抗微生物化合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及可用于通过刺激先天抗微生物肤系统来治疗微生物感染的化合物。
【背景技术】
[0002] 先天免疫构成了人类对抗微生物的防御系统的前线。抗微生物肤(AMP)为在上皮 表面组成性合成和/或诱导的先天防御的重要组成，其中发生与微生物的初始接触（1)dAMP 在自然界中分布广泛(从真菌、植物和无脊椎动物到脊椎动物），其建立了运些防御为进化 保守的。AMP具有对抗各种病原体即病毒、细菌、真菌和寄生虫的广泛活性(2)。在哺乳动物 中存在两大类AMP即防卫素(a-和e-家族)和抗菌肤(3,4)。除了抗微生物活性巧)之外，还已 经显示运些肤作为用于获得性和先天免疫两者的细胞化学引诱剂并调节免疫应答(6-8)。 因此，AMP构成了先天和获得性免疫之间的关联。
[0003] AMP的表达可由一些化合物诱导。发现下酸盐/醋(BA)诱导抗菌肤在上皮细胞中的 表达(9)。另外，下酸钢抵消病原体对AMP表达的下调，从而在志贺菌病的兔子模型中导致病 原体从体内上皮表面的消除（10)。苯基下酸盐/醋(PBA)作为下酸盐/醋的类似物显示出上 调化-37的表达，而化-37为在人类、上皮细胞系和单核细胞中的唯一抗菌肤（11)。还报道了 维生素D3的活性形式即1,25-二径基维生素D3加强了化-37在角质化细胞、免疫细胞和上皮 细胞中的表达（12-14)。有趣的是，发现PBA和1,25-二径基维生素D3 W协同方式上调化-37 (11)。
[0004] 抗生素抗性在细菌病原体中的持续出现对公众健康产生了极大的挑战。药物开发 中新抗生素的获得尚未匹配该威胁，运是因为在过去数十年中仅开发出很少的新药物（15， 16)。通过提高人类自身"天然抗生素"的表达来增强对病原体的免疫防御可代表感染性疾 病中新颖或补充性的药物干预。重要的是，具有重叠抗菌机制的AMP的多样性确保了使微生 物抵抗的风险最小化(17)。
[0005] W02009/087474(AktheIia PharmaceuticalS)大体上设及苯基下酸盐/醋和类似 化合物及其甘油醋及其它化合物包括维生素D在动物中通过刺激先天抗微生物肤防御系统 诸如人类中的化-37来治疗、预防或抵消微生物感染的用途。优选化合物包括取代有苯基的 下酸盐/醋衍生物。该出版物尤其描述了在口服给药后CAP-lWLk37的兔同源物)如何在兔 结肠上皮中被诱导。该出版物还描述了化-37在支气管上皮细胞系VAlO中的表达。该出版物 还描述了患有志贺菌病的兔子的治愈。
[0006] W02012/0140504(Raq化等人)也设及化合物在特别的新祀标、器官、细胞或组织中 刺激先天抗微生物肤防御系统诸如人类中的化-37的用途。
[0007] W02008/073174(GAliD)描述了通过使用1，25(0H)2维生素 D3(l，2加 3)来调苄基因 表达和先天免疫应答的方法和组合物。该化合物与非特异性组蛋白去乙酷化酶抑制剂 (HDACi)包括下酸盐/醋或曲古抑菌素 A(化ichostatin A))-起进行了测试。
[000引 US20080038374(Stahle)描述了能够特异性且直接上调hCAPlS的维生素 D化合物 在制备具有抗微生物作用的药物W治疗缺乏化-37的病症诸如慢性溃瘍和特应性皮炎中的 用途。
[0009] Liu等人"Toll-Like Receptor Triggering of a Vitamin D-Mediated Human Antimicrobial Response" ,2006年3月24日，第311 卷，SCIENCE,第 1770-1773页所描述的数 据据说支持了化R和由维生素D介导的先天免疫之间的关联并暗示人群产生维生素D的能力 差异可能促成对微生物感染诸如结核分枝杆菌的易感性。
