专利名称：：一种浸渍土壤消毒的方法
技术领域：
：本发明属于农业植物保护领域，更具体的讲，属于绿色环保型的土壤消毒的方法。
背景技术：
：随着农业产业结构的调整、高效农业的发展，人们在同一土地上单一作物的连作状况越来越严重，大量的农业化学投入品(包括农药、化肥等)的超量使用，造成农药残留，环境富营养化，土壤恶化等等问题，尤其是连作障碍日益突出。为了促进绿色农业、生态农业、循环农业的发展，减少农业化学投入品对环境的不利影响，提高农产品的安全性，这就需要提供一种更科学的土壤消毒方法，让其更加节约资源，更加绿色环保，使农业生产得到可持续的发展。
发明内容为了解决以上问题，本发明提一种土壤浸渍消毒的方法，该方法包括让水浸渍土壤并让土壤表面上水的深度为2-8厘米；让位于土壤表面的水温保持在35-50'C并维持3小时50天。在一个优先的实施方式中，土壤中的病原菌为真菌。这些真菌选自于西瓜镰刀菌尸"sarz'wz7o;P7s/02Y/迈，茄子菌核病菌/5b7ei-o"/i35r7ero"oi"咖(Lib.)deBary，白术白缟病菌5Wero^/咖ro7/si7Sacc，茄子黄萎病菌FeW".Ww迈a^力/7aekelb，长瓜炭疽病菌Ca/7ez!"otrj'c力w/27orZ^.ci/7are，甜瓜蔓枯病菌ylscoc力Wsci加77i/asmith,辣椒疫病菌尸v^op力t/orac邵sj'ci"Leonian中的一种或几种。在一个较佳的实施方式中，让水的深度为2厘米，让水的温保持在40-5(TC并维持3小时15天。更佳的，让水的温保持在45-50°C并维持3小时5天。最佳的，让水的温保持在5(TC并维持3小时3天。在一个更佳的实施方式中，让土壤表面的水深为25厘米，更佳的，水的深度为2厘米。在另一个优选的实施方式中，让位于土壤表面的温度为40—45'C。在另一些较佳的实施方式中，当土壤中的真菌为西瓜镰刀菌Fusariumoxysporum的时候，让水温保持在45。C,持续的时间为5天；当土壤中的真菌为茄子菌核病菌Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary的时候，让水温保持在45'C,持续的时间为1天；当土壤中的真菌为白术白绢病菌SclerotiumrolfsiiSacc的时候，让水温保持在45'C，持续的时间为2天；当土壤中的真菌为茄子黄萎病菌Verticilliumdahilaekelb的时候，让水温保持在45。C，持续的时间为5天；当土壤中的真菌为长瓜炭疽病菌Colletotrichumorbiculare的时候，让水温保持在45'C，持续的时间为1天；当土壤中的真菌为甜瓜蔓枯病菌Ascochytacitrullinasmith的时候，让水温保持在45'C，持续的时间为l天；当土壤中的真菌为辣椒疫病菌PhytophthoracapsiciLeonian的时候，让水温保持在45。C，持续的时间为1天。水温增加土壤表面的水温可以通过多种方式实现，例如可以通过向土壤表面灌溉一定温度的水，这样可以让水的温度保持在一定的温度范围；还可以采用电阻加热的方法让水温保持在一定的范围，例如先在土壤表面覆盖一层水，让水的深度为2—8厘米，可以是2厘米，3厘米，4厘米，5厘米，6厘米，7厘米，然后通过埋在土壤下的电热丝进行加热。在一个更优选的方式中，通过利用现有农业技术也可以加热，例如利用在土壤表面覆盖大棚或小拱棚方式来对土壤表面的水进行加热，这些方法在中国发明专利申请200810060272.5中有详细的描述,该申请的所有方式可以作为本发明的一部分来说明如何利用太阳能对土壤表面的温度进行加热来达到本发明所需要的消毒温度。浸渍本发明所说的"浸渍"是指用水覆盖土壤表面，让土壤表面被水所淹没。这里的水通常指的一般意义的水，可以是河水，自来水，来自湖泊的水，也可以指任何其它液态自由水，例如无菌水，矿泉水等等。利用水浸渍土壤并让水保持在一定的温度范围内可以有效杀死土壤表层的真菌或细菌，原因可能是1)土壤表面被水密封，使土壤中的微生物生活的环境发生改变，因为大部分病原真菌或细菌都是进行有氧呼吸，当土壤表面被水密封后，使土壤中真菌或细菌进行无氧呼吸，不利于这些病原菌的生长和繁殖；2)在一定高温下，这些细菌或真菌的代谢加快，在加上水的渗透压和病原菌细胞的渗透压力差，使病原菌丧失一些有效营养物质；3)因为水的存在，可以使土壤表面或那些被淹没在水里的土壤较长时间的保持一个不利于微生物生长的环境温度，这样加速了土壤中微生物的死亡进程。有益效果利用本发明的方法可以非常方便的杀死土壤表层中的病原细菌或真菌，例如利用自然的大棚具有升温的作用对土壤进行浸渍消毒，可以有效的杀死土壤中的细菌或真菌。该方法绿色环保，简单实用，成本非常低，不会对环境造成任何污染和危害。