一种抗衰老制剂及化妆品的制作方法
【专利摘要】本发明涉化妆品【技术领域】，具体涉及一种抗衰老制剂及化妆品。所述抗衰老制剂通过先将硫辛酸和谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种包裹在前脂质体A中，然后再将前脂质体A与孔雀石提取物、白茶提取物、VA或丹参酮中的一种或两种和葡萄籽提取物、碧萝芷提取物、银杏叶提取物或猴面包树提取物中的一种或多种一起包裹在脂质体B内部制备而得到。将得到的抗衰老制剂添加到化妆品中使用时，通过不同成分的分阶段先后释放后，作用于皮肤细胞，在细胞的不同的位置发挥立体抗衰老作用，抗衰老效果显著并持久。
【专利说明】一种抗衰老制剂及化妆品
【技术领域】
[0001]本发明涉及化妆品【技术领域】，更具体地，涉及一种抗衰老制剂及化妆品。
【背景技术】
[0002]随着时间的推移，所有个体都会发生功能性和器质性衰退的渐进过程，即衰老。衰老又称老化，是生命活动进程中的必经阶段，皮肤衰老在机体衰老过程中表现最为明显。
[0003]皮肤由表皮、真皮、皮下组织构成，主要功能是保护机体免受不利外界环境的伤害，它会因外界、遗传等多方面因素的影响而功能减弱，表现出衰老症状。皮肤衰老的形式主要为自然衰老(即内源性衰老)和光老化(即外源性衰老)，自然衰老主要由机体遗传因素引起，限于全身部位，明显特征为皱纹和松弛，并出现色素沉着等现象；光老化主要是紫外线损害累积所致的皮肤衰老，是自然衰老和紫外线照射共同作用的结果，限于皮肤暴露部位，主要特征为皮肤粗糙无光泽、皱纹加粗加深、色素沉着加深、皮肤微循环变差、弹性组织变性，表皮表现为更新减慢、角质形成细胞活力下降、表皮受伤后修复能力及屏障功能减弱，真皮表现为清除力、胶原蛋白和弹性蛋白合成能力及免疫力下降，真皮厚度变薄、易发生过敏发炎等现象。
[0004]皮肤抗衰老一直被人们热切关注，相关的衰老机理及抗衰老途径也一直是人们研究的热点。倾向性较多的有:自由基说、交联学说、体细胞突变学说、环境因素、体液失衡、遗传决定、生物钟学说、微量元素说、代谢速变学说、氧化还原理论等几十种，虽然这些学说和理论从不同的方面解释了一些人体及皮肤衰老的现象，但其中许多机理是与遗传相关的，从外用抗衰老化妆品角度讲，主要有以下几种:
[0005]自由基说，在正常情况下，机体内的自由基处于不断产生与消除的动态平衡之中。如果自由基产生过多或清除过慢，机体内过量的自由基就会与氨基酸或蛋白质反应造成肽链断裂，促使皮肤中胶原、弹性蛋白及表皮生长因子受体蛋白质发生交联变性，造成皮肤弹性降低且变薄起皱；降解氧化皮肤中透明质酸等黏多糖为糖醛类产物，进而与蛋白质、核酸发生交联变性；氧化细胞膜上的脂质，形成多种脂质过氧化物及其代谢产物丙二醛，进一步引起蛋白质或核酸的交联形成无法消除的脂褐素等。
[0006]代谢失调学说，衰老虽然由遗传基因所决定，但最终要通过细胞代谢来表达，因此改善皮肤新陈代谢可极大的延缓皮肤衰老。
[0007]非酶糖基化反应学说，真皮中蛋白质分子中的氨基酸容易与细胞外液中葡萄糖的醛基或酮基发生反应生成可逆或不可逆结合物，随着年龄的增长、结合物含量的增加使胶原蛋白形成分子间交联，降低皮肤的弹性和通透性及胶原的可溶性，从而加速皮肤衰老。
[0008]基质金属蛋白酶(MMP)学说，MMP是一个锌依赖性的酶家族，能够特异性的降解真皮中的胶原蛋白及弹性蛋白，实验表明MMP分泌增加或减少均能加速胶原蛋白的降解、流失，使皮肤呈现衰老现象。紫外线照射和炎性细胞因子(如白介素-1、干扰素)可诱导MMP表达。
[0009]光老化学说，皮肤光老化由环境因素(如紫外线、风吹、接触化学物质等)引起的外源性老化，其中日光的长期反复照射是最重要因素。大量研究表明紫外线作用于皮肤后通过产生的自由基、细胞表皮生长因子受体、细胞因子受体及许多酶的交联、激活转录因子激活蛋白，使MMP高度表达而降解细胞外基质，最终导致皮肤衰老。日光中的紫外线通过以下机制对皮肤造成损伤:损伤DNA，进行性蛋白质(胶原)的交联，通过诱导抗原刺激反应的抵制途径而降低免疫应答，产生高度反应的自由基与各种细胞内结构相互作用而造成细胞和组织的损伤。