[0010] Hata等人（2008) "Administration of oral vitamin D induces cathelicidin production in atopic individuals"! ALLERGY 化IN IMMUNOL,第 122卷，第4期描述了一 项研究，其中14例正常对照受试者和14例患有中度至重度特应性皮炎的特应性受试者用口 服维生素D3治疗W观察运样能否克服特应性患者中诱导抗菌肤的相对不足。用4000IU/d 口 服维生素时h充21天后，AD损害皮肤显示出统计学上显著的抗菌肤表达增加。
[001 U PBA和维生素D在体外VAlO细胞系中的协同作用已在出版物Steinmann等人(2009) ANTIMICT0BIAL AGENTS ANDC肥MOT肥RAPY(53),5127-5133中得到证实。
[0012] Martineau等人化ancet 2011;377:242-50)描述了用高剂量维生素D治疗TB患者 的II期研究。
[0013] US 200210076393 Al设及使用异亮氨酸或其活性异构体或类似物在真核细胞诸 如哺乳动物细胞及各种器官中刺激防卫素产生的方法。其还设及预防和治疗感染和其它各 种疾病状态及在其中发现防卫素的各种组织中刺激免疫系统的方法。
[0014] 尽管公开了上述内容，但是应当理解的是，提供用于使对抗W下生物体或疾病的 先天免疫应答得W提高的化合物或化合物的组合可对本领域作出贡献，尚未鉴定所述生物 体或疾病W上述方式或在与已经鉴定的那些组织不同的组织中被祀标。
【发明内容】
[0015] 本发明提供一类新的化合物，其为化-37的强效诱导剂。运已经在含有具有与人抗 菌肤基因CAMP偶联的蛋光素酶的构建体的重组细胞系筛选(Nyl6n等人，2013)及正常结肠 上皮细胞培养化T-29细胞）中均得到证实。用于本发明的化合物为苯甲酯化亚苯基二胺或 其衍生物或类似物，其在下文中更详细地描述。
[0016] 优选化合物为N-(2-氨基苯基)苯甲酯胺、N-(2-氨基苯基)-4-甲氧基苯甲酯胺、N-(2-氨基苯基）-4-硝基苯甲酯胺、（4-((2-氨基苯基）氨甲酯基）苄基）氨基甲酸节醋、（4-((2-氨基苯基)氨甲酯基)苄基)氨基甲酸化晚-3-基甲基醋、2-(4-((4-((2-氨基苯基)氨甲 酷基）苄基)氨甲酯基）-lH-l，2,3-S挫-1-基）乙酸甲醋和N-(2-氨基苯基)-4-((4-(二甲 基-M-氮烷基)苯基)氨基)苯甲酯胺。
[0017] 本发明提供本申请所述的化合物在治疗感染性疾病中的用途。下文描述了本发明 所祀标的优选的微生物祀标和疾病。
[0018] 该类新的诱导剂的运种有效性是预料不到的且表明运些化合物及其类似物可经 由与用于刺激先天抗微生物防御系统的先前一些化合物不同或额外的刺激机制而发挥作 用。尽管一些化合物已知为组蛋白脱乙酷基酶化DAC)抑制剂，但是在本申请所述的结果的 基础上，在皿4巧巧制有效性（ICso)和刺激化-37表达之间似乎没有直接关系，运表明诱导主 要通过其它机制发生。
[0019] 本发明的具体方面提供使用本申请所述的化合物治疗(包括预防）动物中的微生 物感染的方法。
[0020] 本发明还提供本申请定义的化合物，其用作通过刺激先天抗微生物肤防御系统来 治疗(例如抵消由几种病原体所引起的下调)人类和其它动物中的微生物感染的药物。
[0021] 本发明化合物通过刺激先天抗微生物肤防御系统而显示出抗微生物作用。
[0022] 通常，本发明的用途将引起相关的肤同样分泌到上皮表面上（例如在胃肠道或肺 中）。运继而将导致抗微生物活性在该表面上的提高(且因此改善其屏障功能)并治疗由其 引起的微生物感染和疾病。
[0023] 另外，如在下文实施例中所示，本申请定义的化合物也刺激自隧，而自隧被认为通 过诱导化-37或与其无关，由此额外地促进消除微生物感染。
[0024] 本发明所祀标的微生物祀标和疾病可被相信由此受益。本申请描述了优选的祀 标，还包括疾病诸如肺炎、结核病、志贺菌病和其它肠道感染(30，31)。
