专利名称：1,2-o-十八烷基甘油醛在制备抗菌药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，是化合物1，2-0-十八烷基甘油醛用于制备抗菌药物 的新用途。
背景技术：
我国海域辽阔，且南海地处亚热带，软珊瑚资源尤其丰富，是世界上软珊瑚集中 分布的海域之一。硬棘软珊瑚Scleron印hthya sp.属于腔肠动物门(Coelenterata)、 珊瑚虫纲(Anthoaoa)、八放珊瑚亚纲(Octocorallia)、软珊瑚目(Alcyonacea)、棘软珊瑚 科(^phtheidae)动物。文献报道曾从南海软珊瑚中分离得到过烷基甘油醛类衍生物1， 2-0-十八烧基甘油酸(Qi S H, Zhang S, Xiao ZH, Huang J S，Wu J，Li Q X. Study on the Chemical Constituents of the South China Sea Gorgonian Junceella juncea. Chem Pharm Bull, 2004, 52 (12) :1476_1478)，1，2_0_十八烷基甘油醛的化学结构式如下:至今未见其具有抗菌活性的相关报道。
发明内容
本发明对化合物1，2-0_十八烷基甘油醛提供一种制备抗菌药物的新用途。本发明用硬棘软珊瑚Scleron印hthya sp制备1，2_0_十八烷基甘油醛，制备方法 如下1.制备总浸膏 将新鲜的硬棘软珊瑚Scleron印hthya sp.剪碎，用甲醇、丙酮依次分别超声提取 多次至提取液无色，减压浓缩除去有机溶剂，将浓缩物悬浮于水中，用等体积的氯仿萃取， 有机相萃取液经减压浓缩得总浸膏。2.分离纯化将氯仿总浸膏用氯仿溶解，加入正相硅胶(100-200目)以重量比1 1. 5拌样挥 干，湿法装柱，干法上样，依次用100%正己烷，正己烷/ 二氯甲烷=20 1,10 1,5 1， 2 1,1 1，1 2，1 5，1 10 ；CH2Cl2IOO % ；CH2Cl2/Me0H100 1,50 1,20 1， 10 1,5 1,1 1,1 5 ;100% MeOH，Me0H/H20为流动相梯度洗脱，根据薄层板监测， 各流份按照极性的差别从小到大依次收集8个组分Fr. A Fr. H ；将Fr. A再经正相硅胶 色谱(200-300目)分离纯化，以正己烷/三氯甲烷50 1,20 1,10 1,5 1,1 1, 1 5,1 10 ；CHCl3IOO%;CHCl3/Me0H50 1，20 1，10 1，5 1，1 1，1 5 ；100% MeOH为流动相梯度洗脱，根据薄层板监测，收集洗脱液，得到4个组分Fr. A1-Fr. A4 ；Fr. A3经 正相硅胶柱(200-300目)以正己烷/ 二氯甲烷5 1,1 1,1 5,1 10 ；CH2Cl2IOO% 为流动相梯度洗脱，根据薄层板监测，收集洗脱液，得到2个组分Fr. A3_「Fr. A3_2 ；Fr. A3_2经Sephandex LH-20凝胶柱(CH2Cl2 MeOH 1 1)分离纯化，最后通过半制备型HPLC进行 纯化制备(C18，1.0ml/min)，以100%甲醇为溶剂进行洗脱，用示差检测器监测，收集保留时 间为38min的流份，得1，2_0_十八烷基甘油醛。经体外抗菌试验，表明1，2-0-十八烷基甘油醛对花药黑粉菌具有显著的抑制作 用，其抑制作用甚至比阳性对照药青霉素或链霉素还强，因此可用于制备抗菌药物。
具体实施例方式实施例1.制备1，2-0-十八烷基甘油醛取广西涠洲岛海域的硬棘软珊瑚1200克，洗净剪碎，依次用重量比为5倍的甲醇、丙酮分别超声提取6次至提取液无色，减压浓缩除去有机溶剂，将浓缩物悬浮于IL的水中， 用等体积的氯仿萃取5次，有机相萃取液经减压浓缩得粗浸膏5. 60g。