[0010]依据以上皮肤衰老机理，可以看出皮肤衰老是多种机理同时参与的一种复杂的多因素过程，针对单一机理产生的抗衰物质只能解决衰老的某一环节问题，从多角度多层次出发才能研制出高效的抗衰老化妆品。
[0011]现有的抗衰老化妆品主要通过清除过量自由基，防御紫外线，促进皮肤细胞新陈代谢，保湿和修复皮肤屏障功能，补充胶原蛋白和弹性蛋白这五方面来延缓衰老；虽然这五方面可以解决皮肤衰老的大部分问题，但延缓衰老的途径相对单一。而且基于这五方面的抗衰物质主要为抗氧剂、防晒剂、维A酸类、保温剂、营养剂等，以酶类、肽类、维生素类、植物提取物等为代表的抗氧化剂，如S0D、辅酶Q10、谷胱苷肽、维生素C、维生素E、多酚类、黄酮类，它们多为生物活性物质甚至本身就是酶、多肽，对热敏感易失活，在较高温度下乳化均质制备的化妆品体系中会不同程度的失去应有的抗衰功能，有些对光照稳定性不高，如辅酶QlO遇光易分解，在光照条件下含量下降明显；有些应用受限，如维生素E只能在膜和脂质区域才能发挥清除脂质自由的作用，在水相中几乎没有这一活性。另外，抗衰物质的经皮渗透也是一个非常关键的问题，现有抗衰物质多使用普通制剂类型或其它传统的制剂载体，针对皮肤衰老主要发生部位一基底细胞及真皮层以下，其活性成分不能有效抵达皮肤深层发挥功效。而皮肤衰老是多方面复杂的生化过程，这要求抗衰老化妆品需要综合运用多种抗衰老途径，多角度、多层次的解决皮肤衰老问题。在清除过量自由基，防御紫外线，促进皮肤细胞新陈代谢，保湿和修复皮肤屏障功能，补充胶原蛋白和弹性蛋白的同时，强化皮肤防御和免疫系统，抑制MMP活性、抑制非酶糖基化反应、改善微循环、抗敏抗炎，从多种途径入手，并尽可能的使用天然物质，选择适合皮肤的抗衰老生物活性物质及其载体系统，研制出更安全、高效的抗衰老化妆品。
【发明内容】
[0012]本发明要解决的技术问题是针对现有抗衰剂存在抗衰途径相对单一、稳定性差、有效性不高问题，以及孔雀石提取物在抗衰老应用方面的技术不足，提供一种含有孔雀石提取物、多种抗衰途径协同并运用载体技术提高透皮吸收的抗衰老制剂。
[0013]本发明的另一个目的是提供一种含有抗衰老制剂的化妆品。
[0014]本发明的目的通过以下技术方案予以实现:
[0015]一种抗衰老制剂，通过以下方法制备得到:
[0016]SI前脂质体A的制备:将硫辛酸和谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种一起包裹在前脂质体A中，得到前脂质体A粉末；
[0017]S2.将前脂质体A粉末、孔雀石提取物、白茶提取物、VA或丹参酮中的一种或两种和葡萄籽提取物、碧萝芷提取物、银杏叶提取物或猴面包树提取物中的一种或多种一起包裹在脂质体B中，即得抗衰老制剂。[0018]作为优选的实施方案，前脂质体A中，硫辛酸可部分用VE代替。
[0019]优选地，所述抗衰老制剂通过以下方法制备得到:
[0020]S1.将硫辛酸和谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种一起包裹在前脂质体A中，得到前脂质体A粉末；
[0021]S2.将脂质材料、VA或丹参酮中的一种或两种、乳化剂、抗氧化剂和醇类溶解于乙醇溶剂中，水浴溶解得类脂质溶液Tl ；
[0022]S3.将保护剂、前脂质体A粉末、孔雀石提取物、白茶提取物和葡萄籽提取物、碧萝芷提取物、银杏叶提取物或猴面包树提取物中的一种或多种溶解于磷酸缓冲液中得溶液T2 ；
[0023]S4.将类脂质溶液Tl与溶液T2按比例混匀后得溶液B，溶液B经过滤、冷冻干燥、压盖封口即得脂质体B粉末，该粉末即为抗衰老制剂。优选地，S4所述类脂质溶液Tl与溶液T2的重量比为1:20~30。
