一种草绿盐角草细胞精华素及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种抗衰老的护肤品，具体为草绿盐角草提取物细胞精华素及其制备 方法。属于化妆品技术领域。
【背景技术】
[0002] 在皮肤抗衰老的化妆品，有多种方法，比如通过激素、植物提取物等配方对皮肤进 行去皱处理，然而这些方法不能从根本上达到抗衰老的作用，激素使用对人体有危害，并且 只能取得短期效果，长期使用加剧皮肤老化，而植物提取物的效果不明显，需要长期使用。
[0003] 随着生活水平的不断提高，人们对健康尤其是皮肤的保养越来越受到重视。皮肤 组织是人体最大组织器官，覆盖在人体表面，阻隔自然界一切有害物质对生命机体产生的 损害作用。但是，随着年龄的增加，皮肤组织器官的功能逐渐老化，从美学观点看，严重影响 人们对生命的热情；从生理学的角度看，影响人体内部器官的有效保护。皮肤老化的主要原 因是，在新陈代谢过程中需要的各种营养物质数量和质量不能从饮食中得到生理性满足， 从而导致生命细胞核内的生命遗传物质载体DNA的合成原料的数量逐渐减少，最终导致其 调空合成的蛋白质种类和数量减少，细胞代谢能力随之下降，寿命相对缩短。皮肤过度衰老 现象的表现是：皮肤松弛、皱纹增多加深、毛孔增大、皮肤纹理变粗变乱、皮肤弹性下降等。 目前，市面上用于护肤的产品大多保湿，功效有限。
[0004] 人类脐带间充质干细胞（humanumbilicalmesenchymalstemcells，HUMSC)和 胎盘干细胞（placentalstemcell，PSC)来源于妇女分娩时的废弃的脐带和胎盘组织。 脐带内含二条脐动脉、一条脐静脉，在动静脉之间含有特殊的胚胎粘液样结缔组织-华尔 通氏胶（WhartonpsJelly)，从华尔通氏胶分离得到的基质细胞即为人脐带间充质干细胞 (humanumbilicalmesenchymalstemcell，HUMSC)。胎盘是胎儿从母体吸取营养的场所， 分为羊膜层、绒毛层及脱基底膜层。HUMSC和PSC具有多向分化潜能和可塑性，可分化成三 个胚层来源的组织细胞，如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、胰岛细胞、神经细胞、心肌细胞、 生殖细胞（如精原细胞、卵母细胞等），并能分泌丰富的营养因子。这些丰富的营养因子不 仅可以延缓皮肤干细胞的衰老，还可以促进表皮干细胞和毛囊干细胞增殖，对保持皮肤弹 性和健康具有重要作用。
【发明内容】
[0005] 针对上述技术问题，本发明提供一种效果明显、疗效短并且无副作用的抗衰老护 肤品，具体技术方案为：
[0006] 本发明产品的草绿盐角草提取物细胞精华素，包括以下原料按照重量份比例混 合：细胞提取物28~32 %，草绿盐角草提取物3-5 %，甘油3~7 %，乳酸0. 2~0. 8 %，海 藻糖0. 7~1. 3%，维生素A醋酸酯0. 2~0. 5%，维生素E醋酸酯0. 1~0. 3%，4'，6, 7-三 羟基异黄酮0. 1~0. 3 %，二氧化钛0. 5~0. 7 %，黄原胶0. 01~0. 02 %，三乙醇胺0. 02~ 0. 03%，肉豆蔻酸异丙酯2~4%，丙二醇0. 8~1%，透明质酸钠0. 02~0. 07%，防腐剂 0. 8~I. 2%，其余为去离子水；所述的细胞提取物为干细胞提取物；所述的干细胞提取物 提取物为胎盘干细胞提取物或者植物干细胞提取物。
[0007] 甘油、海藻糖、维生素A醋酸酯、维生素E醋酸酯、4'，6, 7-三羟基异黄酮、透明质酸 钠、黄原胶、三乙醇胺、肉豆蔻酸异丙酯、丙二醇、透明质酸钠、防腐剂和去离子水混合加热 至75~80 °C，均质乳化；
[0008] 降温至室温后，加入乳酸、氧化钛、干细胞提取物，搅拌均匀后真空脱气。
[0009] 优选方案为：包括以下原料按照重量份比例混合：细胞提取物30%，草绿盐角草 提取物4 %，甘油5 %，乳酸0. 5 %，海藻糖1 %，维生素A醋酸酯0. 3 %，维生素E醋酸酯 0. 2 %，4'，6，7-三羟基异黄酮0. 2 %，二氧化钛0. 6 %，黄原胶0. 015 %，三乙醇胺0. 025 %， 肉豆蔻酸异丙酯3%，丙二醇1 %，透明质酸钠0. 05%，防腐剂1 %，其余为去离子水。
[0010] 其中，草绿盐角草（SALICORNIAHERBACEA)提取物的制备方法为：
