一种干细胞眼霜及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种抗衰老的护肤品，具体为一种干细胞眼霜及其制备方法。属于化 妆品技术领域。
【背景技术】
[0002] 在皮肤抗衰老的化妆品，有多种方法，比如通过激素、植物提取物等配方对皮肤进 行去皱处理，然而这些方法不能从根本上达到抗衰老的作用，激素使用对人体有危害，并且 只能取得短期效果，长期使用加剧皮肤老化，而植物提取物的效果不明显，需要长期使用。
[0003]随着生活水平的不断提高，人们对健康尤其是皮肤的保养越来越受到重视。皮肤 组织是人体最大组织器官，覆盖在人体表面，阻隔自然界一切有害物质对生命机体产生的 损害作用。但是，随着年龄的增加，皮肤组织器官的功能逐渐老化，从美学观点看，严重影响 人们对生命的热情；从生理学的角度看，影响人体内部器官的有效保护。皮肤老化的主要原 因是，在新陈代谢过程中需要的各种营养物质数量和质量不能从饮食中得到生理性满足， 从而导致生命细胞核内的生命遗传物质载体DNA的合成原料的数量逐渐减少，最终导致其 调空合成的蛋白质种类和数量减少，细胞代谢能力随之下降，寿命相对缩短。皮肤过度衰老 现象的表现是：皮肤松弛、皱纹增多加深、毛孔增大、皮肤纹理变粗变乱、皮肤弹性下降等。 目前，市面上用于护肤的产品大多保湿，功效有限。
[0004]人类脐带间充质干细胞（humanumbilicalmesenchymalstemcells，HUMSC)和 胎盘干细胞（placentalstemcell，PSC)来源于妇女分娩时的废弃的脐带和胎盘组织。 脐带内含二条脐动脉、一条脐静脉，在动静脉之间含有特殊的胚胎粘液样结缔组织-华尔 通氏胶（WhartonpsJelly)，从华尔通氏胶分离得到的基质细胞即为人脐带间充质干细胞 (humanumbilicalmesenchymalstemcell，HUMSC)。胎盘是胎儿从母体吸取营养的场所， 分为羊膜层、绒毛层及脱基底膜层。研究表明，HUMSC和PSC具有多向分化潜能和可塑性，可 分化成三个胚层来源的组织细胞，如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、胰岛细胞、神经细胞、 心肌细胞、生殖细胞（如精原细胞、卵母细胞等），并能分泌丰富的营养因子。这些丰富的营 养因子不仅可以延缓皮肤干细胞的衰老，还可以促进表皮干细胞和毛囊干细胞增殖，对保 持皮肤弹性和健康具有重要作用。
【发明内容】
[0005]针对上述技术问题，本发明提供一种效果明显、疗效短并且无副作用的抗衰老护 肤品，具体技术方案为：
[0006]A组：
[0007]
[0011] 将A组混合，加热到70-75度。将去离子水加热到70-75度。将A组加入去离子 水中，混合均匀，搅拌降温。
[0012] 当温度下降到40度以下时，加入B组，混合均匀即可。
[0013] 其中，优选地，方法和重量份比例如下
[0014] A组：
[0015]
[0019] 将A组混合，加热到72度。将去离子水加热到72度。将A组加入去离子水中，混 合均匀，搅拌降温。
[0020] 当温度下降到40度以下时，加入B组，混合均匀即可。
[0021] 本发明的一个发明点就是和以往的现有技术不同，将脂溶性物质与表面活性剂单 独处理后，再和其他有效组份混合的方法，这样对于最终产品的性状的提高很大，不容易析 出水，属于本发明的独创性创造性发明点。
[0022] 其中，所述的干细胞提取物优选为羊脐带血干细胞提取物；
[0023] 优选地，本发明的发明人还惊奇地发现了在本发明产品中加入玻璃酸二甲基硅烷 醇酯复合物，会使得产品的最终效果非常好，其中：
[0024] 玻璃酸二甲基硅烷醇酯复合物的获得方法如下：二甲基硅烷一醇或二甲基硅烷二 醇与玻璃酸以酯键结合的化合物，其获得可以采用已公开的制备方法，如将玻璃酸溶液和 硅烷醇钠溶液混合反应后用阳离子交换树脂调整pH获得复合物水溶液（FR2961915)，有机 硅化合物与玻璃酸在水和乙醇溶液中反应结合后蒸除溶剂（在欧洲专利EP0867445中有所 公开），按比例将硅烷醇水溶液和玻璃酸水溶液混合（在欧洲专EP0289366中有所公开）， 也可以采用氯硅烷与混悬在有机溶液中的玻璃酸反应后经沉淀获得固体复合物（在中国 专利CN103450368B中有所公开）。
[0025] 上述组合物中优选加入：玻璃酸二甲基硅烷醇酯复合物重量份2-5% ;优选3% ;
[0026] 甘油、（可优选地，加入：玻璃酸二甲基硅烷醇酯复合物）海藻糖、维生素A醋酸 酯、维生素E醋酸酯、4'，6, 7-三羟基异黄酮、透明质酸钠、黄原胶、三乙醇胺、肉豆蔻酸异丙 酯、丙二醇、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热至75_80°C，均质乳化；