[0024]优选地，在脂质体B的制备中:(前脂质体A粉末+VA或丹参酮中的一种或两种+孔雀石提取物、白茶提取物和葡萄籽提取物、碧萝芷提取物、银杏叶提取物或猴面包树提取物中的一种或多种):脂质材料:抗氧化剂:乳化剂:保护剂:醇类的重量比为8~20:15~50:0.5~2:0.2~2:0.5~5:0~I。所述前脂质体A粉末:(VA或丹参酮中的一种或两种):(孔雀石提取物、白茶提取物和葡萄籽提取物、碧萝芷提取物、银杏叶提取物或猴面包树提取物中的一种或多种)的重量比为3~6:0.5~1:1~2.5。
[0025]所含脂质材料为磷脂和胆固醇，磷脂:胆固醇的重量比为I~4:1。
[0026]所含抗氧剂为生育酚或生育酚乙酸酯中的一种或两种。
[0027]所含乳化剂为吐温80、`异硬脂醇二聚甘油琥珀酸酯、聚甘油-3- 二异硬脂酸酯或胆酸钠中的一种或多种，复配成与体系HLB值相匹配的乳化剂。
[0028]所含保护剂采用甘露醇、山梨醇、乳酸、海藻糖或蔗糖的一种或多种。
[0029]所述醇类为丙二醇。
[0030]其中，所述前脂质体A粉末的制备方法包括如下步骤:
[0031]S1.将脂质材料、硫辛酸、乳化剂、抗氧化剂和醇类溶解于乙醇中得溶液1，向溶液I中加入适量水，充分搅拌并均质后得I相；
[0032]S2.将保护剂和谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种溶解于磷酸缓冲液中，混合均匀得II相；
[0033]S3.将II相缓慢加入到I相中，边加入边超声，加入完毕再过滤制备得到脂质体A，脂质体A经冷冻干燥即得前脂质体A粉末。其中，硫辛酸可部分用VE代替。
[0034]优选地，SI所述脂质材料、硫辛酸、乳化剂和抗氧化剂的重量总和:乙醇:水的重量比为1:4~8:3~5 ;S3所述I相:II相的重量比为I~2:1。
[0035]优选地，在前脂质体A的制备过程中硫辛酸+谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种:脂质材料:抗氧化剂:保护剂:乳化剂:醇类的重量比为5~15:15~50:0.5~2:0.5~5:0.2~1.5:0~1.5。其中，硫辛酸:谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种的重量比为I~5:0.I~10。
[0036]所述脂质材料为磷脂和胆固醇，磷脂:胆固醇的重量比为I~4:1。
[0037]所述抗氧剂采用的是生育酚或生育酚乙酸酯中的一种或两种。[0038]所含乳化剂为吐温80、异硬脂醇二聚甘油琥珀酸酯、聚甘油-3- 二异硬脂酸酯或胆酸钠中的一种或多种，复配成与体系HLB值相匹配的乳化剂。
[0039]所含保护剂采用甘露醇、山梨醇、乳酸、海藻糖或蔗糖的一种或多种。
[0040]所述醇类为丙二醇。
[0041]通过本发明包裹模式得到的抗衰老制剂在使用的时候，最主要的纸质体结构形式为:从外到内，最外层是脂质体壁材，壁材中包裹了 VA或丹参酮中的一种或两种活性成分，接下来芯材，芯材中包裹了前脂质体A和水溶性活性成分，水溶性活性成分为孔雀石提取物、白茶提取物和银杏叶提取物、葡萄籽提取物、碧萝芷提取物或猴面包树提取物中的一种或多种的活性成分。在前脂质体A中，前脂质体A的壁材中含有硫辛酸，芯材中包裹了水溶性的谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种活性成分，最主要的纸质体结构形式如图1所示。当然在制备的抗衰制剂中除了上述脂质体存在形式外，还存在少量单室脂质体(单室脂质体即为未被包裹的前纸质体A)，及少量未被包裹的活性成分和其他成分等。
[0042]一种化妆品，在化妆品中的添加用量为5~10%重量百分比的如上所述的抗衰老制剂。
[0043]本发明的有益效果是:
[0044]1、本发明通过特殊的包裹方式，
