专利名称：多种微生物制备复合生物菌肥的方法
技术领域：
本发明具体涉及一种多种微生物制备复合生物菌肥的方法，属于生物发酵工程技术领域，是采用多种功能性微生物和益生微生物制备复合微生物菌肥的方法。
背景技术：
微生物菌肥是以微生物生命活动达到促进农作物生长，或产量增加或质量提高的一类制品。特定功能的微生物和这些活体微生物的重要作用是其共同特点。这些产品在降低化肥用量，提高化肥利用率和减少环境污染，已经取得较好效果，进一步研制开发具有广阔前景。就发明人所知，目前在提高产品质量，保证多功能菌种的数量，稳定应用效果和降低生产成本是目前迫切需要解决的问题。
发明内容
本发明的目的就是克服以上缺陷，提供一种能提高产品质量，保证多功能菌种的数量，稳定应用效果和降低生产成本的多种微生物制备复合生物菌肥的方法。本发明的主要技术方案是这样实现的所述的多种微生物制备复合生物菌肥的方法，包括功能菌种的制备，益生菌菌种的培养，和载体的选择和处理。其特征在于根据菌种的生理特点分别采取好氧培养和厌氧培养两种方式，获取最大数量的活菌细胞和代谢产物。选择经生物除臭和无害化处理的生活污泥作为载体。所述的菌种包括芽孢杆菌属、链霉菌属、固氮菌属、根瘤菌属、酵母菌属、乳酸菌属、醋酸菌属7个属，共15个种的微生物。具有固氮、解磷、解钾、抗虫、抗病、刺激生长和多种活性酶及次生代谢产物，如多种有机酸、小分子肽、维生素、低聚糖类物质。能有效地改善作物营养，提高抗逆性，改善品质，增加产量。所述的好氧培养方式，是采用发酵工业通用的液体深层培养罐，根据各菌种的需要选择适宜生长的培养基，通气条件培养，菌体达最大数量，成熟放罐。所述的厌氧培养方式，是采用液体深层静置培养，根据各菌种的需要选择适宜培养基，主要是在厌氧条件下使其发酵，获得最大量的发酵产物。所述菌种制备方法用的斜面培养基具有如下组份及较佳重量配比蛋白胨8 12g牛肉膏4 6g葡萄糖I 3g琼脂12 20g蒸懼水1L。所述的菌种液体培养用的培养基具有如下组份及较佳重量配比大豆水解物10 30g蛋白胨4 IOg鹿糖16 24g KH2P043 8g MgSO4I 6g水1L。所述的菌种液体深层静置培养用的培养基，具有如下组份及较佳重量配比鹿糖10 30g 蛋白胨 4 IOg 酵母膏 5_10g KH2P045 IOgMgSO4I 6g 水 1L。所述经生物除臭和无害化处理的生活污泥作为载体，生活污泥各项指标符合国家排放标准。其生产工艺是
(I)菌种的好氧培养，包括如下步骤斜面菌种试管斜面于25_32°C恒温培养,24_72h。菌种悬液试管斜面倒入无菌水，刮去菌苔，制备悬液。液体培养基菌种液体培养用的培养基具有如下组份及较佳重量配比大豆水解物10 30g蛋白胨4 IOg蔗糖16 24gKH2P043 8g MgSO4I 6g 水 IL0灭菌0·12-0. 15Mpa，121_125°C，蒸汽灭菌 30 分钟。接种将菌种悬液接入灭菌的培养基中。
培养25-32°C，罐压O. 04-0. 05,培养 36_72h。培养物复合①将分别培养获得的培养液，混合，搅拌均匀。(2)菌种液体深层静置培养斜面菌种试管斜面于25_32°C恒温培养,24_72h。菌种悬液试管斜面倒入无菌水，刮去菌苔，制备悬液。液体培养基鹿糖10 30g蛋白胨4 IOg酵母膏5_10gKH2P045 IOg MgSO4I 6g 水 IL灭菌115°C，蒸汽灭菌20分钟。接种将菌种悬液接入灭菌的培养基中。培养25-32°C，培养 36_72h。培养物复合②将分别培养获得的培养液，混合，搅拌均匀。(3)培养物复合①与培养物复合②复合将两种复合物混合，搅拌均匀，即为液剂
