038]选用上述替代PEG-PDLLA的共聚物和替代兰考韦泰的环肽后，对于肉桂霉素等具有活性氨基的环肽，可以参考图2的化学修饰反应制成替代Dur-PEG-PDLLA的靶向载体:即通过EDC和NHS活化共聚物末端的羧基，然后与作为靶向配体的环肽中的氨基缩合，最后通过透析和滤膜过滤，干燥滤液即得能够与细胞膜成分磷脂酰乙醇胺特异性结合的靶向载体；
对于例如植物大环寡肽kalata BI等类似结构的环肽，其分子结构中不具有活性的氨基，则可以通过m)C和NHS活化作为靶向配体的环肽末端的羧基，然后与共聚物中的氨基缩合，最后通过透析和滤膜过滤，干燥滤液即得能够与细胞膜成分磷脂酰乙醇胺特异性结合的靶向载体。
[0039]在本发明中，用于包覆Dur-PEG-PDLLA形成核壳结构混合胶束的pH敏感材料PEG-P(His)还可以替换为聚乙二醇和聚(β-氨基酯)的共聚物；也可以采用pH敏感化学键(如腙键、乙缩醛、原酸酯、乙烯醚等)链接的胶束:比如PEG与TOLLA采用腙键链接制备而成的胶束。
[0040]聚乙二醇和聚(β-氨基酯)的共聚物制备方法可以参考如图3所示的PEG-P(His)的制备反应方法。
[0041]以上内容是结合具体的实施例对本发明所作的详细说明，不能认定本发明具体实施仅限于这些说明。对于本发明所属技术领域的技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明保护的范围。
【主权项】
1.一种肿瘤靶向聚合物胶束，其特征是，包括：对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体修饰的第一聚合物载体。2.如权利要求I所述的一种肿瘤靶向聚合物胶束，其特征是，所述对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体为兰考韦泰、肉桂霉素和植物大环寡肽kalata BI中的一种，所述第一聚合物载体为包括亲水段和疏水段的共聚物，所述亲水段为聚乙二醇、聚环氧乙烷、聚乙烯吡咯烷酮、聚氨基酸、壳聚糖中的一种，所述疏水段为外消旋聚乳酸、左旋聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、己内酯、聚氨基酸中的一种。3.如权利要求I或2所述的一种肿瘤靶向聚合物胶束，其特征是，还包括用于包覆所述第一聚合物载体形成核壳结构混合胶束的第二聚合物载体，且所述第二聚合物载体在肿瘤组织的偏酸性环境中不稳定，在PH值为6. O?6. 5时解聚合。4.如权利要求3所述的一种肿瘤靶向聚合物胶束及其制备方法，其特征是，所述第二聚合物载体为聚乙二醇和聚组氨酸的共聚物、或聚乙二醇和聚氨基酯）的共聚物、或PH敏感化学键链接的胶束，所述pH敏感化学键为腙键、乙缩醛、原酸酯和乙烯醚中的一种。5.如权利要求I所述的一种肿瘤靶向聚合物胶束的制备方法，其特征是，包括对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体修饰第一聚合物载体的制备过程： 当对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体的分子结构中具有活性的氨基时，其包括以下步骤： 步骤Al. 1、通过1-(3- 二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺活化所述第一聚合物载体末端的羧基； 步骤Al. 2、使步骤一中活化的羧基与对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体中的氨基缩合； 步骤Al. 3、对步骤二的反应产物进行透析和滤膜过滤操作，干燥滤液即得能够与细胞膜成分磷脂酰乙醇胺特异性结合的靶向载体； 当对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体的分子结构中不具有活性的氨基时，其包括以下步骤： 步骤BI. 1、通过1-(3- 二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺活化对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体末端的羧基； 步骤BI. 2、使步骤一中活化的羧基与所述第一聚合物载体中的氨基缩合； 步骤BI. 3、对步骤二的反应产物进行透析和滤膜过滤操作，干燥滤液即得能够与细胞膜成分磷脂酰乙醇胺特异性结合的靶向载体。