[0045]最主要的纸质体结构形式为:从外到内，最外层是脂质体壁材,壁材中包裹了 VA或丹参酮中的一种或两种活性成分，接下来芯材，芯材中包裹了前脂质体A和水溶性活性成分，水溶性活性成分为孔雀石提取物、白茶提取物和银杏叶提取物、葡萄籽提取物、碧萝芷提取物或猴面包树提取物中的一种或多种的活性成分。在前脂质体A中，前脂质体A的壁材中含有硫辛酸，芯材中包裹了水溶性的谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种活性成分，最主要的纸质体结构形式如图1所示。当然在制备的抗衰制剂中除了上述脂质体存在形式外，还存在少量单室脂质体(单室脂质体即为未被包裹的前纸质体A)，及少量未被包裹的活性成分和其他成分等。
[0046]2、本发明主要通过上述主要脂质体多层包裹技术发挥作用，将抗衰老制剂添加到化妆品中，大部分柔性的脂质体穿透或进入角质层，最外面的壁材首先破裂，壁材中的油溶性的VA、丹参酮等将最早发挥功效，维A酸能够促进上皮细胞增生、分化、角质溶解等代谢，健全皮肤角质层组织、改善皮肤的粗糙、干燥状态，并具有抗菌作用。丹参酮可以抑制低密度蛋白的氧化、抑制脂质代谢酶活性、改善脂质代谢过程，保护内皮细胞、改善血液代谢等功效，两者或一种能改善角质层并具有抗菌抗敏的作用。接下来是第一次水溶性活性成分的释放，该水溶性成分主要是孔雀石提取物、白茶提取物、银杏叶提取物、葡萄籽提取液、碧萝芷提取物、猴面包树提取物中的一种或多种，孔雀石提取物主要是在细胞间质中通过促进胶原蛋白之间的键合，此外作为信号因子刺激机体内抗氧化活性酶的产生，间接发挥抗氧化及清除自由基作用，白茶提取物及银杏提取物在细胞间质中发挥抗氧化、抗炎、吸收紫外线等作用，葡萄籽提取液及碧萝芷提取物也主要发挥抗氧化清除自由基等作用，猴面包树提取物主要为多糖类物质，能更好的保护角质层细胞的完整性，弹性，蓄水性等，上述可溶性活性成分首先在角质层，及角质层下面的细胞间质中释放，主要作用是抗菌、抗炎、抗紫外线、保护角质层细胞、保护及促进胶原蛋白的作用，当然部分水溶性成分能进一步向下迁移，通过主动或被动吸收进入到基地细胞中，进一步发挥相关作用；随着脂质体最外层壁材的破裂和相关活性成分的释放，被包裹的较小的前脂质体A在外一层脂质体的保护下进一步向皮肤底层迁徙，该部分脂质体部分能进入到基底层细胞中，其中的活性成分硫辛酸、VE、谷胱甘肽、棕榈酰寡肽中的一种或多种能进入到细胞中，参与到细胞内的自由基的清除、抗氧化、激活抗氧化酶、促进胶原生成等，发挥抗衰作用。
[0047]3、本发明所述抗衰老制剂的包裹模式是发明人综合考虑各抗衰老活性成分的作用机理、细胞衰老代谢过程间的复杂关系，创造性地探索出的一种新的模式，这种新的包裹模式获得了一种意想不到的技术效果。按照这种包裹模式，各抗衰老活性成分可以先后释放出来，在细胞特点的代谢周期及时起到抗衰老作用，这样的释放模式，既可以起到保护活性成分稳定性和溶剂性的作用，同时，能从根本上起到抗衰老作用，抗衰老效果显著并持久。
[0048]综上所述，本发明所述抗衰老制剂，通过活性成分分阶段的释放作用，在不同的位置发挥立体抗衰老的作用。
[0049]说明书附图
[0050]图1.本发明抗衰老制剂中主要形式的纸质体B的结构示意图。
【具体实施方式】
[0051]下面结合具体实施例进一步详细说明本发明。除非特别说明，本发明采用的试剂、设备为本【技术领域】常规试剂和设备。
[0052]实施例1
[0053]一种抗衰老制剂，通过以下方法制备得到:
[0054]SI前脂质体A粉末的制备:按重量份数计，前脂质体A粉末含有如下各组分:
[0055]`
硫辛酸2份；
棕榈酰寡肽3份；
磷脂10份；
胆固醇6份；
生育酚0.8份；
吐温800.8份；
异硬脂醇二聚甘油琥珀酸酯 0.2份；
甘露醇2份；
丙二醇0.5汾；