女口
广叩ο(4)载体吸附①发酵选择重金属离子符合国家排放标准的生活污泥，按重量比I : O. 5-5接入除臭剂(昌鑫生物科技有限公司)，进发酵塔，保温25-65°C发酵，2-7天。②烘干80-115°C，1-2小时。③粉碎粒度60-80目。④吸附复合菌液I份，载体4-10份，拌合均匀。即为固剂产品。本发明的积极效果是将好氧培养方式获得的多种特定功能，如固氮、解磷、解钾、抗虫、抗病、刺激生长等，大量活体细胞与在厌氧条件下发酵，获得的大量的多菌种发酵产物，如多种有机酸、小分子肽、维生素、低聚糖类物质，按比例配合，用无菌载体吸附。明显提高了产品的多种效应，即改善作物营养，提高抗逆性，改善品质，增加产量。与现有技术相比本发明具有首先将多种特定功能的微生物，分别或复合培养获得大量活体细胞，与此同时，将多种益生菌的复合培养物，在厌氧条件下发酵，获得大量的多菌种发酵产物，然后按比例配合，用所选择的载体吸附。使其具有微生物类群多，功能多，代谢产物多，能有效稳定应用效果的特点。选经处理的生活污泥为载体，对降低成本，保护生态环境的优点。
具体实施例方式实施例I.
I)将固氮、解磷、解钾、抗虫、抗病、刺激生长功能的菌种，分别接种于试管斜面上。试管斜面置于25_32°C恒温培养,24_72h。2)培养好的试管斜面，倒入无菌水，并刮取菌苔制备菌悬液于无菌瓶中。3)配制液体培养基,其组分为大豆水解物10 30g蛋白胨4 IOg鹿糖16 24g KH2P043 8g MgSO4I 6g 水 IL04)蒸汽灭菌，O. 12-0. 15Mpa，121_125°C，30 分钟。5)将菌种悬液接入灭菌的培养基中。6) 25-37 0C，培养 36_72h。7)将分别培养获得的培养液,混合,搅拌均勻。为复合①液。
8)将用于深层静置培养的菌种，分别在灭菌瓶中活化。9)静置培养的液体培养基，其组分为蔗糖10 30g蛋白胨4 IOg酵母膏5-10gKH2P045 IOg MgSO4I 6g 水 IL10)上述培养基于115°C，蒸汽灭菌20分钟。11)将活化的菌悬液接入培养基中，25_37°C，培养2-7天。为复合②液。12)培养物复合①与培养物复合②，两种复合物混合，搅拌均匀，即为液剂产品。此产品稀释100倍，喷施，蔬菜增产25-30%，果实含糖量、维生素均超过不施对照。实施例2.I)将固氮、解磷、解钾、抗虫、抗病、刺激生长功能的菌种，分别接种于试管斜面上。试管斜面置于25_32°C恒温培养,24_72h。2)培养好的试管斜面，倒入无菌水，并刮取菌苔制备菌悬液于无菌瓶中。3)配制液体培养基,其组分为大豆水解物10 30g蛋白胨4 IOg鹿糖16 24g KH2P043 8g MgSO4I 6g 水 IL04)蒸汽灭菌，O. 12-0. 15Mpa，121_125°C，30 分钟。5)将菌种悬液接入灭菌的培养基中。6) 25-37 0C，培养 36_72h。7)将分别培养获得的培养液,混合,搅拌均勻。为复合①液。8)将用于深层静置培养的菌种，分别在灭菌瓶中活化。9)静置培养的液体培养基中，其组分为蔗糖10 30g蛋白胨4 IOg酵母膏5-10g KH2P045 IOg MgSO4I 6g 水 IL10)上述培养基于115°C,蒸汽灭菌20分钟。11)将活化的菌悬液接入培养基中，25_37°C，培养2-7天。为复合②液。12)培养物复合①与培养物复合②两种复合物混合，搅拌均匀。13)载体制备①发酵选择重金属离子符合国家排放标准的生活污泥，按重量比I : O. 5-10接入除臭剂(昌鑫生物科技有限公司)，进发酵塔，保温25-65°C发酵，2-7天。②烘干80-115 ，1-2小时。③粉碎粒度60-80目。13)吸附复合菌液I份，载体4-10份，拌合均匀。即为固剂产品。
