包含透明质酸和甲哌卡因的组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及包含透明质酸或其盐的无菌且可注射的组合物领域，尤其是软组织填 充物组合物，用于特别是增强和/或修复软组织，包括牙周组织，尤其用于治疗角蛋白材料 如皮肤的缺陷和瑕疵。本发明还设及相关的方法。
【背景技术】
[0002] 已经努力开发对纠正皮肤缺陷，如瘤痕和皱纹或对增强受试者的组织有用的组合 物，W改善皮肤，特别是面部皮肤的外观。纠正运样的缺陷所用的主要方法设及向临近目的 或所需组织增强的皮肤的真皮皮层中注射填充物组合物。
[0003] 透明质酸是细胞外基质化CM)的主要组分。因此，主要在皮肤上发现大量的透明质 酸。它也是关节软骨基质的主要生理学上的组分且在滑液中尤其丰富。
[0004] 因此，透明质酸，其酸或盐形式，是主要用作用于组织工程应用，特别是用于真皮 组织或其他软组织像牙銀组织的增强的可注射填充物材料的生物材料。
[0005] 透明质酸是由D-葡糖醒酸和N-乙酷基-D-葡萄糖胺重复单元组成的线性非硫酸化 的糖胺聚糖（Tammi R. ,A邑ren UM. ,Tuhkanen AL. ,Tammi M.Hyaluronan metabolism in skin.Progress in Histochemistry&Cytochemistry 29(2): I.-81,1994)。
[0006] 在皮肤中，透明质酸主要是由真皮成纤维细胞和表皮角质形成细胞合成（Tammi R.，同上所引）。凭借其残基带有负电荷，透明质酸充当水累用于保持皮肤的弹性。
[0007] 另外，ECM是对组织具有结构性和调节作用的动态结构。ECM由胶原蛋白和弹性蛋 白，还有基本物质，主要是水、矿物质和蛋白聚糖组成。该基质赋予皮肤充盈和坚实、弹性和 色泽的机械性能。
[000引关于皮肤，则发现，随着年龄的增长，透明质酸的量和它的聚合度减小，导致保留 在结缔组织量中水的量的下降。
[0009]同时，ECM组分主要被称为基质金属蛋白酶或MMP的内肤酶型酶降解。
[0010]最后，细胞防御的减小增力化外部应力如氧化应激引起的损伤和失调。
[0011] 然后皮肤经历老化过程，导致角质物质的，特别是皮肤的缺陷和瑕疵的外观。
[0012] 在皱纹填充物，主要由透明质酸组成的凝胶的领域，出现化学交联的情况下，在旁 侧皮内注射填充凹陷乳房。交联能增加皮肤内产品的持久性。运样的基于透明质酸的凝胶， 如有必要的话交联的，通过由真空皮肤皱纹产生的填充物的机械作用使得皱纹减少。
[0013] 然而，已知运样的凝胶的注射往往使患者产生疼痛感，如果凝胶是高粘性和/或弹 性的，则运种感觉进一步加剧。
[0014] 现在，为了克服运个技术问题，在局部麻醉剂下可使用基于透明质酸的主要填充 物，W确保更大的患者舒适度。该局部麻醉剂仅为利多卡因，剂量约0.3%。
[0015] 然而，已知利多卡因考虑到其血管舒张性质可能显示的缺点指由患者体内的过快 吸收和有时加剧血肿的发生，为了明显的美感原因，血肿是尽可能避免的。克服上述问题的 一种解决方案可包括施用与血管收缩剂，尤其是肾上腺素相关的利多卡因（J.Endod.2013 年5月；39(5) :597-9)。然而，血管收缩剂像肾上腺素的存在，可能需要添加防腐剂，防腐剂 对患者并不总是惰性的，可能导致过敏。
[0016] 因此，仍然需要开发主要由透明质酸组成的凝胶，产生化学交联的情况，它克服了 上述在注射过程中对患者的疼痛感的技术问题且也不设及任何过敏问题，也不加剧血肿的 发生。
【发明内容】
[0017] 根据第一方面，本发明设及一种方法，至少包括通过注射施用给需要其的患者：
[0018] (a)至少有效量的透明质酸或其盐;和
[0019] (b)至少有效量的甲赃卡因或其盐作为麻醉剂，
[0020] 所述甲赃卡因在透明质酸之前施用或与透明质酸同时施用。
[0021 ]根据特定的方面，本发明的方法旨在软组织增强。
[0022] 目标组织可W是皮肤，但也可W是牙銀组织。
[0023] 尤其是，本发明的方法可W有效地(i)用于预防和/或治疗皮肤的表面外观。