[0056]制备方法:(1) I相制备:将脂质材料(磷脂+胆固醇)、油溶性活性成分(硫辛酸)、乳化剂(吐温80+异硬脂醇二聚甘油琥珀酸酯)、抗氧化剂(生育酚)和醇类(丙二醇)充分混合，再溶解到乙醇溶剂中得溶液1，向溶液I中加入适量水，充分搅拌并均质得I相，其中(脂质材料+活性成分+乳化剂+抗氧化剂+醇类):乙醇:水的重量比为1:6:4 ；(2) II相制备:将水溶性活性成分(棕榈酰寡肽)及保护剂(甘露醇)溶解于磷酸缓冲液(PH6.4)中，充分混合均匀得II相；(3)将II相缓慢加入到I相中，边加入边超声，其中I相:11相的重量比为2:1，加入完毕，经0.22um超滤膜高压挤出过滤得滤液A。将滤液A经冷冻干燥(-20℃ 10h, -1O℃ 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于 0.1MPa)，得到前脂质体 A 粉末。
[0057]S2.脂质体B的制备:
[0058]按重量份数计，所述脂质体B含有如下成分:
[0059]
前脂质体A粉末6份；
VA1份
孔雀石提取液1份；
白茶提取物0.5份；
碧萝芷0.5份；
磷脂35份；
胆固醇15份；
生育酚0.4份；
生育酚乙酸酯0,6份；
吐温800.3份；
甘油硬脂酸酯柠檬酯0.7份；
甘露醇1.5份；
蔗糖0.5份。
[0060]所述脂质体B的制备方法为:(1)称取脂质材料(磷脂+胆固醇)、油溶性活性成分(VA)、乳化剂(吐温80+甘油硬脂酸酯柠檬酯)和抗氧剂(生育酚+生育酚乙酸酯)充分溶解于乙醇溶剂中，(脂质材料+油溶性活性成分+抗氧化剂+乳化剂):乙醇的重量比为1:3，于60°C下水浴溶解，充分搅拌直到完全溶解得类脂质溶液Tl ; (2)取一定质量的过200目筛的保护剂粉末(甘露醇+蔗糖)，前脂质体A粉末、水溶性活性成分(孔雀石提取物、白茶提取物、碧萝芷提取物)与适量磷酸缓冲液(PH6.4)混匀后得溶液T2 ；(3)将溶液T2与类脂质溶液Tl充分高速搅拌混合均匀(Tl:T2的重量比为1:20)，经5um滤膜挤出过滤得滤液B。将滤液 B 于-20°C预冷 12h，冷冻干燥(_20°C 10h,-10°C 8h, -4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，压盖封口即得脂质体B粉末，该脂质体B粉末即为抗衰老制剂。
[0061]实施例2
[0062]一种抗衰老制剂，通过以下方法制备得到:
[0063]SI前脂质体A粉末的制备:按重量份数计，前脂质体A粉末含有如下各组分:
[0064]
硫辛酸7份；
VE
1份
[0065]谷胱甘肽2份；
磷脂30份
胆固醇10份；
生育酚乙酸酯1.2份；
吐温800.2份；
聚甘油-3-二异硬脂酸酯0.9份；
甘露醇1.8份；
海藻糖1.8份；
丙二醇0.8份；
[0066]制备方法:(1) I相制备:将脂质材料(磷脂+胆固醇)、油溶性活性成分(硫辛酸+VE)、乳化剂(吐温80+聚甘油-3- 二异硬脂酸酯)、抗氧化剂(生育酚乙酸酯)和醇类(丙二醇)充分混合，再溶解到乙醇溶剂中的溶液1，向溶液I中加入适量水，充分搅拌并均质得I相，其中(脂质材料+活性成分+乳化剂+抗氧化剂+醇类):乙醇:水的重量比为1:8:5;(2) II相制备:将水溶性活性成分(谷胱甘肽)及保护剂(甘露醇+海藻糖)溶解于磷酸缓冲液(PH6.4)中，充分混合均匀得II相；(3)将II相缓慢加入到I相中，边加入边超声，其中I相:II相的重量比为2:1，加入完毕，经0.22um超滤膜高压挤出过滤得滤液A。将滤液A经冷冻干燥(_20°C 10h, -1O0C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，得到前脂质体A粉末。
[0067]S2.脂质体B的制备:按重量份数计，所述脂质体B含有如下成分:
[0068]
前脂质体A粉末8份；
丹参酮2份；
孔雀石提取液0.8份；
白茶提取物0.5份；
碧萝芷提取物0.4份；
猴面包树提取物0.3份.’
