r>[0051] 如上所述，在本发明中，细胞分离剂的比重需要设为循环肿瘤细胞的比重和循环 肿瘤细胞W外的血液细胞的比重之间的值。由此，在离屯、分离操作后，能够在循环肿瘤细胞 和其它的血液细胞之间可靠地形成隔壁。
[0052] 但是，通常具有触变性的细胞分离剂随着比重升高流动敏感性因离屯、力而降低， 因此，通常所使用的血清或者血浆用的分离剂制备成比重1.040~1.055。
[0053] 本发明中的细胞分离剂的比重在1.050~1.080的范围内。因此，能够对肿瘤细胞 和其它的血液细胞进行分离。优选该比重在1.055~1.080的范围内，更优选在1.065~ 1.077的范围内。进一步优选该比重在1.070~1.077的范围内。若在运样的比重范围，则能 够更加可靠地对循环肿瘤细胞和其它的血液细胞进行分离。
[0054] 但是，若比重范围升高，则有可能细胞分离剂的流动性降低。因此，优选添加后述 的触变性增强剂。作为触变性增强剂，如后所述，可W优选使用数均分子量700W上的聚亚 烷基二醇。通过添加运样的触变性增强剂，在离屯、分离后能够在肿瘤细胞和其它的血液细 胞之间更加可靠地形成强度充分的隔壁。
[0055] 本发明的细胞分离剂没有特别限定，优选含有液体成分和无机粉末。通过组合液 体成分和无机粉末，能够容易地实现上述的比重范围。无机粉末的表面可W为亲水性，或者 无机粉末的表面可W为疏水性。另外，作为上述无机粉末，可W组合使用表面为亲水性的无 机粉末和表面为疏水性的无机粉末。
[0056] 在本发明中的细胞分离剂中，作为上述液体成分，没有特别限定，只要使用聚娃氧 烧类、α-締控-富马酸二醋共聚物类、丙締酸类、聚醋类、癸二酸和2,2-二甲基-1,3-丙二醇 和1,2-丙二醇的共聚物类、聚酸聚氨醋类、聚酸醋类等液体树脂、聚-α-羡締聚合物和氯代 控的液体混合物类、氯化聚下締和环氧化动植物油等液体化合物的液体混合物类、Ξ氣氯 化乙締及苯多簇酸烷基醋衍生物等和聚氧亚烷基二醇等液体混合物类、环戊二締低聚物和 邻苯二甲酸醋等液体混合物类等液/液或者固/液混合物运样的在常溫下为液体的现有公 知的物质即可。
[0057] 另外，上述无机粉末没有特别限制，可W使用选自利用公知的气相法(也称为干式 法)或者沉淀法所制造的包含二氧化娃或由膨润±、蒙脱石等的粘±矿物等二氧化娃类、或 者氧化铁类、氧化侣类等微粉末中的一种，或者混合使用两种w上。
[0058] 另外，在本发明中，就上述无机粉末而言，表面可W具有亲水性，也可W具有疏水 性。另外，可W组合使用表面为疏水性的无机粉末和表面为亲水性的无机粉末。
[0059] 在本发明中，作为上述无机粉末，可W优选使用二氧化娃类粉末或者氧化铁类粉 末，也可W组合使用运两者。
[0060] 在二氧化娃类粉末中，作为亲水性的二氧化娃，可W获得并容易使用下列气相法 亲水性二氧化娃，例如:AER0SIL(注册商标)90G、AER0SIL130、AER0SIL 200、AER0SIL 300等 AER0SIL系列（日本AER0SIL公司制造）、RE0L0SIL(注册商标）QS-10、RE0L0SIL QS-20、 RE0L0SIL QS-30等RE0L0SIL系列（Tokuyama公司制造 ）、WACKER 皿K S13、WACKER 皿K N20、 WACKER皿K T30等WACK邸HDK系列（旭化成Wacker-silicone公司（旭化成口力一シリ3シ 社)制造)等。
[0061] 另外，作为疏水性二氧化娃，可W获得并容易使用下列气相法疏水性二氧化娃，例 如：AER0SIL R972、AER0SIL R974、AER0SIL R805、AER0SIL R812等AER0SIL系列（日本 AER0SIL公司制造 KRE0L0SIL MT-10、RE0L0SIL DM-30S、RE0L0SIL HM-30S、RE0L0SIL KS- 20S、RE0L0SIL PM-20等REOLOSIL系列（Tokuyama公司制造）、WACK邸皿Κ H15、WACK邸皿Κ H18、WACKER皿Κ册0等WACKER皿Κ系列（旭化成Wacker-silicone公司（旭化成口力一シリ 3 >"社)制造)等。
[0062] 在本发明中，优选还添加触变性增强剂。作为运样的触变性增强剂，只要可提高触 变性就没有特别限定，可优选使用聚亚烷基二醇。可更优选使用对碳原子数为2~4的环氧 烧控单体的一种或量种W上进行聚合而得到的聚合物。进一步优选为对碳原子数为3或4的 环氧烧控单体的一种或两种W上进行聚合而得到的聚合物，可使用数均分子量700W上的 聚亚烷基二醇。通过运样的触变性增强剂的添加可在离屯、分离后更加可靠地形成隔壁，且 可W形成强度充分的隔壁。
