I. 0 mmol)加入，反应时间约24 h左右，TLC (二氯甲烷：甲醇=10:1)监控，待原料大部分反应 后，反应结束。待反应液冷却至室温，加入适量的水至橙黄色固体完全析出，过滤，取滤饼， 烘干。将粗品用二氯甲烷等溶剂溶解后，滴加约I ml的盐酸乙醚溶液，过滤，取滤饼，再 将滤饼溶于水中，加适量饱和氢氧化钠溶液，固体析出，过滤烘干，再过柱(二氯甲烷：甲醇 =10:1)，得纯品 38. 89 mg，收率为 12%。
[0050] 实施例 22-25 重复实施例21，不同点在于：使用的原料不同，从而制得化合物28-31。具体如下： (1)将6, 9-二氯-ILY-茚并[l，2-c]喹啉-11-酮分别与3-羟基丙胺、N-甲基乙醇胺 反应可分别合成化合物28, 31。
[0051] (2)将6-氯-9-甲氧基-IW-茚并[l，2-c]喹啉-11-酮分别与2-羟基乙胺、 3_羟基丙胺反应可分别合成化合物29, 30。
[0052] 实施例26 3-溴-6-(2-(二乙氨基）乙基）-9-甲氧基-ILY-茚并[l，2-c]喹啉-11-酮（表1中 化合物3)的合成：
(1) 同实施例1. (2) 3-溴-9-甲氧基-5"-茚并[1，2-c]喹啉-6, 11-二酮的合成 取7-溴-3-(4-甲氧基苯基）-2-氧代-1，2-二氢喹啉-4-羧酸（4g，KX 69 mmol)与 IOOmL的三口烧瓶中，再倒入PPA (23. 48 g，69. 49 mmol)，反应温度设为120°C，搅拌反应时 间在1小时后，TLC (乙酸乙酯：石油醚：甲酸=5:5:2d)监测，反应完全后，迅速将反应液倒 入配好的冰水中，充分搅拌冰水,大量紫黑色的固体析出，过滤,滤饼用少量饱和NaOH溶液 洗三遍，再水洗三遍，滤饼烘干。采用低极性的石油醚洗，过滤，得紫黑色固体3.81 g，该反 应收率约为100%。
[0053] (3)3-溴-6-(2-(二乙氨基）乙基）-9_甲氧基-IW-茚并[l，2_c]喹啉-11-酮 (表1中化合物3)的合成 取无水处理的DMF于100 mL的三口烧瓶中，再放入称好的中间体3-溴-9-甲氧 基-5H-茚并[1，2-c]喹啉-6, 11-二酮（800 mg, 2. 25 mmol)和 K2CO3Q. 89 g，13. 5 mmol) 常温下搅拌30 min后，再将原料N, N-二乙胺基氯乙烧盐酸盐（565. 0 mg, 3. 285 mmol)加 入反应液中，温度为70°C反应8小时，TLC (二氯甲烷：甲醇=17:1)监测，反应完全，将反应 也倒入水中，二氯甲烷萃取4遍，再将有机相用饱和食盐水洗5遍，无水硫酸钠干燥，减压抽 干，采用中压纯化系统过柱，得到258mg的化合物3纯品，收率为25. 3%。
[0054] 实施例 27-31 重复实施例26,不同点在于：使用的原料不同，从而制得化合物4, 5, 8-10。具体如下： (1)将3-溴-9-甲氧基-5"-茚并[l，2-c]喹啉-6, 11-二酮分别与吡咯烷基氯乙烷盐 酸盐、吗啉基氯乙烷盐酸盐反应可分别合成化合物4, 5。
[0055] (2)将3_溴_9_氯-5//-讳并[1，2_c]喹啉_6, 11-二酮分别与二乙胺基氯乙烧盐 酸盐、吡咯烷基氯乙烷盐酸盐、吗啉基氯乙烷盐酸盐反应可分别合成化合物8-10。
[0056] 本发明合成的通式（I)中目标产物的化学结构见表1。核磁氢谱、碳谱、质谱熔点 系统表征了目标产物的化学结构，其具体数据见表1，2, 3。
[0057] 表1化合物的化学结构及质谱和熔点
NT=未测定 化合物1-31分别为实施例1-31中制备的化合物。 [0058] 表2通式⑴中目标化合物的氢谱数据
实施例32 :体外抗肿瘤活性测试试验 1.实验细胞株： 本实验测试的细胞株采用：A549(人肺腺癌细胞）、MDA-MB-231 (人乳腺癌细胞）、SK-Hep-I (人肝癌细胞），这些细胞株均由上海医药工业研究院药理实验室冻存和传代。
[0059] 2?样品配置： 样品均制备成盐酸盐，用DMSO (Merck)溶解后，加入PBS (-)配成1000 ii g/ml的溶液或 均匀的混悬液，然后用含DMSO的PBS (-)稀释。阳性对照药为SF-27,阿霉素（DOX)。
