如下计算对于G '在F = 5化下的灭菌损失：
[0230] (103.3-45.0)/103.3 = 56.4(en%)
[0232] 根据上述情况，因此显示，使用甲赃卡因相比于使用利多卡因的包含未交联的透 明质酸的组合物对灭菌步骤的稳定性至少相当。
[0233] 用甲赃卡因的结果甚至显著更好。 脚4] 实施例2:使用交联的和非交联的透明质酸制备根据本发明的组合物的程序和关 于其对灭菌的稳定性的分析
[0235] 使用Sg透明质酸(4MDa，），58.7g 1 %的氨氧化钢(化OH)和0.6g下二醇二缩水甘油 酸(BDDE)。在52°C下由引发剂引发交联反应反应3小时。
[0236] 制备程序如下：
[0237] 1.在密封且可变形的容器中（如在专利申请WO 2010/131175中考虑的袋)室溫下 在约1H30过程中均匀化混合物"透明质酸+NaOH 1%" W得到完全均匀的粘稠溶液；
[0238] 2.向容器中加入交联剂(B孤E)，在室溫下再均匀化大约20min;
[0239] 3.在52°C下培养含有"透明质酸/氨氧化钢1 % /BDDE"的粘稠溶液的容器3小时W 引发交联步骤；
[0240] 4.在憐酸盐缓冲液(如FR 2 979 539中定义的）中中和、溶胀、均匀化所得固体(交 联的透明质酸的溶液），并加入含有4g的HA 4M化和668g补充憐酸盐缓冲液的非交联的凝 胶，W获得具有llmg/g透明质酸的水凝胶，抑约为中性；
[0241] 5.在48小时内通过透析纯化，然后在罐均匀化中收集纯化的凝胶；
[0242] 6.筛分全部凝胶(230皿）
[0243] 7.将收集的凝胶分离成两部分(部分Bl和B2);
[0244] 8.并入甲赃卡因（介质憐酸盐缓冲液中30重量％ )的溶液的凝胶1重量％和0.4重 量％的1 %的NaO田容液（=部分Bl);
[0245] 9.并入利多卡因（介质憐酸盐缓冲液中30重量％ )的溶液的凝胶1重量％和0.4重 量％的1 %的NaO田容液（=部分B2);
[0246] 10.均匀化，包装在ImL注射用注射器中并灭菌。
[0247] 邸：
[0248] 下表给出所得的水凝胶的弹性模量G'（ W化计)和挤压力F(N)的值。
[0251] 如实施例1所示的计算灭菌损失。
[0252] 根据上述情况，因此显示，使用甲赃卡因相比于使用利多卡因的包含交联和未交 联的透明质酸的组合物对灭菌步骤的稳定性至少相当。
[0253] 用甲赃卡因的结果甚至更好。
[0254] 实施例3:使用交联的和非交联的透明质酸制备根据本发明的组合物的程序和关 于其随时间的稳定性的分析
[0巧5] 混合IOg透明质酸（1.5MDa，），73g 1 %的氨氧化钢(化OH)和0.9g下二醇二缩水甘 油酸(BDDE)。然后，在52°C下由引发剂引发交联反应反应3小时。
[0256] 制备程序如下：
[0257] 1.在密封且可变形的容器中（袋)室溫下均匀化混合物"透明质酸+NaCffll %"持续 约1H30W得到完全均匀的粘稠溶液；
[0258] 2.向容器中加入交联剂(B孤E)，且在室溫下进一步均匀化大约20min;
[0259] 3.在52°C下培养含有"透明质酸/氨氧化钢1%/BDDE"的粘稠溶液的容器3小时W 引发交联步骤；
[0260] 4.在含有2g非交联的透明质酸（1.5MDa)的憐酸盐缓冲液中中和、溶胀、均匀化所 得固体(交联的透明质酸的溶液），W获得pH接近中性的25mg/g透明质酸的水凝胶；
[0261] 5.通过透析纯化(在48小时内），然后在脱气装置/均匀化中收集纯化的凝胶；
[0262] 6.并入甲赃卡因（憐酸盐缓冲液介质中30重量％ )的溶液的凝胶1重量％和0.4重 量％的1%的NaO田容液；
[0263] 7.均匀化，脱气，包装在ImL注射用注射器中并灭菌(F0〉15)。
[0264] 邸：
[0265] 下表给出移相角Sn和挤压力的值。
[0268]得到的凝胶制造日19个月后的结果与最初获得的相当，从而表明凝胶的稳定性。
【主权项】
