lu，谷氨酸；（3)Ser，丝氨酸；（4)His，组氨酸；（5)Gly，甘氨酸； (6)Thr，苏氨酸；（7)Arg，精氨酸；（8)Ala，丙氨酸；（9)GABA，γ-氨基丁酸；（lO)Tyr，酪氨酸； (ll)Val，缬氨酸；（12)Met，蛋氨酸；（13)Phe，苯丙氨酸；（14)Ile，异亮氨酸；（15)Leu，亮氨 酸；（16)Lys，赖氨酸；（17)Pro，脯氨酸。
[0014]采用上述技术方案所产生的有益效果在于:本发明针对含乳饮料的特性研制了专 用的处理试剂及试剂用量及处理参数，使得检测步骤的工艺参数相互严密配合，实现了对 含乳饮料中γ -氨基丁酸和16种蛋白水解氨基酸的一步式高灵敏度、高稳定性的检测，对提 高乳制品产品品质和加强监督具有重要的实际意义。
[0015]申请人针对本发明的检测方法进行了系列试验。参看附图1、2(图1是γ-氨基丁酸 和16种标准氨基酸的分离谱图；图2是实施例1中含乳饮料中γ -氨基丁酸和16种蛋白水解 氨基酸的分离谱图），可见本发明的检测方法能够实现对含乳饮料中γ-氨基丁酸和16种蛋 白水解氨基酸的一步式同时检测，分离图谱十分清晰和可靠。
[0016] 同时，申请人的系列试验显示本检测方法稳定性极高。利用其检测含乳饮料中γ -氨基丁酸和16种蛋白水解氨基酸含量，检测限为1.10pmol/yL -3.86pmol/yL，RSD分别为 3.62%-8.51%和2.56%-11.63%，精密度和准确度极高。下表为丫-氨基丁酸和16种氨基酸的 测试结果。
【附图说明】
[0017] 图1是γ-氨基丁酸和16种标准氨基酸的分离谱图。
[0018] 图2是含乳饮料中γ-氨基丁酸和16种蛋白水解氨基酸的分离谱图（实施例1)。
【具体实施方式】
[0019] 以下实施例详细说明了本发明。本发明所使用的各种原料及各项设备均为常规市 售产品，均能够通过市场购买直接获得。
[0020] 实施例1 A、制备含乳饮料水解样品 取含乳饮料1. 〇g置于水解管中，加入浓盐酸2mL，再加入新蒸馏的苯酚3滴，将水解管放 入冷冻剂中，冷冻3imn，充入高纯氮气并在充氮气状态下拧紧螺盖，将水解管放入110°C的 恒温干燥箱中，水解24小时后取出冷却。打开水解管，将水解液全部过滤转移到25mL容量瓶 中，取滤液lmL用真空干燥器在50°C干燥，蒸干，用lmL 0. lmol/L的盐酸溶解，0.45μπι的滤膜 过滤来高效液相色谱进样瓶中； B、 水解产物自动柱前衍生处理，获取衍生产物 吸取硼酸缓冲液5份，吸取邻苯二甲醛1份，吸收样品1份，混匀，再吸取9-芴基甲基氯甲 酸酯1份，混匀，准备上样； C、 高效液相色谱法同时γ -氨基丁酸和16种氨基酸 高效液相色谱的分离条件为，色谱柱:Hypersil ODS C18液相色谱柱;流动相A: lOOOmL 纯水中，加入8g结晶乙酸钠，混匀，pH调为7.20;加入5mL四氢呋喃;流动相B: 400mL纯水中， 加入12g结晶乙酸钠，混匀，pH调为7.20;加入800mL乙腈和800mL甲醇，混匀；梯度洗脱条件 见下表：
麥有附囹刀头施例i求1十卜百孔认科τ γ-m巷」阪和茧H7」、胛m巷阪tfjor尚 谱图；各检测物的出峰顺序依次为：（1 )Asp，天门冬氨酸；（2)Glu，谷氨酸；（3)Ser，丝氨酸； (4)His，组氨酸；（5)Gly，甘氨酸；（6)Thr，苏氨酸；（7)Arg，精氨酸；（8)Ala，丙氨酸；（9) GABA，γ-氨基丁酸；（10)Tyr，酪氨酸；（ll)Val，缬氨酸；（12)Met，蛋氨酸；（13)Phe，苯丙氨 酸；（14)Ile，异亮氨酸；（15)Leu，亮氨酸；（16)Lys，赖氨酸；（17)Pro,脯氨酸。