[0060] 3?试验方法 本次体外细胞抗肿瘤活性实验采用MTT法。96孔板每孔加入浓度为4-5 X IO4个/mL 的细胞悬液100 U L，置37°C，5% CO2培养箱内。24 h后，加入样品液，10 L/孔，设双复孔， 37°C，5% CO2作用72h。每孔加入5 mg/mL的MTT溶液20 ii L，作用4 h后加入溶解液，100 P L/孔，置培养箱内，溶解后用全波长多功能酶标仪测570 nm OD值。（体外抗肿瘤活性见 表3) 表3.通式（I)中目标化合物对人体肿瘤细胞的体外增殖抑制作用（iiM)
从表3可知，本发明的6-烷氧基茚并喹啉酮类化合物对人肺癌、肝癌和乳腺癌显示较 好的光谱抗肿瘤活性，特别是部分化合物对人肝癌细胞显示了更好的细胞毒活性，其中大 部分化合物要优于阳性对照SF-27,例如6位的伯胺、仲胺侧链化合物27和31的细胞毒活 性比6位叔胺侧链的SF-27提高了 10倍左右。
[0061] 尽管前面示例性地说明了本发明的优选实施方案，但是应该理解本发明并不局限 于本文所公开的明确说明，在此保留对其进行落入所附权利要求书范围内的各种改变的权 利。
【主权项】
1. 一种通式（I)所示的茚并喹啉酮类化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前体 药物或多晶型物：式中， Ri为下列基团中的任一类：a)氢；b) C1-8的直链或支链烷氧基；c)卤素； R2、私独立地为下列基团中的任一类：a)氢；b) C1-8的直链或支链烷基；b) C1-8的 直链或支链烷氧基；d)卤素； R4为-(CH丄R5,其中m为2-4, R5可为饱和或不饱和的含氮杂环或-NR6R7，其中R6、R 7分 别独立地为下列基团中的任一类：a)氢；b) C1-8的直链与支链的烷基。2. 如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1为甲氧基或溴中的任一种。3. 如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2为甲基、卤素、甲氧基或氢中的任一种。4. 如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R3为甲氧基或氢中的任一种。5. 如权利要求1至3中任一所述的化合物，其特征在于，R4的m为2-3, R5可为饱和 或不饱和的5-6元含氮杂环或-NR6R7，其中R 6、R7独立地为下列基团中的任一类：a)氢；b) C1-8的直链与支链的烷基。6. 如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述化合物为化合物1-31。7. -种组合物，含有安全有效量的权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐及 药学上接受的载体。8. -种如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药、抗真菌药 或抗病毒药物中的用途。9. 一种如权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：在惰性溶 剂中，碱性条件下，将式（II)化合物与R 4OH在碱性环境中进行反应，从而形成式（I)化合 物：式中，R2、R3、R4的定义如权利要求1所示。
【专利摘要】本发明涉及医药技术领域，具体涉及一类式(<b>I</b>)所示的6-烷氧基取代的茚并喹啉酮类化合物。该类化合物对人肺癌、肝癌、乳腺癌等多种肿瘤细胞显示了良好的抗肿瘤活性，有望用于制备新型抗肿瘤药物。与喜树碱类药物相比，该类化合物结构稳定，水溶性好。本发明还公开了式(<b>I</b>)化合物的制法，含所述化合物的药物组合物及其在制备抗肿瘤等药物中的应用。
【IPC分类】A61K31/473, A61P35/02, A61P31/12, A61K31/5377, C07D221/18, A61P35/00, A61P31/10
【公开号】CN105175334
【申请号】
【发明人】章玲, 宋云龙, 王鸿玉, 亓云鹏, 曾强, 曾伟, 王志鹏, 李瑶, 辜雪琴, 刘婷, 朱驹
【申请人】中国人民解放军第二军医大学
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2014年6月10日