1. 一种方法，至少包括通过注射给需要其的患者施用： (a) 至少有效量的透明质酸或其盐;和 (b) 至少有效量的甲哌卡因或其盐作为麻醉剂， 所述甲哌卡因在所述透明质酸之前施用或与所述透明质酸同时施用。2. 根据权利要求1所述的方法，用于预防和/或治疗（i)皮肤的表面外观，（? )随时间而 老化的和/或由外部因素如压力、空气污染、烟草或长时间暴露于紫外线(UV)照射诱导的皮 肤症状，（iii)皮肤损伤的表面外观，（iv)皮肤损伤的粘弹性或生物力学性能和/或(ν)用于 长期填充皮肤的体积缺陷。3. 根据权利要求1所述的方法，用于治疗牙龈结构和外形以及骨组织中的缺陷和瑕疵 部位。4. 根据权利要求1所述的方法，其中所述透明质酸或其盐与甲哌卡因或其盐同时施用。5. 根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还至少包括，与所述透明质酸和/或甲哌 卡因同时向患者施用(c)至少一种平衡盐溶液。6. 根据权利要求1所述的方法，其中所述透明质酸选自于交联的透明质酸、非交联的透 明质酸和它们的混合物。7. 根据权利要求1所述的方法，其中所述甲哌卡因的盐是甲哌卡因盐酸盐。8. 根据权利要求1所述的方法，其中所述甲哌卡因或其盐以溶液存在，相对于所述溶液 的总重量，甲哌卡因或其盐的有效量为0.05至3重量％。9. 根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括施用至少利多卡因或其盐。10. -种无菌和可注射的组合物，其包含有效量的至少透明质酸或其盐并包含有效量 的至少甲哌卡因或其盐作为麻醉剂。11. 根据权利要求10所述的组合物，其中所述透明质酸具有50000至10000000道尔顿的 平均分子量。12. 根据权利要求10所述的组合物，其中所述透明质酸选自于交联的透明质酸、非交联 的透明质酸和它们的混合物。13. 根据权利要求10所述的组合物，其中所述组合物包含相对于所述组合物的总重量 的0.1至5重量％的透明质酸。14. 根据权利要求10所述的组合物，其中所述透明质酸在其交联时具有0.1 %至20 %的 改性度。15. 根据权利要求10所述的组合物，其中所述组合物包含基于所述组合物的总重量 〇.〇1重量％至5重量％的麻醉剂。16. 根据权利要求10所述的组合物，其中所述组合物进一步包含至少一种平衡盐溶液。17. 根据权利要求16所述的组合物，其中所述平衡盐溶液为KH2P〇4/K2HP〇4盐水缓冲液。18. 根据权利要求10所述的组合物，其中所述组合物进一步包含至少一种选自由以下 组成的组的化合物:α-硫辛酸;N-乙酰基-L-半胱氨酸;还原谷胱甘肽;氨基酸如L-精氨酸、 L-异亮氨酸、L-亮氨酸、一水合L-赖氨酸、甘氨酸、L-缬氨酸、L-苏氨酸、L-脯氨酸;盐酸吡哆 醇;脱水醋酸锌;五水合硫酸铜及其混合物。19. 一种制备无菌和可注射的组合物的方法，所述方法至少包括以下步骤： a)提供透明质酸或其盐的至少一种凝胶，所述透明质酸选自于交联的透明质酸形式、 非交联的透明质酸形式和它们的混合物； b) 向所述透明质酸的凝胶加入至少甲哌卡因或其盐作为麻醉剂;和 c) 将步骤b)中获得的混合物灭菌。20. 根据权利要求19所述的方法，其中所述步骤c)在120至140°C的温度下进行。21. 根据权利要求19所述的方法，其中所述透明质酸具有50000至10000000道尔顿的平 均分子量。22. 根据权利要求19所述的方法，其中所述步骤a)的交联的透明质酸预先使用有效量 的至少一种交联剂从非交联的透明质酸的交联获得，所述交联剂选自由以下组成的组：1， 4_ 丁二醇二缩水甘油醚(BDDE )、1，4-双(2，3-环氧丙氧基)丁烷、1，4-双缩水甘油醚氧丁烷、 1，2_双（2,3_环氧丙氧基）乙烯和1-(2,3_环氧丙基)-2,3_环氧环己烷、内源多胺以及它们 的混合物。
【专利摘要】一种方法，至少包括通过注射给需要其的患者施用：(a)至少有效量的透明质酸或其盐；和(b)至少有效量的甲哌卡因或其盐作为麻醉剂，所述甲哌卡因在所述透明质酸之前施用或与所述透明质酸同时施用。
【IPC分类】A61P17/00, A61Q90/00, A61K8/42, A61Q19/08, A61K31/451, A61K8/60, A61K8/49, A61Q19/00, A61K31/728, A61K31/167, A61P17/18, A61P17/02, A61P17/16
【公开号】CN105682657
【申请号】
【发明人】弗朗索瓦·鲍登, 史蒂芬·默尼耶
【申请人】泰奥赛恩公司
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2014年7月29日