br>[0167] 特别是，灭菌步骤可W在rc^i2rc高压锅内进行(湿热），获得F0>15(灭菌值）。
[0168] 在运方面，如上述的，根据本发明的组合物特别有利的在于，它对该灭菌步骤显示 非常有趣的高电阻。
[0169] 事实上，如在实施例1和2中所示的，对于根据本发明的组合物由灭菌产生的G'的 损失低于含有利多卡因而不是甲赃卡因的组合物。
[0170] 根据一个具体的实施方案，根据本发明的透明质酸的凝胶的制备方法可W进一步 包括步骤d)，由如下组成：加入不同于甲赃卡因或其盐的另外的麻醉剂或其盐，如上述的， 优选利多卡因或其盐，所述步骤d)在步骤b)之前，同时和/或之后进行。
[0171] 当步骤a)中考虑的凝胶包含交联的透明质酸形式时，该后者可预先从未交联的透 明质酸的形式获得。
[0172] 该网状可通过使用至少一种交联剂的常规方式进行，如上述的。
[0173] 待交联的包含交联剂和透明质酸的含水混合物有利地在进行交联之前均匀化。
[0174] 该操作的目的尤其是为含水介质中透明质酸或其盐的完全水合和均匀化，从而有 助于优化预期的透明质酸凝胶的性能。当透明质酸具有高的分子量时，该均匀化步骤更加 重要，因为运样的化合物的水合易于导致形成高粘度溶液，其内常常观察到团聚的出现。
[0175] 该操作的目的也是为了使混合物内的交联剂完全均匀化，W便随后保证均匀的交 联反应。
[0176] 当得到的溶液被均匀地着色，没有团聚，且具有均匀的粘度时，均匀化被认为是令 人满意的。均匀化可有利地在溫和的操作条件下进行，W防止透明质酸链的降解。
[0177] 该均匀化步骤的持续时间取决于透明质酸或其盐的性质，特别是其分子量和浓 度，取决于含水介质内的操作条件和取决于所用的均匀化设备，通常地允许溫和的机械揽 拌的设备。
[0178] 优选地，均匀化步骤可W发生在小于200分钟，优选小于150分钟，甚至15至100分 钟的时间内。
[0179] 交联反应的目的是创建透明质酸链之间的桥梁，使得可能从粘稠溶液得到稠密的 固体S维网络。
[0180] 为了促进交联反应所采用的具体条件可取决于透明质酸的分子量，取决于含水介 质和取决于交联剂的性质。一般来说，该网状可通过使如上述的包含非交联的透明质酸和 至少一种交联剂与触发元素或刺激物接触而实现，诸如例如通过加热或暴露于UV，或甚至 通过使混合物与催化剂型的材料接触。
[0181] 运样的触发元素的选择属于本领域技术人员的一般知识。
[0182] 在本发明的情况下，该触发元素有利地代表是施加到"非交联的透明质酸/含水介 质/交联剂"混合物上的溫度的增加。
[0183] 交联反应特别适宜的溫度为35°C至60°C，优选45°C至55°C，且更好地是48°C至52 r。
[0184] 交联程度还取决于交联时间和施加到"非交联的透明质酸/含水介质/交联剂"混 合物上的溫度。时间越长，交联程度越高，然而不超过透明质酸无降解风险的最佳效果。
[01化]因此，在35°C至60°C的溫度下，交联反应可进行30至300分钟，优选100至200分钟， 且更好地是150至190分钟的时间。
[0186] 优选地，调整交联条件W获得使交联的透明质酸凝胶W粘的，粘弹性凝胶，甚至是 固体凝胶形成的交联程度。
[0187] 停止交联反应需要将交联的凝胶或，在交联过程中，甚至是含有它的容器，暴露于 适合于停止交联的条件或暴露于能够停止各种透明质酸链之间形成键的条件。
[0188] 例如，在将用于刺激交联过程的热条件方面，交联可W被停止：
[0189] -通过简单地将容器从恒溫浴去除并冷却至室溫；
[0190] -通过将容器置于冷水浴中，优选地在低于室溫的溫度下，直至所述容器内的溫度 接近室溫;或甚至
[0191] -通过从所述容器提取出凝胶。
[0192] 根据一个具体的实施方案，均匀化和交联可W在至少部分地由可变形壁划定的密 封腔内进行，优选在可变形的袋内做，其至少手动触诊地可变形，如尤其在WO 2010/131175 中描述的。
[0193] 在交联步骤结束时所获得的凝胶通常不能直接注射，特别是因为它的高透明质酸 浓度和/或可能存在的交联剂残留，或因为与上面考虑的应用领域中的用于不兼容的其生 理学上的和/或抑条件。
