏度高、检出率高、同时可以实现一样多检、省时省力、方便快捷的胎膜早破便捷检测试纸条以及其组成的胎膜早破便捷检测试纸。
[0009]本实用新型提供的胎膜早破便捷检测试纸条，包括依次相互搭接的样品垫、胶体金垫、第一 NC膜和吸水垫，所述第一 NC膜上设置有第一检测线和第二检测线，所述第一检测线上包被有抗IGFBP-1单克隆抗体，所述第二检测线上包被有抗AFP单克隆抗体。
[0010]优选的，所述第一检测线上包被的抗IGFBP-1单克隆抗体对IGFBP-1的检测限为4ng/ml-6ng/ml (优选5ng/ml )，所述抗AFP单克隆抗体对AFP的检测限为150ng/ml。进一步优选的，所述第一 NC膜上还设置有第三检测线，所述第三检测线上包被有抗IGFBP-1单克隆抗体，所述第三检测线上包被的抗IGFBP-1单克隆抗体对IGFBP-1的检测限为25ng/ml ο
[0011]另一种IGFBP-1和AFP检测限的优选方式，所述抗IGFBP-1单克隆抗体对IGFBP-1的检测限为10ng/ml，所述抗AFP单克隆抗体对AFP的检测限为5ng/ml或者2.5ng/ml。
[0012]优选的，所述第一 NC膜上还设置有第一质控线，所述第一质控线上包被有监控所述胎膜早破便捷检测试纸条质量的多抗抗体。
[0013]半导体量子点，简称量子点(quantum dots，QDs)，顾名思义，即材料的尺寸在三维空间进行约束并达到一定的临界尺寸(可抽象为一个点)，因此其表现出许多独特的光、电特性。1998年，美国加州伯克利大学的Alivisatos小组和印第安纳大学Nie小组同时提出荧光量子点可应用于生物标记这一思想，开创了荧光量子点在生物技术中研宄应用的先河。《量子点的应用一一一种新型的荧光检测技术》(徐飞，丁双阳；中国农业大学动物医学院)一文系统的介绍了现阶段量子点荧光检测技术的研宄进展。
[0014]本实用新型提供的胎膜早破便捷检测试纸包括共用一个样品垫的多条前述本实用新型的胎膜早破便捷检测试纸条。
[0015]优选的方案是，所述多条胎膜早破便捷检测试纸条还共用一个吸水垫。进一步优选的，多条胎膜早破便捷检测试纸条之间可以是并排排列，也可以是以背靠背的结构形式排列。
[0016]优选的方案是，该胎膜早破便捷检测试纸还包括一条与所述胎膜早破便捷检测试纸条共用一个样品垫的胎膜早破荧光量子点试纸条。进一步优选的，该胎膜早破便捷检测试纸包括一条胎膜早破便捷检测试纸条和一条胎膜早破荧光量子点试纸条；所述胎膜早破便捷检测试纸条和所述胎膜早破荧光量子点试纸条共用一个样品垫，且共用一个吸水垫。进一步优选的，所述胎膜早破荧光量子点试纸条具体包括依次相互搭接的样品垫、量子点垫、第二 NC膜和吸水垫，所述第二 NC膜上设置有检测线一，所述第二 NC膜上的检测线一上包被有抗IGFBP-1单克隆抗体。进一步解释，量子点垫为包被有活化后与抗IGFBP-1单克隆抗体共价结合的量子点的玻璃纤维膜。
[0017]优选的方案是，所述第二 NC膜上包被的抗IGFBP-1单克隆抗体对IGFBP-1的检测限为4ng/ml-6ng/ml，所述第二 NC膜上还设置有质控线一，所述质控线一上包被有监控所述胎膜早破荧光量子点试纸条质量的多抗抗体。
[0018]优选的，所述第一 NC膜或第二 NC膜上，相邻两条并列的检测线和检测线之间或者相邻的检测线和质控线之间的间距均为0.8cm。
[0019]应当明确的是，本实用新型技术方案的实现不依赖于胎膜早破便捷检测试纸条和胎膜早破荧光量子点试纸条的具体制备方法。任意一种现有技术胎膜早破便捷检测试纸条和胎膜早破荧光量子点试纸条的制备方法，只要选用与IGFBP-1和/或AFP适配的抗体即可实现本实用新型的技术方案。
[0020]与现有技术相比，本实用新型的有益效果如下:
[0021]其一，孕妇阴道分泌液中甲胎蛋白可以用于诊断胎膜早破，尤其是在妊娠中三个月灵敏度特异性高。由此，本实用新型同时选用抗IGFBP-1单克隆抗体和抗AFP单克隆抗体相互对照，能够得到更为准确的胎膜早破检测结果。
[0022]其二，本实用新型将IGFBP-1和AFP的检测限分别控制在5ng/ml和150ng/ml，达到的效果是:提高了 IGFBP-1检测的灵敏度和AFP检测的特异性，特别有利于妊娠中三个月胎膜早破的诊断。将IGFBP-1的检测限控制在10ng/ml，与此同时，将AFP的检测限控制在5ng/ml或2.5ng/ml，达到的效果是:提高了 IGFBP-1检测的特异性和AFP检测的灵敏度，有利于妊娠末三个月胎膜早破的诊断，尤其是孕周大于等于39周的孕妇。
[0023]其三，本实用新型的胎膜早破便捷检测试纸条和胎膜早破便捷检测试纸将抗IGFBP-1单克隆抗体对IGFBP-1的检测限限定为4ng/ml_6ng/ml，达到的效果是，只需在阴道口取样进行检测即可快速方便的判断是否发生胎膜早破。准确率可达到90%以上。相比较与现有技术的胎膜早破诊断方法，不仅准确率高，并且使用方便快捷，临床使用无需窥阴器后穹窿取样，并可真正实现家庭自检，适用范围更为广泛。
[0024]其四，本实用新型的胎膜早破便捷检测试纸条和胎膜早破便捷检测试纸上的检测线设置两条检测限不同的抗IGFBP-1单克隆抗体。检测限为4ng/ml-6ng/ml的检测线可以提示亚临床胎膜早破，提高临床胎膜早破预警时间，检测限为24ng/ml-26ng/ml的检测线能够进一步确证临床发生胎膜早破，能够起到相互对照验证的作用。同时，还能够使检测结果更为准确可靠。
[0025]其五，本实用新型的胎膜早破便捷检测试纸条和胎膜早破便捷检测试纸在胶体金半定量检测的基础上引入了荧光量子点检测技术，定性检测方面:与胶体金检测技术互补，检测灵敏度高；荧光量子点检测条即使对于目标抗原含量较低的样品也能准确检出，检出率高，不易出现假阴性的现象。
[0026]其六，本实用新型的胎膜早破便捷检测试纸条和胎膜早破便捷检测试纸，定量检测方面:利用荧光量子点检测的特点，能够得到更为精确的定量检测结果；同时，胶体金免疫检测条检测与荧光量子点检测条检测相互配合，可以避免出现因任一检测条失效而导致的错检现象，且两者互相参照也可以得到更为准确的定量检测结果。
[0027]其七，本实用新型的胎膜早破便捷检测试纸条和胎膜早破便捷检测试纸引入了荧光量子点检测条，荧光量子点检测除了拥有荧光材料的高灵敏性，同时具有激发光谱宽且连续分布，发射光谱窄而对称，颜色可调，光化学稳定性高，荧光寿命长等优点。
【附图说明】
[0028]图1是本实用新型的