[0011] 其中，草绿盐角草提取物制备方法为：按照重量比为1比8-10的重量份比例将草 绿盐角草与去离子水混合，保持在0-4tC的温度浸泡2小时到24小时，破碎草绿盐至悬浊 液，然后按照〇. 2-0. 4升/千克的比例加入壳聚糖；再加入质量比为3%~6%乙醇，静置2 小时；取109AB-8大孔树脂装柱5份，在PH6-7下，提取液浓度在0. 1-0. 2克每升时取50ml 上柱，上样流速为2BV/h，先用去离子水澄清，再用3BV50%乙醇按照2BV/h的流速洗脱得 到提取物。其中，提取效果更好的方法是在用去离子水浸泡草绿盐角草的时候加入与草绿 盐角草等重量份的冬青油，这个是本发明经过多次试验发现的，经过发明人研究，冬青油是 水溶性的，可以将草绿盐角草中的水溶性成份进一步溶出。这是由于冬青油具有皮肤血管 扩张、肤色发红等刺激反应的作用，在于草绿盐角草共同作用的时候产生协同作用，可以使 得本发明的产品更进一步使得皮肤吸收，迅速改变人体皮肤状态。另外，本发明的发明人惊 奇地发现，草绿盐角草提取物单独使用的时候效果并不是十分理想，但是与干细胞提取物 混合后的效果却非常好，经过单独干细胞配料、草绿盐角草配料的化妆品与两者混合使用 的化妆品的对比发现，在皮肤弹性、皱纹减少和皮肤光嫩方面，具有非常大的进步。
[0012] 本发明的干细胞提取物优选为植物干细胞提取物；
[0013] 植物干细胞（Plantstemcell)包含有关于植物发育和生长的所有程式，拥有永 恒生命力的细胞（immortalcell)，是植物生命力的根源（origin)。植物干细胞存在于被 称为分生组织的特殊构造内，具有非常惊人的再生能力。这些使得植物可以在数百年间不 断生长，并生成全新的器官。《自然》415,715-754(2002)本发明采用的是商购获得的苹果 干细胞、番茄干细胞和葡萄干细胞，但是为了更切合本发明的发明目的，发明人经过多次试 验，将苹果干细胞进行了处理和调整，使得本发明的效果更好，具体的方法如下：
[0014] 按照重量比例I:I: 1 : 2将苹果干细胞、番茄干细胞，葡萄干细胞和维生素C 混合；
[0015] 常规方法体外培养并收集培养物；
[0016] 收集上清液中分子量相遇5000Da的成份，进行冷冻干燥，其中，冷冻干燥的方法 如下：〇摄氏度5-10分钟，-10摄氏度10-20分钟，-20摄氏度2-3小时，然后-35摄氏度保 存超过5小时，进行冷冻干燥，这是本发明的一个发明点经过了这个方法，可以最大限度保 持细胞活性物质，对最终产品的效果具有非常好的促进作用。
[0017]干细胞提取物再优选为羊脐带血干细胞提取物。
[0018]本发明的取得羊脐带血干细胞提取物的方法如下：
[0019] (1)脐带及胎盘的采集。选足月母羊，病毒检测，在无菌条件下取得羊脐带血和胎 盘，〇摄氏度条件下运至GMP车间，放入液氮罐内进行保存。（2)收集足量的胎盘和羊脐带 血后，准备生产和加工。在冰上，用PBS将脐带与胎盘冲洗两次，剪断分开，去除血管和外膜 后并剪成〇. 5-3_3大小的组织块，用组织匀浆机将脐带和胎盘制成组织匀浆，800-900转 /分钟离心2-20分钟后去除组织残块，上清液置于冰箱内。优选地，可以将此上清液按照 I:1的重量比例加入到干细胞提取物中作为一个整体使用于本发明的产品中。
[0020] 其中，所述的干细胞提取物制备方法为：
[0021] 1)、羊脐带血干细胞的破碎：将羊脐带血干细胞悬液50毫升，采用超声波破碎法， 利用超声波振荡器发射9~10千周声波处理3-9分钟；
[0022]2)、向溶液中加入10倍体积生理盐水后，3000转/分钟，离心20分钟；
[0023]3)、取上清液，加入20%无水乙醇，混勾，放置15分钟（乙醇沉淀法）；
[0024]4)、将溶液3000转/分钟，离心20分钟；
[0025]5)、弃上清液，取沉淀，加入生理盐水50毫升，轻轻摇匀，将沉淀溶解成透明溶液， 即为羊脐带血干细胞活性蛋白粗提液；
[0026]本发明提供的干细胞精华素，从细胞的角度，有针对性地补充活性细胞或活化已 有细胞的功能。在皮肤众多的细胞中，皮肤干细胞是各种细胞更新换代的"种子细胞"，是可 以产生各种类型细胞的原始细胞。干细胞精华素通过表皮吸收后，深入到真皮层和皮下组 织，全面激活皮肤内干细胞分化，快速地更新替换衰老的细胞。从而增加胶原分泌，