[0063] 在本发明的细胞分离剂中，上述特定的聚亚烷基二醇可W单独使用一种，也可W 配合两种W上。
[0064] 在本发明中所使用的聚亚烷基二醇中，若分子内过量地含有碳原子数为2的乙二 醇单体的聚合成分，则水溶性增大，故不优选，可优选使用戴维斯法的化B值为16W下的物 质。需要说明的是，所谓戴维斯法的HLB值，由下述式算出。
[0065] <HLB值=7+亲水基的基数的总和-亲油基的基数的总和〉
[0066] 需要说明的是，所谓基数为各官能团所确定的固有的数值。
[0067] 另外，根据源自起始物质醇类的官能团数的径基数或者有无基于该径基的烷基等 的封端处理等，可任意使用具有数量为1或者大于1的径基的聚亚烷基二醇。为了降低水溶 性，更优选每1分子的径基数为3个W下。
[0068] 另外，在上述聚亚烷基二醇的分子内，可W含有径基的封端目的W外所引入的疏 水性残基。作为运样的疏水性残基，可W举出：亚烷基、链締控基、链烘控基、芳香环基、二甲 基硅氧烷类取代基等。
[0069] 另外，可W代替上述径基或者追加含有幾基、氨基或琉基等氨键合性极性基团。在 运样的情况下，为了降低水溶性，也更优选每1分子的极性基团的数量为3个W下。
[0070] 若聚亚烷基二醇的数均分子量小于700,则有时在离屯、分离后所形成的隔壁上产 生龟裂。其结果，可能血球细胞和肿瘤细胞混合使肿瘤细胞的纯度降低。因此，数均分子量 优选为700W上。在具有2个W上的径基的聚亚烷基二醇的情况下，数均分子量更优选为 1000W上。需要说明的是，上述聚亚烷基二醇的数均分子量的上限值没有特别限定，但优选 为100,000?下。若超过100,000,则有时径基密度减小而不发挥作为触变性增强剂的作用。
[0071] 上述聚亚烷基二醇的浓度优选为血液分离剂整体的5重量％^下。通过调整为5重 量％ W下可W更加容易地将细胞分离剂调整为优选的粘度范围。更优选为3重量％ ^下，进 一步优选为2重量％^下。另外，上述聚亚烷基二醇的浓度的优选下限为0.1重量％。通过调 整为0.1重量％^上，将细胞分离剂的粘度范围调整为优选的范围变得更加容易。
[0072] 作为上述特定的聚亚烷基二醇的具体例，可W举出W下的各种聚亚烷基二醇。但 是，并不限定于下述例示的物质。
[0073] 作为具有数量大于1的末端径基的聚亚烷基二醇，例如可W举出：聚下二醇（日油 公司制造、PB-700、PB-1000、PB-2000等UNI0L(注册商标系列）、聚丙二醇（日油公司制 造、D-700、D-1200、D-4000等UNI0L D系列）、聚氧丙締甘油酸（日油公司制造、TG-1000、TG- 3000、TG-4000等UNI0L TG系列）、聚氧丙締山梨糖醇（日油公司制造、HS-1600D等UNI0L HS 系列）、聚丝氨酸旧油公司制造、DCB-1000、DCB-2000、DCB-4000等聚丝氨酸DCB系列、及0〇 1100、DC-1800E、DC-3000E等聚丝氨酸DC系列）、聚氧丙締二甘油酸（日油公司制造、DGP-700 等UNILUB(注册商标）系列）、聚氧丙締甘油酸（旭硝子公司制造、S3003、S3006、S3011等 Preminol系列）、聚丙二醇（旭硝子公司制造、54001、54006、54011、54015等?'日111111〇1(注册 商标）系列）、聚氧乙締聚氧丙二醇(Ξ洋化成工业公司制造、PE-34、PE-61、PE-62、PE-64、 阳-7UPE-74等Nieuport(注册商标)PE系列）、聚氧乙締聚氧丙締甘油酸(ADEKA公司制造、 AM-502 等 ADEKA 聚酸）。
[0074] 作为具有1个末端径基的聚亚烷基二醇，例如可W举出：聚氧丙締下酸（日油公司 制造、]\?-7、]\?-14、]\^-38、]\?-700等哪比册18系列）、聚氧丙二醇单酸(^洋化成公司制造、 LB-285、LB-625、LB-3000、LB-1800X等Nieupod LB系列）、聚氧丙締烷基酸(旭硝子公司制 造、S1004F、S1005 等 Preminol 系列）。
[0075] 在本发明的细胞分离剂中，可W在能够维持作为细胞分离剂的性能的范围内进一 步配合相容剂、抗氧化剂等添加剂。
[0076] 本发明的细胞分离剂的比重调整为1.050~1.080。本发明的细胞分离剂的比重优 选调整为1.055~1.080,更优选调整为1.065~1.077。在将比重设为低于1.055的情况下， 有时低于肿瘤细胞的比重或者期望的肿瘤细胞的回收率降低。另一方面，若使比重高于 1.080,则有时由于接近于不期望的肿瘤细胞W外的血液细胞特别是血球细胞的比重，因 此，离屯、分离时的细胞分离剂的流动性降低，从而无法在肿瘤细胞和其它的血液细胞之间 形成隔壁。
[0077] (抗血液凝固剂）
[0078]