此产品拌种、穴施、灌根、冲施，或拌入有机肥使用，作物增产15-20%。且抗逆性增 强，根系发达，果实饱满，品质改善。
权利要求
1.多种微生物制备复合生物菌肥的方法，包括功能菌种的制备，益生菌种的培养，载体的选择与处理，其特征在于根据菌种的生理特点分别采取好氧培养与厌氧培养两种方式，获取最大数量的活菌细胞与代谢产物，选择经生物除臭和无害化处理的生活污泥作为载体。
2.根据权利要求I所述的多种微生物制备复合生物菌肥的方法，其特征在于功能菌种的制备采用具有固氮、解磷、解钾、抗虫、抗病、刺激生长等生理特性的微生物，选择好氧培养方式，分别或双菌培养，双菌培养的接种比例0. 1-2 1-10。
3.根据权利要求2所述的多种微生物制备复合生物菌肥的方法，其特征在于功能菌种的制备所述的培养基中具有大豆水解物及各组分的比例大豆水解物10 50g蛋白胨4 IOg 鹿糖 16 24g KH2P043 8g MgSO4I 6g 水 1L。
4.根据权利要求I所述的多种微生物制备复合生物菌肥的方法，其特征在于益生菌菌种的培养采用菌种在生命活动中，能产生多种活性酶及次生代谢产物，如多种有机酸、小分子肽、维生素、低聚糖类物质的微生物。选择深层静置的厌氧培养方式，分别或复合培养。接种量配比1 5-40。
5.根据权利要求4所述的多种微生物制备复合生物菌肥的方法，其特征在于深层静置的厌氧培养的培养基中具有以下组分和重量配比蔗糖10_30g，蛋白胨4—10g，酵母膏5-10g, KH P05_10g, MgS01_6g 水 IL。
6.根据权利要求12、3、4或5所述的多种微生物的培养，其特征在于采用多菌种选择好氧培养方式和厌氧培养方式，所获得的培养物按比例配合，其比例为I : 2-5。
7.根据权利要求I所述的多种微生物制备复合生物菌肥的方法，其特征在于培养物载体的选择和处理选择的生活污泥，经添加生物除臭剂，重量比为I : O. 5-10进发酵塔，保温25-65°C发酵，2-7天。再行烘干，80-115°C，l_2小时。粉碎，粒度60-80目。
8.根据权利要求1、7所述的多种微生物制备复合生物菌肥的方法，其特征在于载体应用培养物与载体的配合比例，I : 4 : 10。
全文摘要
本发明公开了一种多种微生物制备复合生物菌肥的方法，其特点是首先将多种特定功能的微生物，分别或复合培养获得大量活体细胞，与此同时，将多种益生菌的复合培养物，在厌氧条件下发酵，获得大量的多菌种发酵产物，然后按比例配合，用所选择的载体吸附，具有微生物类群多，功能多，代谢产物多，能有效稳定应用效果的优点，适应于选经处理的生活污泥为载体，对降低成本，保护生态环境。
文档编号C05G3/00GK102815982SQ20111015014
公开日2012年12月12日 申请日期2011年6月7日 优先权日2011年6月7日
发明者高淑英, 靳庆生, 郭好礼, 梁绍芬 申请人:山西昌鑫生物农业科技有限公司