磷脂30份；
胆固醇10份；
生育酚1.2份；
吐温801.5份；
[0069]乳酸0.2份；
甘露醇1.5份；
蔗糖1.5份。
[0070]所述脂质体B的制备方法为:(1)称取脂质材料(磷脂+胆固醇)、油溶性活性成分(丹参酮)、乳化剂(吐温80)和抗氧剂(生育酚)充分溶解于乙醇溶剂中，(脂质材料+油溶性活性成分+抗氧化剂+乳化剂):乙醇的重量比为1:4，于60°C下水浴溶解，充分搅拌直到完全溶解得类脂质溶液Tl ; (2)取一定质量的过200目筛的保护剂粉末(甘露醇+蔗糖+乳酸)，前脂质体A粉末、水溶性活性成分(孔雀石提取物、白茶提取物、碧萝芷提取物+猴面包树提取物)与适量磷酸缓冲液(PH6.4)混匀后得溶液T2 ; (3)将溶液T2与类脂质溶液Tl充分高速搅拌混合均匀得溶液B (Tl:T2的重量比为1:25)，经5um滤膜挤出过滤得滤液B。将滤液B于-20°C预冷12h，冷冻干燥(_20°C 10h, -10°C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，压盖封口即得脂质体B粉末，该脂质体B粉末即为本发明抗衰老制剂。
[0071]实施例3
[0072]一种抗衰老制剂，通过以下方法制备得到:
[0073]SI前脂质体A粉末的制备:按重量份数计，前脂质体A粉末含有如下各组分:
[0074]
硫辛酸10份；
棕榈酰寡肽2份；
谷胱甘肽3份；
磷脂24份；
胆固醇6份；
生育酚乙酸酯2.0份；
吐温800.3份；
聚甘油-3-二异硬脂酸酯 1份；
胆酸钠0.2份；
甘露醇5份；
丙二醇1.2份；
[0075]制备方法:(1) I相制备:将脂质材料(磷脂+胆固醇)、油溶性活性成分(硫辛酸)、乳化剂(吐温80+聚甘油-3- 二异硬脂酸酯+胆酸钠)、抗氧化剂(生育酚乙酸酯)和醇类(丙二醇)充分混合，再溶解到乙醇溶剂中得溶液1，向溶液I中加入适量水，充分搅拌并均质得I相，其中(脂质材料+活性成分+乳化剂+抗氧化剂+醇类):乙醇:水的重量比为1:4:3;(2) II相制备:将水溶性活性成分(谷胱甘肽+棕榈酰寡肽)及保护剂(甘露醇)溶解于磷酸缓冲液(PH6.4)中，充分混合均匀得II相；(3)将II相缓慢加入到I相中，边加入边超声，其中I相:II相的重量比为2:1，加入完毕，经0.22um超滤膜高压挤出过滤得滤液A。将滤液A经冷冻干燥(_20°C 10h,-10°C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，得到前脂质体A粉末。
[0076]S2.脂质体B的制备:按重量份数计，所述脂质体B含有如下成分:
[0077]
前脂质体A粉末12份；
丹参酮1份；
VAI 份；
孔雀石提取液2份；
白茶提取物1份；
银杏叶提取物0.5份；
猴面包树提取物0.5份；
磷脂24份；
胆固醇6份；
生育酚1.9份；
吐温800.4份；
甘油硬脂酸酯柠檬酯1.3份；
胆酸钠0.3份；`
甘露醇3.0份；
海藻糖2份；
丙二醇0.7份；
[0078]所述脂质体B的制备方法为:(1)称取脂质材料(磷脂+胆固醇)、油溶性活性成分(丹参酮+VA)、乳化剂(吐温80+甘油硬脂酸酯柠檬酯+胆酸钠)、醇类(丙二醇)和抗氧剂(生育酚)充分溶解于乙醇溶剂中，(脂质材料+油溶性活性成分+抗氧化剂+乳化剂+醇类):乙醇的重量比为1:5，于60°C下水浴溶解，充分搅拌直到完全溶解得类脂质溶液Tl ; (2)取一定质量的过200目筛的保护剂粉末(甘露醇+海藻糖)，前脂质体A粉末、水溶性活性成分(孔雀石提取物、白茶提取物、银杏叶提取物+猴面包树提取物)与适量磷酸缓冲液(PH6.4)混匀后得溶液T2 ; (3)将溶液T2与类脂质溶液Tl充分高速搅拌混合均匀得溶液B (Tl:T2的重量比为1:30),经5um滤膜挤出过滤得滤液B。将滤液B于_20°C预冷12h,冷冻干燥(-200C 10h,-10°C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，压盖封口即得脂质体B粉末，该脂质体B粉末即为抗衰老制剂。
[0079]对比例I
[0080]一种抗衰老制剂，通过以下方法制备得到:
[0081]SI前脂质体A粉末的制备:按重量份数计，前脂质体A粉末含有如下各组分:
[0082]丹参酮1份；
VAI 份；
孔雀石提取液2份;
白茶提取物1份；
银杏叶提取物0.5份；
猴面包树提取物0.5份；
磷脂12份；
胆固醇3份；
生育酚乙酸酯2.0份；
吐温800.3份；
聚甘油-3-二异硬脂酸酯 1.2份；
甘露醇5份；
丙二醇1.2