[0021] 实施例2 A、制备含乳饮料水解样品 取含乳饮料1. 〇g置于水解管中，加入浓盐酸3mL，再加入新蒸馏的苯酚4滴，将水解管放 入冷冻剂中，冷冻5imn，充入高纯氮气并在充氮气状态下拧紧螺盖，将水解管放入109°C的 恒温干燥箱中，水解24小时后取出冷却。打开水解管，将水解液全部过滤转移到25mL容量瓶 中，取滤液2mL用真空干燥器在40°C干燥，蒸干，用lmL 0. lmol/L的盐酸溶解，0.45μπι的滤膜 过滤来高效液相色谱进样瓶中； Β、水解产物自动柱前衍生处理，获取衍生产物 吸取硼酸缓冲液5份，吸取邻苯二甲醛1份，吸收样品1份，混匀，再吸取9-芴基甲基氯甲 酸酯1份，混匀，准备上样； C、高效液相色谱法同时γ -氨基丁酸和16种氨基酸 高效液相色谱的分离条件为，色谱柱:X Bridge C18液相色谱柱;流动相A: 1000mL纯 水中，加入6g结晶乙酸钠，混匀，pH调为7.18;加入4mL四氢呋喃;流动相B:400mL纯水中，加 入l〇g结晶乙酸钠，混匀，pH调为7.18;加入800mL乙腈和800mL甲醇，混匀；梯度洗脱条件见 下表：
恆测1守到γ -安卩整」不低安卩整眼讯土似τ巴1 苜团，食恆测似m、j m啤顺斤w认;/、」： (I) Asp，天门冬氨酸；（2)Glu，谷氨酸；（3)Ser，丝氨酸；（4)His，组氨酸；（5)Gly，甘氨酸；（6) Thr，苏氨酸；（7)Arg，精氨酸；（8)Ala，丙氨酸；（9)GABA，γ-氨基丁酸；（lO)Tyr，酪氨酸； (II) Val，缬氨酸；（12)Met，蛋氨酸；（13)Phe，苯丙氨酸；（14)Ile，异亮氨酸；（15)Leu，亮氨 酸；（16)Lys，赖氨酸；（17)Pro，脯氨酸。
[0022] 实施例3 A、制备含乳饮料水解样品 取含乳饮料l.Og置于水解管中，加入6mol/L盐酸10mL，再加入新蒸馏的苯酚3滴，将水 解管放入冷冻剂中，冷冻3imn，充入高纯氮气并在充氮气状态下拧紧螺盖，将水解管放入 111°C的恒温干燥箱中，水解24小时后取出冷却。打开水解管，将水解液全部过滤转移到 25mL容量瓶中，取滤液2mL用真空干燥器在45°C干燥，蒸干，用lmL 0 . lmol/L的盐酸溶解， 0.45μπι的滤膜过滤来高效液相色谱进样瓶中； Β、水解产物自动柱前衍生处理，获取衍生产物 吸取硼酸缓冲液5份，吸取邻苯二甲醛1份，吸收样品1份，混匀，再吸取9-芴基甲基氯甲 酸酯1份，混匀，准备上样； C、高效液相色谱法同时γ -氨基丁酸和16种氨基酸 高效液相色谱的分离条件为，色谱柱:Hypersil ODS C18液相色谱柱;流动相A: 1000mL 纯水中，加入5g结晶乙酸钠，混匀，pH调为7.25;加入3mL四氢呋喃;流动相B: 400mL纯水中， 加入8g结晶乙酸钠，混匀，pH调为7.25;按体积计加入800mL乙腈和800mL甲醇，混匀;梯度洗 日 A/fet m n
1?识U1 守；tu i _安J 敗彳口 丄DtT仞w'tt 安ΗΧ?」土'巴 二 m识U'fJ H、J m w羊川火/丁: (I) Asp，天门冬氨酸；（2)Glu，谷氨酸；（3)Ser，丝氨酸；（4)His，组氨酸；（5)Gly，甘氨酸；（6) Thr，苏氨酸；（7)Arg，精氨酸；（8)Ala，丙氨酸；（9)GABA，γ-氨基丁酸；（lO)Tyr，酪氨酸； (II) Val，缬氨酸；（12)Met，蛋氨酸；（13)Phe，苯丙氨酸；（14)Ile，异亮氨酸；（15)Leu，亮氨 酸；（16)Lys，赖氨酸；（17)Pro，脯氨酸。
[0023] 实施例4 A、制备含乳饮料水解样品 取含乳饮料1 .〇g置于水解管中，加入6mol/L盐酸15mL，再加入新蒸馏的苯酸4滴，将水 解管放入冷冻剂中，冷冻5imn，充入高纯氮气并在充氮气状态下拧紧螺盖，将水解管放入 110°C的恒温干燥箱中，水解24小时后取出冷