图1:室内模拟土壤进行不同真菌对温度敏感性试验的示意图，IO表示均匀混合一定真菌的基质，该基质可以是土壤，砂或无菌水；20表示土壤表面水的深度，30表示试管。编号l一7表示1一7号真菌等7个不同处理；8表示没有在土壤表面覆盖无菌水的对照处理。试验为了进一步说明本发明的效果，现给予试验说明。这些试验是本发明的具体实施方式的有限列举，并不能对本发明做出任何限制，该发明的范围以权利要求为准。1材料与方法供试病原菌供试病原菌为-西瓜镰刀菌/^sariw迈a75"/027/fl7编号为1，茄子菌核病菌《5Wero"/7i"<3sc7e7"o^z'or咖(Lib.)deBary编号为2，白术白绢病菌Sciero^7/迈_ro7/!siiSacc编号为3,茄子黄萎病菌rem'c/77/w迈Q^力i7aekelb.编号为4，长瓜炭疽病菌6b77"otric/"迈oi-6icw7are编号为5，甜瓜蔓枯病菌y4scoc力j^a"'^ra77i朋smith编号为6，辣椒疫病菌尸力/鄉力^orac邵57'ciLeonian编号为7。均为本实验室保存所有，分采集于发病植物，经过常规技术分离纯化验证后获得。试验1病原菌的培养将以上7种经分离纯化的病原菌分别接种于土豆蔗糖PDA培养基(200g土豆煮熟的汁，20g蔗糖，20g琼脂定容到1升)于恒温箱25'C培养后，待用。试验2不同的病原菌对不同温度的敏感性(1)，如图l所示，取高25cm,直径2.5cm的大试管3,湿热灭菌后，备用。(2)，基质处理从田间取土壤，经过8(TC烘烤24h后冷却，经检验无任何杂菌后备用；然后取大小均一的不同病原菌菌丝块(菌核病菌也放入大小均一的菌核)，然后分别均匀地混入土壤中，最后把带有病原菌的土壤装入试管中，装入的深度为10cm，如图1所示，标号为l一7号表示l一7个不同的真菌病原菌。(3)，再向试管中加入无菌水2，让水的深度为距离土壤表面2cm。其中，对每一个病原菌(l一7号)不加无菌水作为对照，让土壤的含水率为85%，如图1所示的编号为8。(4)，然后再在25°C，湿度为85%的培养箱中进行培养24小时；(5)，最后，把含有无菌水的试管放在培养箱中进行培养，让覆盖在土壤表面的无菌水处于不同的温度;无菌水不同的温度和取样次数分别为25°C，30。C，35。C每1天取样一次；40。C每12小时取样一次，45。C每6小时取样一次；50。C每15分钟取样一次。让没有无菌水的对照试管置于培养箱中进行培养，不同的温度下进行培养，不同的温度和取样次数分别为25°C，3CTC，35'C每1天取样一次；40°C每12小时取样一次，45'C每6小时取样一次；50'C每1小时取样一次。其中所有试管的培养湿度为85%。取样的深度为土壤表面下5厘米处。(6)，称取土壤1g，用100ml无菌水稀释土样，纱布过滤，然后取0.1ml在基础培养基PDA(含有抗生素氯霉素50mg/L，链霉素50mg/L，利福平50mg/L及乳酸5yL/L抑制细菌生长)上，25'C培养，看是否有相应的菌落长出。以上所有处理重复实验三次。结果如下表l,不同病原菌在不同温度下的死亡时间<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>不同的病原菌对温度具有不同的敏感性,对6个温度处理实验结果总结发现25°C、3(TC作为病原菌生长适宜温度，浸水的时间对菌的影响不大。而35'C超过了病原菌的适宜生长温度，5天后6和7号开始出现死亡，而其余的菌则生活力强，能存活2周以上。比较不同温度处理对菌的影响发现处理温度越高，病原菌死亡越快，但不同的菌对温度的敏感性不同。一些防治难的土传病害病原菌如白绢病菌较耐高温，白绢病菌45'C处理2天后死亡。枯萎病菌即镰刀菌作为目前最难防治的土传病害，其致死温度可高达5(TC3天，茄子黄萎病菌35'C23天，白术白绢病菌40'C9天，其他菌核病菌、长瓜炭疽病、甜瓜蔓枯病菌、辣椒疫病菌40°C5天内均已死亡。当温度达5(TC时，除枯萎病菌和茄子黄萎病菌外，其他病原菌24小时内均死亡另外，当这些土壤表面没有水的时候，1—7号菌在各自相同的温度下，死亡的时间要远远长于有水处理的情况。例如，1号菌在土壤表面有水深为2厘米，温度为35X:的情况下30天全部死亡，而没有水的情况需要45天才全部死亡。可见，在这些温度下，有水浸渍是土壤消毒的关键因素。试验3，不同基质对病原菌存活的影响试验。与试验1相比，试验2不同之处为步骤2处的基质变为砂和无菌水，然后步骤5处的培养温度为45'C;其它条件都相同。表2不同的基质对浸渍法消毒土传病害的影响(温度为45'C)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>从表2的试验结果来看，采用土壤、砂子、无菌水等三种处理测试模拟土壤环境是否在浸渍法中有利于病原菌的存活，对土壤、沙子进行干热湿热灭菌消除自带菌对结果的干扰。