用5ml氯仿将其溶 解，加入正相硅胶(100-200目)以重量比1 1.5拌样挥干，湿法装柱，干法上样，用100% 正己烷，正己烷 / 二氯甲烷=20 1,10 1,5 1,2 1,1 1,1 2,1 5,1 10; CH2Cl2IOO%;CH2Cl2/Me0H100 1,50 1,20 1,10 1,5 1,1 1,1 5 ；100% MeOH, MeOHM2O为流动相梯度洗脱，根据薄层板检测，各流份按照极性的差别从小到大依次收集8 个组分Fr. A Fr. H ；将Fr. A再经正相硅胶色谱(200-300目)分离纯化，以正己烷/三氯 甲烧 50 1,20 1,10 1,5 1,1 1,1 5,1 10 ；CHCl3IOO% ;CHCl3/Me0H50 1， 20 1,10 1,5 1,1 1,1 5 ； 100% MeOH为流动相梯度洗脱，根据薄层板检测得到4 个组分Fr. A1-Fr. A4 ;Fr. A3经正相硅胶柱(200-300目)以正己烷/ 二氯甲烷5 1,1 1， 1 5,1 川；⑶^“^^^为流动相梯度洗脱，根据薄层板检测得到？个组分？！“^^呼!·. A3_2 ；Fr. A3_2经S印handex LH-20凝胶柱(CH2Cl2 MeOH 1 1)分离纯化，最后通过半制备 型HPLC进行纯化制备(C18，1. Oml/min)，以100%甲醇为溶剂进行洗脱，用示差检测器检测， 收集保留时间为38min的流份，得1，2_0_十八烷基甘油醛3. 4mg。化合物1，2-0-十八烷基甘油醛为无色油状固体，分子式C21H42O35EI-MS显示有 [M] + 峰 m/z342。1H-NMR 和 13C-NMR 数据见表 1。表1化合物1，2-0-十八烷基甘油醛的NMR data in CDCl/ alH-NMR was recorded at 500MHz ;J 值偶合常数体外抗菌试验一、试验用真菌、细菌和藻类1.试验用真菌花药黑粉菌(Microbotryum violaceum)、灰霉菌(Botrytis cinerea)和壳针孢叶枯病菌(Septoria tritici)；2.试验用细菌包括大肠杆菌(Escherichia coli)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)；3.试验用藻类小球藻(Chlorella fusca)。二、实验用药1.阳性对照药青霉素(Penicillin)、链霉素(Sti^ptomycin)；2.阴性对照品丙酮(Acetone)；3. 1，2-0-十八烷基甘油醛由实施例1制备三.实验方法1.配制药物溶液将青霉素、链霉素和1，2-0-十八烷基甘油醛分别用丙酮配制成 浓度为2mg/ml的溶液，单次测试用量25 μ 1。2.将上述3种真菌、2种细菌和1种藻类按无菌操作的要求分别用7ml灭菌水配 制成菌液，各用喷雾器取4ml菌液，分别均勻喷洒于各自培养皿的培养基表面，再在每个培 养皿内分别放置直径约Icm灭菌滤纸两块，覆盖于培养基表面，然后分别取上述配制的药 液25 μ 1滴于滤纸上，盖上培养基盖子进行培养。各培养皿盖子上均注明相应培养基种类、 菌种、化合物名称、接种时间。花药黑粉菌室温培养4天，灰霉菌室温培养5天，壳针孢叶枯 病菌20°C培养4天，大肠杆菌37°C培养24小时，巨大芽孢杆菌37°C培养24小时，小球藻 20°C培养5天。按时观察结果，测量抑菌圈的大小(半径)，平行试验3次，结果见表2。表2琼脂扩散实验活性筛选(mm) 由表2可见，1，2-0_十八烷基甘油醛对花药黑粉菌具有显著的抑制作用，其抑制 作用甚至比阳性对照药青霉素和链霉素还强，因此可用于制备抗菌药物。
权利要求
1，2-O-十八烷基甘油醛在制备抗菌药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及医药技术领域，是化合物1，2-O-十八烷基甘油醛用于制备抗菌药物的新用途。体外抗菌试验表明，1，2-O-十八烷基甘油醛对花药黑粉菌具有显著的抑制作用，其抑制作用甚至比阳性对照药青霉素或链霉素还强，因此可用于制备抗菌药物。本发明为研制新的抗菌药物提供了先导化合物，对开发利用中国的海洋药用资源具有重要意义。
文档编号A01N43/28GK101862323SQ20101020795
公开日2010年10月20日 申请日期2010年6月23日 优先权日2010年6月23日
发明者刘宝姝, 孙鹏, 张文, 易杨华, 李玲, 汤华, 霍娟 申请人:中国人民解放军第二军医大学