一种检测阿莫西林的试纸的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型属于食品安全诊断领域，具体涉及一种用于检测阿莫西林的试纸。
【背景技术】
[0002]牛奶中阿莫西林(amoxicillin，AMX)的残留，既导致敏感人群的过敏反应和细菌耐药性的增强，也会影响奶制品的品质和产量，给乳品加工业带来重大经济损失。阿莫西林残留是当前欧盟和北美等国家对进口动物性食品的必检项目之一。欧盟要求在牛奶中阿莫西林的最高限量为4yg/kg。国内常用的方法是微生物法、高效液相色谱法、色/质联用法、ELISA法等。但这些方法测定的时间、程序复杂且费用较高。
[0003]鉴于目前尚无快速的检测方法，本实用新型的目的是提供一种可用于快速检测阿莫西林的试纸以及一种可用于快速检测阿莫西林的试纸盒，所述试纸和试纸盒具有方便快捷、操作简单、结果准确等优点。
【实用新型内容】
[0004]本实用新型的一个目的是提供一种快速检测阿莫西林的试纸，本实用新型所述快速检测阿莫西林的试纸具有方便快捷、操作简单、结果准确等优点，适于临床快速诊断。
[0005]本实用新型的技术方案是:
[0006]—种用于检测阿莫西林的试纸，包括支撑垫片1，位于所述支撑垫片I上的硝酸纤维素膜2，所述硝酸纤维素膜2的一端上方层叠连接吸水垫3，另一端上方层叠连接样本垫片4，其特征在于，所述硝酸纤维素膜2中间部位设有检测线5，所述检测线5包被有阿莫西林抗原，检测线5的一边设有控制线6，所述控制线6包被有羊抗鼠抗体。
[0007]进一步地，上述试纸外还包括一外壳10，只露出样本垫片4、硝酸纤维素膜2上的检测线5和控制线6。
[0008]进一步地，所述检测线5和控制线6为平行设置。
[0009]本实用新型所述试纸结合一酶标板微孔使用，所述微孔含有金标记的阿莫西林抗体，检验时将所述试纸的样本垫片一端插入到所述微孔中，样本中的阿莫西林抗原首先与微孔中的阿莫西林抗体发生免疫反应，形成免疫复合物。
[0010]本实用新型所述的试纸条具有高灵敏度和方便检测的优点。
[0011]本实用新型所述的快速检测阿莫西林的试纸条的工作原理是:
[0012]采用免疫反应原理，通过间接竞争法制备而成。本实用新型所述试纸结合酶标板微孔使用，所述微孔含有金标记的阿莫西林抗体，检验时将试纸插入到所述微孔中，样本中的阿莫西林抗原首先与微孔中的阿莫西林抗体发生免疫反应，形成免疫复合物。其后免疫复合物随着样本在硝基纤维素膜上层析流动，当免疫复合物层析至硝基纤维素膜上的检测线(T检测线)时，与预先包被在硝基纤维素膜上的抗阿莫西林抗原发生反应，如果牛奶中的阿莫西林越多，检测线上的复合物越少，在能检到的灵敏度范围内检测线不显色，相反，如果牛奶中没有阿莫西林，则抗体与检测线反应，T线显色。因控制线(C线)包被有羊抗鼠抗体，均会显色。
[0013]当反应结束后，利用胶体金免疫分析仪(深圳华英生物技术有限公司)将控制线和检测线的光密度进行分析，并将所分析得到的结果进行运算，从而得到相对光密度值(RI)。然后检测仪根据已预先设置在检测仪内的标准曲线对阿莫西林的浓度进行计算并显示结果，以ng/mL为单位表示。
【附图说明】
[0014]图1是本实用新型所述快速检测阿莫西林的试纸的一种优选实施方式的结构示意图。
[0015]其中，1:支撑垫片，2:硝酸纤维素膜，3:吸水垫，4:样本垫片，5:检测线，6:控制线。
[0016]图2是本实用新型所述快速检测阿莫西林的试纸盒的一种优选实施方式的结构示意图。
[0017]其中，10:外壳，4:样本垫片，5:检测线，6:控制线。
【具体实施方式】
[0018]以下结合附图对本实用新型所述快速检测阿莫西林的试纸进行详细说明，不能理解为是对本实用新型的限制。以下实施例中所使用的材料和试剂除特别说明外，均为普通市售。
[0019]【实施例1】制备快速检测阿莫西林的试纸
[0020]如图1所示的试纸结构，包括支撑垫片1，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜2，所述硝酸纤维素膜的一端上方层叠连接吸水垫3，硝酸纤维素膜的一端上方层叠连接样本垫片4，所述硝酸纤维素膜2中间部位检测线5包被有阿莫西林抗原，检测线一边设有控制线6，控制线包被有羊抗鼠抗体。