[0083]制备方法:(1) I相 制备:将脂质材料(磷脂+胆固醇)、油溶性活性成分(丹参酮+VA)、乳化剂(吐温80+聚甘油-3- 二异硬脂酸酯)、抗氧化剂(生育酚乙酸酯)和醇类(丙二醇)充分混合，再溶解到乙醇溶剂中得溶液1，向溶液I中加入适量水，充分搅拌并均质得I相，其中(脂质材料+活性成分+乳化剂+抗氧化剂+醇类):乙醇:水的重量比为1:4:3;
(2)II相制备:将水溶性活性成分(孔雀石提取物、白茶提取物、银杏叶提取物+猴面包树提取物)及保护剂(甘露醇)溶解于磷酸缓冲液(PH6.4)中，充分混合均匀得II相；(3)将II相缓慢加入到I相中，边加入边超声，其中I相:II相的重量比为2:1，加入完毕,经0.22um超滤膜高压挤出过滤得滤液A。将滤液A经冷冻干燥(_20°C 10h,-10°C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，得到前脂质体A粉末。
[0084]S2.脂质体B的制备:按重量份数计，所述脂质体B含有如下成分:
[0085]前脂质体A粉末25份；
硫辛酸2.18份；
棕榈酰寡肽0.44份；
谷胱甘肽0.65份；
磷脂24份；
胆固醇6份；
生育酚1.9份；
吐温800.4份；
甘油硬脂酸酯柠檬酯1.6份；
甘露醇3.0份；
海藻糖2份；
丙二醇0.7份；
[0086]所述脂质体B的制备方法为:(1)称取脂质材料(磷脂+胆固醇)、油溶性活性成分(硫辛酸)、乳化剂(吐温80+甘油硬脂酸酯柠檬酯)、醇类(丙二醇)和抗氧剂(生育酚)充分溶解于乙醇溶剂中，(脂质材料+油溶性活性成分+抗氧化剂+乳化剂+醇类):乙醇的重量比为1:5，于60°C下水浴溶解，充分搅拌直到完全溶解得类脂质溶液Tl ; (2)取一定质量的过200目筛的保护剂粉末(甘露醇+海藻糖)，前脂质体A粉末、水溶性活性成分(谷胱甘肽+棕榈酰寡肽)与适量磷酸缓冲液(PH6.4)混匀后得溶液T2 ; (3)将溶液T2与类脂质溶液Tl充分高速搅拌混合均匀的溶液B(T1:T2的重量比为1:30)，经5um滤膜挤出过滤得滤液B。将滤液 B 于-20°C预冷 12h，冷冻干燥(_20°C 10h,-10°C 8h, -4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，压盖封口即得脂质体B粉末，该脂质体B粉末即本发明所述抗衰老制剂。
[0087]对比例2
[0088]一种抗衰老制剂，通过以下方法制备得到。本实施例所述的抗衰老制剂是将所有的水溶性抗衰老活性成分和所有的油溶性抗衰老活性成分同时包裹在同一个脂质体腔室内。
[0089]按重量份数计， 所述抗衰老制剂含有如下各组分:
[0090]硫辛酸2.18份；
棕榈酰寡肽0.44份；
谷胱甘肽0.65份；
丹参酮1份；
VAI 份；
孔雀石提取液2份；
白茶提取物1份；
银杏叶提取物0.5份；
猴面包树提取物0.5份；
磷脂24份；
胆固醇6份；
生育酚1.9份；
生育酚乙酸酯2.0份；
吐温800.7份；
甘油硬脂酸酯柠檬酯1.6份；`聚甘油-3-二异硬脂酸酯1.2份；
甘露醇8.0份；
海藻糖2份；
丙二醇1.9份；
[0091]制备方法:(1)按上方称取脂质材料(磷脂+胆固醇)、油溶性抗衰老活性成分(硫辛酸+丹参酮+VA)、水溶性抗衰老成分(孔雀石提取液+白茶提取物+银杏叶提取物+猴面包树提取物+谷胱甘肽+棕榈酰寡肽)、乳化剂(吐温80+聚甘油-3- 二异硬脂酸酯+甘油硬脂酸酯柠檬酯)、醇类(丙二醇)和抗氧化剂(生育酚+生育酚乙酸酯)充分溶解于乙醇溶剂中，于60°C下水浴溶解，充分搅拌直到完全溶解得类脂质溶液Tl ；S2.取一定质量的过200目筛的甘露醇和海藻糖粉末，与适量磷酸缓冲液(pH6.4)混匀后得溶液T2 ；S3.将溶液T2与类脂质溶液Tl充分搅拌混合均匀(Tl:T2=1:30),并进行均质处理得溶液B，经0.22um超滤膜高压挤出过滤得滤液B。将滤液B于_20°C预冷12h，冷冻干燥(-200C 10h,-10°C 8h，-4°C 5h，25°C 2h，真空度小于0.1MPa)，压盖封口即得脂质体B粉末，该粉末即为抗衰老制剂。
[0092]实施例4抗衰老组合物实验报告如下:
[0093]一、体外评价
[0094]1、试验目的:与市售常用抗衰剂进行清除自由基能力测定的比较。
[0095]2、试验仪器与试剂:分光光度计SpectronicGENESYS-5,美国Thermo公司；其他试剂为常规试剂；比较本发明实施例1~3抗衰老组合物(6%)、本发明对比例I和对比例2(6%)、微生物C (3%)、维生素E (3%)、芦丁(5%)的抗氧化能力。