[0025] 本发明的多个方面包括用于治疗、预防或抵消微生物感染的方法，所述微生物感 染包括细菌、病毒、真菌和寄生虫感染(还包括由抵抗目前使用的抗生素的菌株所引起的感 染），所述方法包括给予包含促分泌有效量的至少一种本申请定义的本发明化合物的药物。
[0026] 在另一个方面，本发明提供用于本申请所述的方法的药物组合物，例如用于治疗、 预防或抵消微生物感染，包括W上提及的类型，所述药物组合物包含作为活性成分的至少 一种本发明化合物及典型地包含至少一种药用赋形剂。
[0027] 在另一个方面，本发明提供本发明化合物在制备用于本申请所述方法的药物中的 用途。
[0028] 本发明的一些方面和实施方案现将更详细地描述。
[0029] 在一个方面，本发明提供通式(I)的化合物，其用于治疗动物中的微生物感染的方 法：
[0031] 其中：
[0032] Q 选自 91、92、93、94、95和96:
[0034] n为0或 I;
[0035] L选自-(C出）m-、_C( = 0)-、-(C出）m-C( = 0)-、-〇-(C出）m-C( = 0)-、-〇_C( = 0)-(C 出）m-(C = 0)-、-NH-C( =0)-、-NR-C( =0)-、-NH-(C 出）m-C( =0)-、-NR-(CH2)m-C( =0)-、-NH-C( =0)-(C 出）m-C( =0)-、-NR-C( =0)-(CH2)m-C( =0)-、-C( =0)-NH-(CH2)m-C( =0)-和-(C出)m-(CHRL)-C(=0)-，其中m为I至4的整数；
[0036] Al和A2与它们所连接的原子一起形成任选取代的C6-14芳基或杂芳基；
[0037] A3当存在时选自H和任选取代的Ci-4烷基；
[0038] RN选自H和任选取代的化1-4烷基；
[0039] Bi、b2、b3、B哺B日中的一个为式-X-RX的基团，且其它独立选自H和RB;
[0040] 其中每个-RB独立选自面素、-CF3、-R、-OH、-OR、-0CF3、-C( = 0)0H、-C( = 0)OR、-C (=0)R、-0C(=0)R、-W2、-NHR、-NR2、-N02、-C(=0)NH2、-C(=0)NHR、C(=0)NR2、-S(=0)R、-S(=0)2R、-S(=0)2N 化或-CN;
[0041 ] X选自共价键或Ci-3亚烷基；
[0042] RX 选自-H、RXX 或 RXY.
[0043] 其中；
[0044] rXx为面素、-CF3、-OH、-OR、-0CF3、-C (= 0) OH、-N02、-畑2、-NHR、-NR2、-C (= 0)畑2、-C (=0)NR2、-S(=0)R、-S(=0)2R、-S(=0)2NR2或-CN;且
[00例 RXY为式-lX-rYy基团；
[0046] 其中 LX 选自-NH-C ( = 0) -0-、-NH-C ( = 0) -NH-、-NH-C (= 0) -、-O-C (= 0) -NH-、-O-C (=0)-〇-、-Q-(C = O) -、-C (=0)-畑-、-C (=0)-〇-、-C (=0)-;
[0047] 且护Y选自 Ci_4烷基、C3-6环烷基、-C6-14芳基、-LY-Cs-14芳基、-LY-0-C6-14芳基、-C5-6杂 芳基、-LY-Cs-6杂芳基和-LY-O-Cs-6杂芳基，其中-LY-为Cl-3亚烷基，且其中每个所述基团为任 选取代的；
[0048] RL选自面素、-RLL、-CF3、-OH、-ORLL、-N02、-畑2、-NHRLl、-NR2、-NH-C( = 0) -RLL、-NH-C (=O ) -0-RLL，其中 RLL选自-Ci-4烷基、-C3-跡烷基、-Ph、-LL-Ph、-Cs-6杂芳基、-LL-Cs-6杂芳基， 其中-LL-为Cl-3亚烷基；
[0049] 且其中每个R独立为打-4烷基。