[0021]其中，硝酸纤维素膜2在试纸中用于固定包被抗原，同时也是免疫反应的发生处；检测线5是将阿莫西林抗原使用0.01M*PBS、甲醇等缓冲液稀释到lmg/ml的浓度，取0.7ul/cm划线于所述硝酸纤维素膜2上，干燥即得；控制线6是将羊抗鼠抗体使用0.01M*PBS、甲醇等缓冲液稀释到1.2mg/ml的浓度，取0.7ul/cm划线于所述硝酸纤维素膜2上，干燥即得。
[0022]其中，所述样品垫片4的原材料为滤血膜，不需要处理直接使用。
[0023]将上述各组成部件按图1所示结构粘贴在支撑垫片I上，获得快速检测阿莫西林的试纸。
[0024]金标微孔的制作方法:
[0025]标记阿莫西林抗体:用0.0lM pH7.4PBS稀释，将阿莫西林抗体稀释到lmg/mL，同时加入0.2M碳酸钾溶液调PH值，10% BSA标记胶体金，制成金标抗体。
[0026]金标微孔:上述取标记好的金标抗体Sul/孔，加入酶标微孔中，干燥即得。
[0027]【实施例2】用本实用新型所述试纸快速检测阿莫西林
[0028]取本实用新型优选的一种快速检测阿莫西林的试纸，如图1所示，包括支撑垫片1，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜2，所述硝酸纤维素膜的一端上方层叠连接吸水垫3，硝酸纤维素膜2的另一端上方层叠连接样本垫片4，所述硝酸纤维素膜2中间部位检测线5包被有阿莫西林抗原，检测线一边设有控制线6，控制线包被有羊抗鼠抗体。按以下步骤进行检测:
[0029]I)取出如实施例1中所述的金标微孔，将微孔放置于干净桌面上，吸取待测样品于微孔中充分混匀。
[0030]2)将试纸条(样品垫一端)插入混匀后的微孔中反应。
[0031]3)判读，将所述试纸置于胶体金免疫分析仪，(型号HYYQ-OOI，深圳华英生物技术有限公司)中判定结果
[0032]【实施例3】用本实用新型所述试纸盒快速检测阿莫西林
[0033]取本实用新型优选的一种快速检测阿莫西林的试纸，如图1所示，包括支撑垫片1，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜2，所述硝酸纤维素膜的一端上方层叠连接吸水垫3，硝酸纤维素膜2的另一端上方层叠连接样本垫片4，所述硝酸纤维素膜2中间部位检测线5包被有阿莫西林抗原，检测线一边设有控制线6，控制线包被有羊抗鼠抗体；如图2所示所述试纸外还包括一外壳10，只露出样本垫片4、硝酸纤维素膜2上的检测线5和控制线6。按以下步骤进行检测:
[0034]I)取出如实施例1中所述的金标微孔，将微孔放置于干净桌面上，吸取待测样品于微孔中充分混匀。
[0035]2)将步骤I获得的混合液吸到样品垫上，反应。
[0036]3)判读，将所述试纸置于胶体金免疫分析仪，(型号HYYQ-OOI，深圳华英生物技术有限公司)中判定结果。
【主权项】
1.一种用于检测阿莫西林的试纸，包括支撑垫片(I)，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜(2)，所述硝酸纤维素膜(2)的一端上方层叠连接吸水垫(3)，另一端上方层叠连接样本垫片(4)，其特征在于，所述硝酸纤维素膜(2)中间部位设有检测线(5)，所述检测线(5)包被有阿莫西林抗原，检测线(5)的一边设有控制线(6)，所述控制线(6)包被有羊抗鼠抗体。2.如权利要求1所述的试纸，其特征在于，所述试纸外还包括一外壳(10)，只露出样本垫片(4)、硝酸纤维素膜(2)上的检测线(5)和控制线(6)。3.如权利要求2所述的试纸，其特征在于，所述检测线(5)与控制线(6)为平行设置。
【专利摘要】本实用新型公开了一种用于检测阿莫西林的试纸，所述试纸包括支撑垫片1，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜2，所述硝酸纤维素膜2的一端上方层叠连接吸水垫3，硝酸纤维素膜2的一端上方层叠连接样本垫片4，所述硝酸纤维素膜2中间部位检测线5包被有阿莫西林抗原，检测线5一边设有控制线6，所述控制线6包被有羊抗鼠抗体。
【IPC分类】G01N33/558
【公开号】CN204882565
【申请号】CN201520459045
【发明人】漆传凤, 何询, 张金超, 石代泽, 杨宏, 赵宇
【申请人】深圳华英生物技术有限公司
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年6月30日