[0194] 此外，一些凝胶可能尤其具有如向患者注射时太高的刚度。因此，可W进行本领域 技术人员已知的一些另外的步骤W获得可注射的水凝胶。尤其是，需要中和和扩展该凝胶 的步骤，W便赋予它其植入物质量。然后拉伸和水合透明质酸网络的链，同时pH值被调整为 皮肤的pH值。
[0195] 根据本领域技术人员的实际知识，还可进行保护和再稠密化凝胶的步骤进一步提 高植入物的质量。该凝胶必须是通过在与那些注射的介质相当量的盐存在下生理学地配制 的。
[0196] 为了甚至更高的纯度，还可进行另外的纯化步骤。
[0197] 有利的是，在可注射的透明质酸的该制备过程结束，就在如上述的灭菌步骤之前 时加入甲赃卡因或其盐，及另外的麻醉剂（出现的情况）。
[0198] 根据一个具体的实施方案，可使用加入的甲赃卡因和可选的另外的麻醉剂的水凝 胶W在可控大气条件下填充注射器，所述注射器然后可能经历灭菌步骤，优选热灭菌步骤， 如上面定义的。
[0199] 组合物的施用
[0200] 可W使用任何本领域已知方法注射根据本发明的组合物。
[0201] 特别是，本发明的组合物可W通过适用于表皮内和/或皮内和/或皮下的注射设备 施用。
[0202] 本发明的组合物还可通过适用于牙銀、关节和/或眼内区域的注射设备施用。
[0203] 注射设备，尤其是当本发明组合物通过适用于表皮内和/或皮内和/或皮下的注射 设备施用时，可W选自于注射器、一套微量注射器、激光设备、液压设备、注射枪、无针注射 设备、具有微针的针筒。
[0204] 优选地，注射设备可W选自于注射器或一套微量注射器。
[0205] 在另一个实施方案中，注射设备能适应美塑疗法技术。
[0206] 美塑疗法是通过表皮内和/或皮内和/或皮下活性产品的治疗技术。
[0207] 根据本发明的表皮内和/或皮内和/或皮下施用是在表皮区、真皮表皮或真皮中注 入本发明的组合物。
[0208] 注射设备可W包括任何常规施用的注射如皮下注射针或插管。
[0209] 根据本发明的针或插管可W具有18至34G，优选25至32G的直径，和4至70mm，优选4 至25mm的不同长度。
[0210] 针或插管优选是一次性的。
[0211] 有利的是，针或插管与注射器或其他能够通过针或插管递送所述可注射的组合物 的设备相连。根据一个实施方案，导管可W插入在针/插管和注射器之间。
[0212] 在已知的方式中，注射器可W由执业医生或由注射器固定器作为注射针手动操 作。
[0213] 在整个说明书中，包括权利要求书，表述"包含一个"应被理解为与"包含至少一 个"同义，除非另有明确说明。
[0214] 表述"…至…""范围从…到…"应被理解为指包括极限值，除非另有说明。实施例:
[0215] 材料和方法:
[0216] 本文对组合物的粘弹性的测量定义后的程序适用于W下实施例。
[0217] 组合物的粘弹性可W用具有锥体/板几何结构（1°锥角/35mm直径的板）的流变仪 (尤其是化ake RS6000)测量。应力为5化下进行应变扫描，和测量弹性模量G'（ W化计)和移 相角8(从°计）。
[0218] 实施例1:使用非交联的透明质酸制备根据本发明的组合物的程序和关于其对灭 菌的稳定性的分析
[0219] 混合3g透明质酸（1.5MDa，）和197g憐酸盐缓冲液(如在FR 2 979 539中定义的）。
[0220] 制备程序如下：
[0221] 1.在密封容器(Nalgene罐）中室溫下S维均匀化混合物"透明质酸+憐酸盐缓冲 液"至少20小时；
[0222] 2.将得到的非交联的凝胶分离为2等值部分（W下称为部分Al和A2);
[0223] 3.对于部分Al,加入甲赃卡因（憐酸盐缓冲液中30重量％ )的溶液的凝胶1重量％ 和0.4重量％的1 %的NaO田容液;或
[0224] 4.对于部分A2,加入利多卡因（憐酸盐缓冲液中30重量％ )的溶液的凝胶1重量％ 和0.4重量％的1 %的NaOH溶液;和
[0225] 5.均匀化，包装在ImL注射用注射器中并灭菌(F0>15)。
[0226] 邸：
[0227] 下表给出所得的水凝胶的弹性模量G'（ W化计)和挤压力F(N)的值。
[0229] 按