土壤中的病原菌与无菌水中的病原菌在同样的温度处理下存活和死亡时间相同。实验结果发现模拟的土壤环境对病原菌的存活没有影响。试验4基质表面不同水深对病原菌存活的影响试验与试验1相比，试验4不同之处为步骤3无菌水的深度不同，分别为5厘米，8厘米，IO厘米处理；然后步骤5处的培养温度为45'C;其它试验条件都相同。表3基质表面不同水深对病原菌存活的影响试验<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>从试验结果可以看出，淹水深度对病原菌无影响。病原菌均为真核生物，实行有氧呼吸，水深不同即水中含氧量不同对病原菌死亡并没有影响，因此病原菌仅对温度敏感。试验5大田试验在7月至8月，选病害重发的连作田进行试验，在连作田上覆盖有相同规格的大棚，并将田块一分为二，一半田土壤进行浸渍处理,田间水深保持2cm，另一半不进行任何处理，时间30天，每处理3重复(小区)。在浸渍处理完成后，排干浸渍水，整地后分别育上茄子、西瓜、甜瓜、长瓜、白术和辣椒苗，育苗方法按常规；在成苗时，调查各个不同病害的发病率，计算防效。土壤表面水的温度测量使用传感器(购自浙大电器设备厂)每15min测量一次，并储存数据。防效(％)二100X(对照区苗的发病率-处理区苗的发病率)/对照区苗的发病率。大棚内温度变化连作大棚内土壤表面水温的变化是病原菌存活与否的一个重要数据。我们土壤表面上的水的温度变化作了统计，发现大棚内水温最高可以达到55"C，最低可以到30'C，平均温度在35'C45。C。<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>权利要求1.一种浸渍土壤消毒的方法，该方法包括让水浸渍土壤并让土壤表面水的深度为2-8厘米；让水温保持在35-50℃并维持3小时～30天，。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的土壤中包括真菌病原菌，这些真菌选自于西瓜镰刀菌,wsarj'w巡0x7sp0rf皿，茄子菌核病菌5Wero"7n'ascJero"oiT/a(Lib.)deBary，白术白绢病菌5Wero"w迈ro/fw.j.Sacc，.茄子黄萎病菌re/"^/"7iiw迈kelb，长瓜炭疽病菌6bL/y"otric力〃迈Qr6j'cw7ai"e，甜瓜蔓枯病菌ylscoc力ytacj'tn/77/"asmith,辣椒疫病菌ca，.ciLeonian中的一种或几种。3.如权利要求1或2之一所述的方法，其特征在于所述水的深度为2厘米，让水的温保持在40-50'C并维持3小时15天。4.如权利要求1或2之一所述的方法，其特征在于让水的温保持在45-50"C并维持3小时5天。5.如权利要求1或2之一所述的方法，其特征在于让水的温保持在5(TC并维持3小时3天。6.如权利要求l所述的方法，其特征在于当土壤中的真菌为西瓜镰刀菌Fusariumoxysporum的时候，让水温保持在45。C，持续的时间为5天；当土壤中的真菌为茄子菌核病菌Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary的时候，让水温保持在45。C，持续的时间为1天；当土壤中的真菌为白术白绢病菌SclerotiumrolfsiiSacc的时候，让水温保持在45°C，持续的时间为2天；当土壤中的真菌为茄子黄萎病菌Verticilliumdahilaekelb的时候，让水温保持在45°C,持续的时间为5天；当土壤中的真菌为长瓜炭疽病菌Colletotrichumorbiculare的时候，让水温保持在45'C,持续的时间为l天；当土壤中的真菌为甜瓜蔓枯病菌Ascochytacitrullinasmith的时候，让水温保持在45。C，持续的时间为1天；当土壤中的真菌为辣椒疫病菌PhytophthoracapsiciLeonian的时候，让水温保持在45。C，持续的时间为1天。7.如权利要求6所述的方法，其特征在于所述土壤表面水的深度为2厘米。全文摘要本发明涉及一种浸渍土壤消毒的方法，该方法包括让水浸渍土壤并让土壤表面水的深度为2-8厘米；让水温保持在35-50℃并维持3小时～30天。该方法绿色环保，简单实用，成本非常低，不会对环境造成任何污染和危害。文档编号A01G11/00GK101427642SQ20081016338公开日2009年5月13日申请日期2008年12月18日优先权日2008年12月18日发明者任海英,丽方,王汉荣,茹水江申请人:浙江省农业科学院