[0024] 因此，本发明的方法可有利地（ii )用于预防和/或治疗随时间而老化的和/或由外 部因素如压力、空气污染、烟草或长时间暴露于紫外线化V)照射导致的皮肤症状，（iii)预 防和/或治疗皮肤损伤的表面外观，（iv)防止和/或治疗皮肤损伤的粘弹性或生物力学性能 和/或(V)用于长期填充皮肤的体积缺陷，特别是填充皱纹。
[0025] 此外，本发明的方法还可有利地用于治疗例如随着牙齿损失、年龄增加、牙周病和 失调、牙周创伤和牙齿植入后发生的牙銀结构和外形和骨组织中缺陷的部位和缺陷，用于 增强牙齿修复术的配合和功能，包括但不限于植入物、牙冠、桥托...。
[0026] 根据另一个实施方案，本发明的方法还可有用的用于软骨再生。
[0027] 根据另一个实施方案，本发明的方法可W用作治疗关节炎。
[0028] 最后，透明质酸是类似于位于眼睛中的天然流体的粘稠透明液体。因此，已经提出 在手术过程中保持眼睛流体体积。因此，本发明的方法在大多数的眼科眼内手术中也是有 用的，包括白内障摘出术、人工晶体(I化)插入和去除、角膜手术、青光眼手术、创伤手术、眼 整形手术和眼肌手术。
[0029] 根据第二方面，本发明设及无菌和可注射的组合物，尤其是软组织填充物组合物， 其包含有效量的至少透明质酸或其盐和包含有效量的至少甲赃卡因或其盐作为麻醉剂。
[0030] 最后，根据另一个方面，本发明设及制备无菌和可注射的组合物，尤其是软组织填 充物组合物，所述方法至少包括W下步骤：
[0031] a)提供透明质酸或其盐的至少一种凝胶，所述透明质酸选自于交联的透明质酸形 式、非交联的透明质酸形式和它们的混合物；
[0032] b)向所述透明质酸的凝胶加入至少甲赃卡因或其盐作为麻醉剂;和
[0033] C)将步骤b)中获得的混合物灭菌。
【具体实施方式】
[0034] 根据第一方面，本发明设及一种方法，至少包括通过注射施用给需要其的患者：
[0035] (a)至少有效量的透明质酸或其盐;和
[0036] (b)至少有效量的甲赃卡因或其盐作为麻醉剂，
[0037] 所述甲赃卡因在透明质酸之前施用或与透明质酸同时施用。
[0038] 本发明人确实已经发现，根据本发明的方法可构成目前方法可行的替代，尤其用 于预防和/或治疗皮肤的表面外观，其考虑施用透明质酸与利多卡因而且（i)用于治疗牙銀 结构和外形和骨组织中缺陷的部位和缺陷，（ii)用于眼科眼内手术，（iii)用于软骨的再生 和(iv)用于治疗关节炎。
[0039] 首先，与利多卡因相比，甲赃卡因相比于利多卡因不显示显著的血管舒张性质。
[0040] 此外，甲赃卡因具有7,6的地曰，而利多卡因具有7,9的pKa。因此，甲赃卡因具有比 利多卡因更低的地曰，它显示更好的脂溶性，运提高了其通过脂质屏障的扩散。因此，由于运 样的事实，甲赃卡因可能比利多卡因更快地被吸收，因此，甲赃卡因适合于更好地防止在注 射过程中的疼痛感。
[0041] 但是，最重要的是，本发明人已出乎意料地观察到，根据本发明的填充物组合物， 即包括甲赃卡因作为麻醉剂，可W在不显著影响透明质酸凝胶稳定性的情况下进行灭菌。
[0042] 确实已知，透明质酸的凝胶对于如用于其灭菌所需的热处理特别敏感，在如麻醉 剂的其它材料的存在下可增加该低稳定性。出乎意料的是，使用与利多卡因相当的甲赃卡 因显著降低运种不希望的现象，如在下面的实施例1和2中所示的。此外，本发明人已经表 明，根据本发明的组合物还符合时间上稳定性方面的要求，如下面实施例3中所示的。
[0043] 根据本发明人，包含透明质酸的软组织填充物组合物内的运些上述有利效果的表 现形式是未知的。
[0044] 优选地，透明质酸或其盐与甲赃卡因或其盐同时施用。
[0045] 优选地，通过注射施用是表皮内和/或皮内和/或皮下注射。然而，它还可通过牙 銀、关节和眼内途径施用。
[OOW 透明质酸
[0048] 如上述的透明质酸(也称为透明质酸或透明质酸盐)是由D-葡糖醒酸和N-乙酷基-D-葡萄糖胺重复单元组成的线性非硫酸化的糖胺聚糖（Tammi R. ,Agren UM. ,Tuhkanen AL.,Tammi M.Hyaluronan metabolism in skin. Progress in Histochemistryfe Cytochemistry 29(2):1.-81,1994)。
[0049] 在皮肤中，透明质酸主要是由真皮成纤维细胞和表皮角质