6.如权利要求5所述的一种肿瘤靶向聚合物胶束的制备方法，其特征是，包括兰考韦泰修饰第一聚合物载体的制备过程，且所述第一聚合物载体为聚乙二醇和外消旋聚乳酸的共聚物，其包括以下步骤： 步骤I. 1、将HOOC-PEG-PDLLA溶于N，N-二甲基甲酰胺中，先加入I-(3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐反应一段时间后，再加入交联剂N-羟基琥珀酰亚胺，室温搅拌48 ?72 小时，得到 PDLLA-PEG-CONHS ； 步骤I. 2、将步骤一的最终反应液过滤后，向其中滴加洛解有兰考韦泰的一■甲基亚讽洛液，之后加入三乙胺调节pH值至7以上，室温搅拌至溶液澄清； 步骤I. 3、将步骤二最终获得的溶液经经透析袋透析后过滤，得澄清透明溶液，冷冻干燥后得兰考韦泰修饰的聚乙二醇和外消旋聚乳酸的共聚物。7.如权利要求5或6所述的一种肿瘤靶向聚合物胶束的制备方法，其特征是，还包括在肿瘤组织的偏酸性环境中不稳定，在PH值为6. O?6. 5时解聚合，且用于包覆所述第一聚合物载体形成核壳结构混合胶束的第二聚合物载体的制备过程，所述第二聚合物载体为聚乙二醇和聚组氨酸的共聚物，其包括以下步骤： 步骤2. I :将Boc-His(Dnp)-OH ■ isopropanol即溶于异丙醇的N-(叔丁氧羰基）-I-(2，4- 二硝基苯基）-L-组氨酸溶解于1，4- 二氧六环中，加入氯化亚砜反应I小时，生成沉淀过滤，用1，4- 二氧六环及乙醚洗涤沉淀，将沉淀用硝基甲烷完全溶解后，加入足量无水乙醚重结晶，得Dnp-NCA ■ Hcl ； 步骤2. 2 :将步骤2. I制得的Dnp-NCA ■ Hcl用N，N- 二甲基甲酰胺溶解后加入碳酸钠中和盐酸，室温搅拌I小时后，加入mPEG-NH2 ■ Hcl的N，N- 二甲基甲酰胺溶液减压反应72小时后，离心后用微孔滤膜过滤得酱油色溶液，向其中加入乙醚后，静置使其沉淀，抽滤后真空干燥，得到的棕色固体PEG-b-poly (Nim-Dnp-His); 步骤2. 3 :将步骤2. 2制得的PEG-b-poly (Nim-Dnp-His)加入N，N- 二甲基甲酰胺溶解后，加入巯基乙醇反应过夜，脱去2，4-二硝基苯基将所得淡黄色溶液装入透析袋中透析，透析后先离心再过滤，滤液冷冻干燥后即得聚乙二醇和聚组氨酸的共聚物。8.如权利要求7所述的一种肿瘤靶向聚合物胶束的制备方法，其特征是，还包括对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体修饰第一聚合物载体和第二聚合物载体制备成核壳结构混合胶束的过程，其包括以下步骤： 将所制得的对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体修饰第一聚合物载体以及第二聚合物载体溶于水中，经超声处理后加入透析袋透析，制备成粒径为10?1000nm的核壳结构混合胶束。9.如权利要求8所述的一种肿瘤靶向聚合物胶束的制备方法，其特征是，还包括核壳结构混合胶束包载药物的方法： 将所制得的对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体修饰第一聚合物载体以及第二聚合物载体溶于水中制得载体溶液，通过溶剂将药物溶解后，滴加于所述载体溶液中，通过搅拌或超声使之均匀分散后透析，再滤膜过滤，即得载药胶束溶液。
【专利摘要】本发明公开了一种肿瘤靶向聚合物胶束，包括对细胞膜成分磷脂酰乙醇胺具有亲和力的靶向配体兰考韦泰修饰的第一聚合物载体，所述第一聚合物载体为聚乙二醇和外消旋聚乳酸的共聚物；还包括用于包覆所述第一聚合物载体形成核壳结构混合胶束的第二聚合物载体，且所述第二聚合物载体在肿瘤组织的偏酸性环境中不稳定，在pH值为6.0～6.5时解聚合，所述第二聚合物载体为聚乙二醇和聚组氨酸的共聚物。本发明基于细胞膜成分磷脂酰乙醇胺在细胞有丝分裂M相时外向化及肿瘤组织偏酸性的基础上，实现了细胞周期特异性靶向载体的功能，是一种高效、低毒、肿瘤细胞靶向治疗的载体。本发明同时公开了上述一种肿瘤靶向聚合物胶束的制备方法。
【IPC分类】A61K9/107, A61K47/34, A61K47/42
【公开号】CN105168130
【申请号】
【发明人】汤继辉, 李俊, 刘紫薇, 宋见, 纪玢琪, 李瑶, 刘俊节
【申请人】安徽医科大学
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年8月6日