[00加]进一步的描述和优选方案 [0051 ]基团Q
[0052] 在式（I)化合物中，基团Q选自91、92、93、94、95和96:
[0054]其中B哺B2(及存在时的B3、B哺B5)中的一个为式-X-RX的基团，且其它独立选自H 和RB。换言之，每个可能的Q基团在可用的位置上包括一个-X-RX取代基，在其它可用的位置 上为未取代的(-H)或取代有基团-RB。
[0化5]在一些实施方案中，Q为苯基即Ql:
[0化7] 其中Bi、B2、B3、B4和B5中的一个为式-X-RX的基团，且其它独立选自H和RB。
[0化引在一些实施方案中，B3为式-X-RX的基团，且B\B2、B4和B 5独立选自H和RB。因此，在 运些实施方案中，Q为下式的基团：
[0060] 在其它实施方案中，B2为式-X-RX的基团，且b1、B3、B4和B 5独立选自H和rB。在其它实 施方案中，Bi为式-X-RX的基团，且B2、B3、B哺B 5独立选自H和rB。
[0061] 在一些实施方案中，Bl、B2、B3、B哺B5中的一个为式-X-RX的基团，且其它独立为H。
[0062] 在一些实施方案中，B2或B3为式-X-RX的基团，且其它独立为H。
[0063] 在一些实施方案中，B3为式-X-RX的基团，且其它独立为H。
[0064] 在一些实施方案中，Q为化晚基Q2、Q3或Q4:
[0066] 其中Bi、B2、B3和B4中的一个为式-X-RX的基团，且其它独立选自H和RB。
[0067] 在一些实施方案中，b1、B2、B3和B4中的一个为式-X-RX的基团，且其它独立为H。在一 些所述实施方案中，X为共价键，且RX为-H。
[0068] 在一些实施方案中，Q为Q2。
[0069] 在一些实施方案中，Q为Q3。
[0070] 在一些实施方案中，Q为Q4。
[0071] 在一些实施方案中，Q为咪挫基Q5:
[0073] 其中Bi和B2中的一个为式-X-RX的基团，且其它选自H和RB。
[0074] 在一些实施方案中，Bi和B2中的一个为式-X-RX的基团，且其它为-H。在一些所述实 施方案中，X为共价键，且RX为-H。
[00巧]在一些实施方案中，Q为吗I噪基Q6:
[0077] 其中Bi、B2、B3、B4和B 5中的一个为式-X-RX的基团，且其它独立选自H和RB。
[007引在一些实施方案中，81、82、83、84和8 5中的一个为式-乂-3<的基团，且其它独立为山 在一些所述实施方案中，X为共价键，且RX为-H。
[0079] 基团 RB
[0080] 当存在时，每个-RB基团独立选自面素、-CF3、-R、-OH、-OR、-OC的、-C ( = 0) OH、-C (= 0)0R、-C(=0)R、-0C( = 0)R、-NH2、-NHR、-NR2、-N02、-C(=0)NH2、-C(=0)NHR、C(=0)NR2、-S (=0)R、-S( =0)2R、-S( =0)2N 化或-CN。
[0081 ]在一些实施方案中，-RB选自面素（即-F、-Cl、-Br、-I)、-CF3、-R、-OH、-OR、-畑2、-NHR、-NR2、-N02和-CN。
[0082] 在一些实施方案中，-rB选自-〇山-〇3、-畑2、-饥瓜和-顺2。
[0083] 在一些实施方案中，-RB选自-OH或-OR。
[0084] 在一些实施方案中，-RB为-OR。
[0085] 在一些实施方案中，-RB为-OMe。
[00化]在一些实施方案中，-RB为-R。
[0087] 在一些实施方案中，-RB为-Me。
[00则 基团X-RX
[0089] 在基团-X-RX中，X选自共价键或Ci-3亚烷基，且RX选自H、RXX或rXY。
[0090] 在一些实施方案中，X为共价键(即基团-X-RX为式-RX的基团）。
[0091] 在一些实施方案中，X选自打-3亚烷基。
[0092] 在一些实施方案中，X选自-畑2-、-CH2CH2-、-C出畑2邸2-、-CH(細3) -、-CH(細3 ) C出-、-C出 CH (C出）-或-CH (C出 C出）-。
[0093] 在一些实施方案中，X为-012-。
[0094] 在一些实施方案中，RX为H。
[0095] 在一些实施方案中，RX为RXX。RXX选自面素、-C的、-OH、-OR、-OC&、-C(=0)0H、-N02、-NH2、-NHR、-N 化、-C(=0)NH2、-C(=0)NR2、-S(=0)R、-S(=0)2R、-S(=0)2NR^P-CN。
[0096] 在一些实施方案中，rXX 选自-OH、-0R、-N02、-NH2、NH^PNR2。
[0097] 在一些实施方案中，rXX选自-0R、-N02和-NR2。
[009引在一些实施方案中，rXX为-0Me、-N02或-NMe2。
[0099] 在一些实施方案中，RX为rXY，其中rXY为式-lX-rYY的基团。
[0100] LX 选自-NH-C ( = 0) -0-、-NH-C ( = 0) -NH-、-NH-C ( = 0) -、-O-C ( = 0) -NH-、-O-C (= 0)-0-、-0-(C = 0)-、-C( =0)-NH-、-C( =0)-0-和-C( =0)-。
[0101 ]在一些实施方案中，lX 选自-NH-C( =0)-0-、-NH-C( =0)-和-C( =0)-畑-。
[0102] 在一些实施方案中，lX为-NH-C(=0)-0-。
[0103] 在一些实施方案中，lX为-NH-C(=0)-。
[0104] 在一些实施方案中，LX为-C(=0)-NH-。
[0105] RYY选自 C1-4烷基、C3-6环烷基、-C6-14芳基、-LY-C6-14芳基、-LY-0-C6-14芳基、-C日-6杂芳 基、-LY-Cs-6杂芳基和-LY-O-Cs-6杂芳基，其中-LY-为Cl-3亚烷基，且其中每个所述护Y基团为任 选取代的。
[0106] 在一些实施方案中，RYY独立为-C6-14芳基、-LY-Cs-14芳基、-C5-6杂芳基或-LY-Cs-6杂 芳基，其中所述C6-14芳基和Cs-6杂芳基为任选取代的。
[0107] 在一些实施方案中，RYY独立为-Ph、-LY-化、C5-6杂芳基或-LY-Cs-6杂芳基，其中所述 化和C5-6杂芳基为任选取代的。
[010引在一些实施方案中，RYY独立为-17-化或-LY-Cs-6杂芳基，其中所述化和C5-6杂芳基 为任选取代的。
[0109] 在一些实施方案中，RYY独立为-LY-C6-14芳基，其中所述C6-14芳基为任选取代的。
[0110] 在一些实施方案中，RYY独立为-LY-Ph,其中所述化为任选取代的。
[0111] 在一些实施方案中，RYY独立为
[0112] 在一些实施方案中，-17-独立选自-C出-、-C出C此-、-OfeC出C出-、-CH (C曲）-、-CH (C出）C出-、-C出 CH( C出）-和-CH (C出 C出）-。
[0113] 在一些实施方案中，-17-独立为-at-。
[0114] 在一些实施方案中，每个所述RYY基团任选取代有一个或多个选自W下的取代基:-F、-C1、-Br、-1、-R、-CF3、-OH、-OR、-0CF3、-N02、-LYY-OH、-LYY-OR、-畑2、-NHR、-NR2、-LYY-NH2、-lYY-NHR、-LYY-N 化、-CO 抽、-C02R、-LYY-CO 抽、-LYY-C02R、-陆和-LYY-Ph，其中 lYy 为 Ci-3 亚烷基。
[0115] 在一些实施方案中，每个所述RYY基团任选取代有一个或多个选自W下的取代基:- OH、-OR、-LYY-OH、-LYY-OR、-N 此、-NHR、-NR2、-LYY-N 此、-lYY-NHR、-LYY-NR2、-LYY-C02H、-LYY-CO2R、-陆和-LYY-Ph，其中lYy为Cl-3亚烷基。
[0116] 在一些实施方案中，每个所述RYY基团任选取代有一个或多个选自W下的取代基:-畑2、-NHR、-N