[0027] 降温至室温后，加入乳酸、氧化钛、干细胞提取物，搅拌均匀后真空脱气。
[0028]优选地，包括以下原料按照重量份比例混合，干细胞提取物30 %，玻璃酸二甲基 硅烷醇酯复合物3 %，甘油5 %，乳酸0. 5 %，海藻糖1 %，维生素A醋酸酯0. 3 %，维生素E 醋酸酯〇. 2%，4'，6, 7-三羟基异黄酮0. 2%，二氧化钛0. 6%，黄原胶0. 015%，三乙醇胺 0. 025%，肉豆蔻酸异丙酯3 %，丙二醇1 %，透明质酸钠0. 05%，防腐剂1 %，其余为去离子 水。
[0029] 其中，玻璃酸二甲基硅烷醇酯复合物的优选重量比例为3% ;
[0030] 本发明的干细胞提取物优选为植物干细胞提取物；
[0031] 植物干细胞（Plantstemcell)包含有关于植物发育和生长的所有程式，拥有永 恒生命力的细胞（immortalcell)，是植物生命力的根源（origin)。植物干细胞存在于被 称为分生组织的特殊构造内，具有非常惊人的再生能力。这些使得植物可以在数百年间不 断生长，并生成全新的器官。《自然》415,715-754(2002)本发明采用的是商购获得的苹果 干细胞、番茄干细胞和葡萄干细胞，但是为了更切合本发明的发明目的，发明人经过多次试 验，将苹果干细胞进行了处理和调整，使得本发明的效果更好，具体的方法如下：
[0032] 按照重量比例I:I: 1 : 2将苹果干细胞、番茄干细胞，葡萄干细胞和维生素C 混合；
[0033] 常规方法体外培养并收集培养物；
[0034] 收集上清液中分子量相遇5000Da的成份，进行冷冻干燥，其中，冷冻干燥的方法 如下：〇摄氏度5-10分钟，-10摄氏度10-20分钟，-20摄氏度2-3小时，然后-35摄氏度保 存超过5小时，进行冷冻干燥，这是本发明的一个发明点经过了这个方法，可以最大限度保 持细胞活性物质，对最终产品的效果具有非常好的促进作用。
[0035] 干细胞提取物再优选为羊脐带血干细胞提取物。
[0036] 本发明的取得羊脐带血干细胞提取物的方法如下：
[0037] (1)脐带及胎盘的采集。选足月母羊，病毒检测，在无菌条件下取得羊脐带血和胎 盘，〇摄氏度条件下运至GMP车间，放入液氮罐内进行保存。（2)收集足量的胎盘和羊脐带 血后，准备生产和加工。
[0038] 其中，所述的干细胞提取物制备方法为：采集羊的脐带血加入抗凝剂，保持在4°C 的温度，用生理盐水稀释，羊脐带血和生理盐水体积比为1-1.2 : 1;
[0039] 将稀释后的羊脐带血加入到胎盘活性抽提液中，稀释的羊脐带血与胎盘活性抽提 液的体积比为〇. 8-1. 2 : 1，再加入质量比为3% -6%明胶溶液，明胶溶液与胎盘活性抽提 液的体积比为〇. 3-0. 5 : 1.进行梯度离心分离，获取液相交界面细胞悬液；
[0040] 所述的胎盘活性抽提液的制备方法如下：取收集好的备用羊胎盘，洗净并去除筋 膜，剪碎后称重，进行组织研磨，加入羊胎盘重量1~2倍的生理盐水，进行高速组织匀浆， 匀浆后的胎盘为均匀的肉糜状，然后将羊胎盘匀浆在-30°C~-40°C下冷冻48小时后于 25°C下溶化，如此反复冻溶2~3次。再经5000~70000r/min冷冻离心25~30分钟，取 上清液静止透析24~48小时或真空透析10~12小时即可得到胎盘活性抽提液。本发明 的胎盘活性抽提液的制备方法是本发明的其中一个发明点，因为现有技术中的一次性冷冻 并融化是无法尽量多的得到胎盘活性物质的，经过发明人多次试验，发现进行2-3此的冻 融，可以明显增加最终产品的使用效果。
[0041]细胞悬液用磷酸盐缓冲液进行洗涤两次得到干细胞；
[0042]洗涤后的干细胞放入1640培养基（商购自青岛海博生物技术有限公司）中测定 活性，活性大于95 %即合格；
[0043]合格的干细胞使用流体剪切力对干细胞进行剪切成超小分子活性物质或采用超 声波破碎法，利用超声波振荡器发射9~10千周声波处理3-9分钟。
[0044] 本发明的其中一个发明点就在于对于羊脐带血干细胞的提取工艺，这个工艺是发 明人多年的经验加上多次试验的结果，使得最终活性物质的含量非常高，而且安全有效。
[0045] 本发明的另外一个发明点还在于，配置了一种天然植物混合液，在均质乳化之前， 将其按照重量份3-7%的比例加入后，一起与其他原材料进行均质和乳化，其中，所述的天 然植物混合液的制备方法为：将生姜、薄荷、老鹳草（HERBAERODII/HERBAGERANII)按重量 份I:I: