具有促进胶原蛋白合成活性的化合物在抗衰老化妆品中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种具有促进胶原蛋白合成活性的化合物 在抗衰老化妆品中的应用。
【背景技术】
[0002] 皮肤是覆盖在人体表面最大的器官，由于直接与外界环境接触，受到氧化，干燥和 紫外线等种种紧张因素的刺激，故非常容易受到损伤。同时，又因为年龄，饮食和生活习惯 等内部因素的影响，导致皮肤功能的衰退和遗传畸化，从而使得皮肤更加容易老化。由于皮 肤是处于人体的最外侧，一目了然地表现了人体的美。所以，抗衰老化妆品成了广大女性消 费者迫切需求的产品之一。
[0003] 皮肤老化的决定因素在于内外环境对真皮层内胶原蛋白的破坏。皮肤中胶原蛋白 占72%，真皮中80%是胶原蛋白，它的三维螺旋结构如水库的堤坝一样，锁住皮肤深层水分， 使皮肤光泽滋润、柔滑。因此被美容专家称为"皮肤的软黄金"。胶原蛋白在皮肤中如弹簧 般支撑着皮肤，一旦发生断裂，真皮组织会塌陷，出现皱纹，皮肤就会松弛、下垂；皮肤出油 后，撑大的毛孔由于弹性不能恢复而变得越来越大；自由基、黑色素也会在肌肤空洞和缝隙 里越积越多。胶原蛋白由皮肤中的成纤维细胞生成，存在于细胞外基质中，为皮肤提供结构 的稳定性，为结缔组织提供耐久性及粘结组织以支持细胞连接、细胞增生和诱导未分化细 胞分化等作用。人体在年轻时能够制造许多胶原蛋白，但它们的产量会随着年龄增长而减 少。有研究表明，婴儿的皮肤，真皮中胶原蛋白的含量高达80%，所以娇嫩、水润、细腻、无暇、 富有弹性。随着年龄的增长，到18-22岁胶原蛋白开始流失，25岁女人的皮肤，真皮中胶原 蛋白的含量为65%，眼角、嘴角出现皱纹，弹性下降，皮肤干燥。30-35岁眼角处一定出现细 纹，此时你的胶原蛋白流失20%左右，毛孔更粗大，色斑、皮肤干涩、晦暗都可能出现；45-50 岁嘴角两侧、额头已出现很深的皱纹，肌肤开始塌陷、下垂、甚至脸形轮廓都发生开裂，这时 皮肤已经流失近40%左右的胶原蛋白。另外，皮肤老化80%的因素来自日光紫外线，紫外线 能穿透真皮深层，破坏真皮的弹性纤维和胶原蛋白，受紫外线的影响体内的罗氨酸转化为 了黑色素，是因为真皮内的胶原蛋白受到破坏。
[0004] 为寻找一种预防和减轻皮肤皱纹的方法，人们已经进行了广泛的研究，并阐明了 胶原蛋白的重要作用。因此，人们想当然的认为，给皮肤补充胶原蛋白就能减轻皱纹、增加 皮肤弹性和强度的作用。现已开发出一些含胶原蛋白的化妆品，但是这些化妆品涂抹于皮 肤表面之上，高分子量的胶原蛋白难以透皮吸收，所以它们并不能改善皮肤的外观。因此新 的抗皮肤衰老的方法的寻找仍然吸引着很多研究者，中药以其独特的优势，在抗皮肤老化 领域的研究工作得到广泛开展。但是市面上抗皮肤老化的功效型化妆品，抗衰老效果却不 理想，有待于进一步提商。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种具有促进胶原蛋白合成活性的化合物在抗衰老化妆 品中的应用。
[0006] 基于上述目的，本发明采取了如下技术方案： 具有促进胶原蛋白合成活性的化合物在抗衰老化妆品中的应用，所述的化合物为桃叶 珊瑚苷或京尼平苷酸。
[0007] 所述桃叶珊瑚苷或京尼平苷酸的归一化含量达到95%以上。
[0008] 所述化合物在化妆品中的添加量为0. 005~0.Olwt%。
[0009] 所述的化妆品为液剂、乳剂或膏霜剂。
[0010] 本发明的桃叶珊瑚苷和京尼平苷酸这两种化合物的提取方法简单，提取物的纯度 高，并且这两种化合物均可以应用到化妆品中，达到促进皮肤胶原蛋白的合成，延缓和抑制 皮肤衰老的效果。
【附图说明】
[0011] 图1桃叶珊瑚苷的1HNMR; 图2桃叶珊瑚苷的13CNMR; 图3桃叶珊瑚苷的MS; 图4京尼平苷酸的1HNMR; 图5京尼平苷酸的13CNMR; 图6京尼平苷酸的MS; 图7桃叶珊瑚苷纯度图； 图8京尼平苷酸的纯度图； 图9是实施例5空白组小鼠的皮肤内部组织形态学变化图； 图10是实施例5模型组小鼠的皮肤内部组织形态学变化图； 图11是实施例5VE组小鼠的皮肤内部组织形态学变化图； 图12是实施例5桃叶珊瑚苷低剂量组小鼠的皮肤内部组织形态学变化图； 图13是实施例5桃叶珊瑚苷中剂量组小鼠的皮肤内部组织形态学变化图； 图14是实施例5桃叶珊瑚苷高剂量组小鼠的皮肤内部组织形态学变化图； 图15是实施例5京尼平苷酸低剂量组小鼠的皮肤内部组织形态学变化图； 图16是实施例5京尼平苷酸中剂量组小鼠的皮肤内部组织形态学变化图； 图17是实施例5京尼平苷酸高剂量组小鼠的皮肤内部组织形态学变化图； 图18是试验例5模型组小鼠皮肤的减轻皱纹效果图； 图19是试验例5VE组小鼠皮肤的减轻皱纹效果图； 图20是试验例5桃叶珊瑚苷低剂量组小鼠皮肤的减轻皱纹效果图； 图21是试验例5桃叶珊瑚苷中剂量组小鼠皮肤的减轻皱纹效果图； 图22是试验例5桃叶珊瑚苷高剂量组小鼠皮肤的减轻皱纹效果图； 图23是试验例5京尼平苷酸低剂量组小鼠皮肤的减轻皱纹效果图； 图24是试验例5京尼平苷酸中剂量组小鼠皮肤的减轻皱纹效果图； 图25是试验例5京尼平苷酸高剂量组小鼠皮肤的减轻皱纹效果图； 图26是实验组人体手部皮肤皱纹变化图； 图27是对照组人体手部皮肤皱纹变化图。
【具体实施方式】
[0012] 以下结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步详细说明，但本发明的保护范 围并不局限于此。
[0013] 实施例1桃叶珊瑚苷和京尼平苷酸的制备方法 步骤包括： (1) 取干燥的杜仲雄花，加入90V%乙醇溶液，料液质量比1:14,超声提取3次，每次 30min，滤液合并，除去乙醇； (2) 去除乙醇后用大孔吸附树脂吸附，所述的大孔吸附树脂优选为H103 ;水洗除去糖 类和蛋白质等除杂后，再用体积浓度为40v%的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩冷冻干燥； (3) 取冻干物，以洗脱剂溶解，上样量25mg/mL装柱上样，三氯甲烷-甲醇（V:V=5:1)洗 脱剂，流速2BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，得到粗品； (4) 将步骤（3)的粗品配成lOOmg/mL的甲醇溶液，采用制备型高效液相色谱法纯化， 流动相为甲醇：水（V:V=10:90)，进样量为5mL，检测波长为206nm，收集保留时间8. 28分钟 的馏分，合并，减压浓缩，冷冻干燥，得到纯度大于95%的桃叶珊瑚苷，10分钟后，检测波长 变换为254nm，收集保留时间为18. 84分钟的馏分，减压浓缩、冷冻干燥，得到纯度大于98% 的京尼平苷酸。桃叶珊瑚苷和京尼平苷酸的NMR和MS图，见图1-6,桃叶珊瑚苷和京尼平苷 酸化合物的纯度图，见图7-8。
[0014] 实施例2桃叶珊瑚苷或京尼平苷酸体外促进皮肤成纤维细胞的增殖 取对数生长期ESF-I细胞，弃去旧培养液，加入胰酶，消化(显微镜下观察细胞形态）充 分后，加入含有10wt%胎牛血清的DMEM培养液（DMEM干粉购自Gibco公司，配制方法参见其 说明书)，用弯头吸管反复吹打数次，使细胞脱离瓶壁，均匀悬浮于培养液中装于离心管中， 1000r/min离心5min，弃去上清液；加入适量含有10wt%胎牛血清的DMEM培养液，吹打数 次使细胞悬浮在培养液中。将细胞液置于无菌皿中吹打均匀，细胞计数板计数调整细胞浓 度为3XIO4个/mL。8孔微量加样器点板100iiL/孔，边缘孔用无菌PBS(0.01M)填充， 移入培养箱中培养，待细胞完全贴壁生长，使用微量加样器依次加药10UL/孔（浓度分别 为：30，20，10，5，0.5剛)，对照组加入相同体积的PBS(O.OIM)，加药48h后，在生物安 全柜中避光加入Img/mLMTT，50iiL/孔。将加药后的细胞培养板放入培养箱中继续培养 4h后弃上清液，用微量加样器加入DMSO(二甲基亚砜）100iiL/孔，置摇床振摇10min， 使结晶充分溶解。然后在酶标仪上490nm波长处测定吸光度（A)值，并计算细胞存活率： (实验组A值-空白A值）/(对照组A值-空白A值）X100%。以没有添加活性成分的 样品作为对照组，其细胞存活率为100%，实验结果见下表1。
[0015] 表1化合物促进成纤维细胞的增殖（%)
【主权项】
1. 具有促进胶原蛋白合成活性的化合物在抗衰老化妆品中的应用，其特征在于，所述 的化合物为桃叶珊瑚苷或京尼平苷酸。
2. 根据权利要求1所述的具有促进胶原蛋白合成活性的化合物在抗衰老化妆品中的 应用，其特征在于，所述桃叶珊瑚苷或京尼平苷酸的归一化含量达到95%以上。
3. 根据权利要求2所述的具有促进胶原蛋白合成活性的化合物在抗衰老化妆品中的 应用，其特征在于，所述化合物在化妆品中的添加量为〇. 005~0.0 lwt%。
4. 根据权利要求1至3任一所述的具有促进胶原蛋白合成活性的化合物在抗衰老化 妆品中的应用，其特征在于，所述的化妆品为液剂、乳剂或膏霜剂。
【专利摘要】具有促进胶原蛋白合成活性的化合物在抗衰老化妆品中的应用，属于化妆品技术领域，所述的化合物为桃叶珊瑚苷或京尼平苷酸。本发明的桃叶珊瑚苷和京尼平苷酸这两种化合物的提取方法简单，提取物的纯度高，并且这两种化合物均可以应用到化妆品中，制成液剂、乳剂或膏霜剂，达到促进皮肤胶原蛋白的合成，延缓和抑制皮肤衰老的效果。
【IPC分类】A61Q19-08, A61K8-60
【公开号】CN104644461
【申请号】CN201510034002
【发明人】丁艳霞, 李钦, 赵芬琴, 杜丽敏, 徐艳茹, 胡倩影, 田己鑫
【申请人】河南大学
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2015年1月23日