[0096]3、试验方法
[0097]清除DPPH自由基能力的测定:依次将3mLpH6.8磷酸缓冲液，4mL、0.4mmol/LDPPH无水乙醇溶液,0.2mL待测样品加入到IOmL离心管中充分混匀，30min后，离心IOmin(8000r/min)，取上清液，在516nm处测定吸光度值，平行操作3次取平均值，样品对DPPH自由基的清除率=[1 - (Al - A2)/A3]。式中Al为加样品反应后DPPH溶液的吸光度值，A2为不加DPPH(用无水乙醇代替)只加样品溶液的吸光值，A3为不加样品只加DPPH及水溶液的吸光值。
[0098]清除超氧阴离子自由基能力的测定:配制pH值为8.20的缓冲体系(Tris-HCl-EDTA)。在IOmL离心管中加入待测样品0.6mL，加入5.2mL缓冲液，用移液管加入0.045mol/L邻苯三酚溶液0.2mL,迅速摇匀，等待反应5分钟(时间必须精确)后迅速于干燥比色皿中，在325nm处测吸光度值,记为AO, IOmin后再测记为A4。以蒸懼水代替样品测定的吸光值分别记为BO和B4。平行操作3次取平均值，样品对超氧阴离子的抑制率= [(B4 — B0) — (A4 — AO) ] / (B4 — B0)。
[0099]清除羟自由基能力的测定:分别将lmL、0.4mmol/L结晶紫，3mL、0.2mol/LpH7.4磷酸缓冲液，lmL、0.001mol/LFeS04溶液，ImL待测样品，加入IOmL离心管中，最后加lmL30%H202启动反应，于室温下反应Ih后12000r/min离心5min，取上清液在5 IOnm下测定吸光值记为C，用蒸馏水代替样品时的吸光值记为Cl，用蒸馏水代替样品和H2O2时的吸光值记为C2。平行操作3次取平均值，样品对羟自由基的清除率=(C - C1)/(C2 - Cl)。
[0100]4.试验结果
[0101]表1清除DPPH自由基 能力的测定结果
[0102]
【权利要求】
1.一种抗衰老制剂，其特征在于，通过以下方法制备得到: SI前脂质体A的制备:将硫辛酸和谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种一起包裹在前脂质体A中，得到前脂质体A粉末； S2.将前脂质体A粉末、孔雀石提取物、白茶提取物、VA或丹参酮中的一种或两种和葡萄籽提取物、碧萝芷提取物、银杏叶提取物或猴面包树提取物中的一种或多种一起包裹在脂质体B中，即得抗衰老制剂。
2.根据权利要求1所述抗衰老制剂，其特征在于，所述硫辛酸能部分用VE代替。
3.根据权利要I所述抗衰老制剂，其特征在于，所述抗衰老制剂通过以下方法制备得到: 51.将硫辛酸和谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种一起包裹在前脂质体A中，得到前脂质体A粉末； 52.将脂质材料、VA或丹参酮中的一种或两种、乳化剂、抗氧化剂和醇类溶解于乙醇溶剂中，水浴溶解得类脂质溶液Tl ； 53.将保护剂、前脂质体A粉末、孔雀石提取物、白茶提取物和葡萄籽提取物、碧萝芷提取物、银杏叶提取物或猴面包树提取物中的一种或多种溶解于磷酸缓冲液中得溶液T2 ； 54.将类脂质溶液Tl与溶液T2按比例混匀后得溶液B，溶液B经过滤及冷冻干燥、压盖封口即得脂质体B粉末，该粉末即为抗衰老制剂。
4.根据权利要3所述抗衰老制剂`，其特征在于，所述前脂质体A粉末的制备方法包括如下步骤: 51.将脂质材料、硫辛酸、乳化剂、抗氧化剂和醇类溶解于乙醇中得溶液1，向溶液I中加入适量水，充分搅拌并均质后得I相； 52.将保护剂和谷胱甘肽或棕榈酰寡肽中的一种或两种溶解于磷酸缓冲液中，混合均匀得II相； 53.将II相缓慢加入到I相中，边加入边超声，加入完毕再过滤制备得到脂质体A，脂质体A经冷冻干燥即得前脂质体A粉末。
5.根据权利要求3所述抗衰老制剂，其特征在于，S4所述类脂质溶液Tl与溶液T2的重量比为1:20~30。
6.根据权利要求4所述抗衰老制剂，其特征在于，SI所述脂质材料、硫辛酸、乳化剂和抗氧化剂的重量总和:乙醇:水的重量比为1:4~8:3飞；S3所述I相:II相的重量比为f 2:1
7.一种化妆品，其特征在于，在化妆品中的添加用量为5~10%重量百分比的权利要求1至6任一项所述抗衰老制剂。
【文档编号】A61Q19/08GK103550104SQ201310553885
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年11月8日 优先权日:2013年11月8日
【发明者】曾飒, 殷露琴, 周娟娟, 唐新明 申请人:广州栋方日化有限公司