专利名称：尿酸酶抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及例如尿酸酶抑制剂以及抑制了氨味产生的堆肥的制造方法。
背景技术：
一直以来，使用由养鸡排出的鸡粪等排泄物来进行堆肥的制造。然而，鸡粪中包含尿酸作为全部氮成分的约一半，因此在堆肥化时产生氨。由此，为了防止使用了该鸡粪的堆肥的异味，例如，专利文献I公开了为了减少气味，而在鸡粪中配合有酸性物质、芳香剂的鸡粪肥料。另一方面，堆肥化时产生氨的一个主要原因是尿酸通过微生物的尿酸酶反应而生成尿囊素，进而由尿囊素经过尿囊酸以及尿素来生成氨。专利文献2中，作为尿酸酶抑制剂，公开了例如银、铜、锌等金属或其金属离子。然而，在堆肥化中使用了该金属、金属离子的情况下，在使用所得的堆肥而生产的作物中包含该金属、金属离子，因此并不优选。专利文献I :日本特开2001-89272号公报专利文献2 日本特开平5-137774号公报
发明内容
发明要解决的课题一直以来，不知道充分除去在使用了鸡粪等包含尿酸的排泄物的堆肥化时产生的氨味的方法。此外，不知道可以抑制作为该氨味产生原因的尿酸酶、并且可以在堆肥化中使用的物质。因此，本发明鉴于上述实际情况，提供了尿酸酶抑制剂以及抑制了氨味产生的堆肥的制造方法。用于解决课题的方法为了解决上述课题而进行了深入研究，结果发现，桉树、桉树提取物、竹醋以及玉米浆(以下，称为“CSL”)具有尿酸酶抑制作用，从而完成了本发明。S卩，本发明涉及一种尿酸酶抑制剂，其含有选自桉树及其提取物、竹醋以及CSL中的一种以上尿酸酶抑制物质。此外，本发明涉及堆肥的制造方法或由该方法制造的堆肥，所述堆肥的制造方法包括下述工序将添加有选自桉树及其提取物、竹醋以及CSL中的一种以上尿酸酶抑制物质的、含有尿酸的排泄物进行堆肥化。作为上述的桉树提取物，可列举例如，桉树热水提取物。此外，作为上述的排泄物，可列举例如，鸡粪。本说明书包含作为本申请优先权基础的日本特许出愿2010-022066号的说明书所记载的内容。发明的效果
根据本发明，通过在堆肥化时抑制尿酸酶生产菌的尿酸酶活性，可以制造氨味少或完全没有氨味的堆肥。此外，根据本发明，通过抑制尿酸的分解，可以制造高氮含量的堆肥。
具体实施例方式以下，详细地 说明本发明。本发明涉及一种尿酸酶抑制剂，其含有选自桉树及其提取物、竹醋以及CSL中的一种以上尿酸酶抑制物质(以下，有时简称为“尿酸酶抑制物质”)。通过使用本发明涉及的尿酸酶抑制剂，可以在堆肥化时抑制尿酸酶生产菌的尿酸酶活性，并可以制造氨味少或完全没有氨味的堆肥。此外，本发明涉及的尿酸酶抑制剂通过涂布于厕所的地面上等来施与，从而可以抑制飞散的尿中所包含的尿酸分解为氨，抑制厕所空间的氨味。这里，桉树是指属于桃金娘科桉属(Eucalyptus)的植物。作为属于桃金娘科桉属(Eucalyptus)的种,可列举例如,灰桉、R尼桉、穿叶桉、杏仁桉、白藓叶桉、蓝桉、朽1檬桉等。此外，作为所使用的桉树的部位，可列举例如，叶、茎、根部、树皮以及桉树整体。此外,所使用的桉树可以是砍伐后运出来的桉树、干燥后的桉树的任一种。桉树提取物是指将上述的桉树供于使用了热水，乙醇、甲醇、己烷等有机溶剂的提取从而获得的物质。例如，热水提取如下进行在桉树的叶的干燥物中添加水(例如，叶相对于水的比例5% 20%(W/V))，在70 100°C (优选为95 100°C )加热0. 5 4小时(例如，2小时)。然后，将所得的提取液冷却，然后过滤，将滤液供于冷冻干燥，从而可以获得桉树热水提取物。另一方面，使用有机溶剂的提取如下进行在桉树叶的干燥物中添加有机溶剂，在常温下或加热至室温 40°C，提取I 14天(例如7天)。通过将所得的提取液冷却，然后过滤，将该滤液供于浓缩干燥固化来进行。竹醋(或竹醋液)是指收集作为制造竹炭时的副产物等从烧炭釜出来的烟，冷却，然后进行蒸馏处理等来获得的液体。所使用的竹醋可以是市售商品，可列举例如，竹醋液3号(宫崎土晃(株))、特选竹醋液(竹炭工房无限窑)等。CSL为生产玉米淀粉时所产生的副产物，是指在作为玉米淀粉的纯化方法之一的玉米湿磨的浸溃工序中，将包含从玉米溶出的可溶性成分和由乳酸发酵生成的成分的浸溃液进行浓缩而得的物质。所使用的CSL可以是市售商品，可列举例如，粉末玉米浆
>夕 >酵母工业(株))、玉米浆(寸 >工^糖化(株))等。本发明涉及的尿酸酶抑制剂除了尿酸酶抑制物质以外，还可以配合例如，除臭剂等、增强除臭效果的成分、促进堆肥化的微生物、材料等。此外，本发明涉及的尿酸酶抑制剂中的尿酸酶抑制物质的配合量可以根据使用的用途来适当决定。作为本发明涉及的尿酸酶抑制剂的尿酸酶抑制作用的评价方法，可列举以下方法例如，在包含尿酸酶和作为该酶的底物的尿酸的反应液中添加本发明涉及的尿酸酶抑制剂，将通过反应而消失的尿酸作为指标来评价尿酸酶活性抑制作用。例如，与未添加本发明涉及的尿酸酶抑制剂的反应液相比，在添加有本发明涉及的尿酸酶抑制剂的反应液中，消失的尿酸显著少的情况下，可以判断本发明涉及的尿酸酶抑制剂在尿酸酶抑制作用方面是良好的。
另一方面，本发明涉及的堆肥的制造方法为，利用上述的桉树、桉树提取物、竹醋以及CSL的尿酸酶抑制作用，将添加有选自桉树及其提取物、竹醋以及CSL中的一种以上尿酸酶抑制物质的、含有尿酸的排泄物供于堆肥化来制造堆肥的方法(以下，称为“本方法”)。根据本方法，可以抑制堆肥化时尿酸酶生产菌的尿酸酶活性，并可以提供氨味少或完全没有氨味的堆肥。这里，作为含有尿酸的排泄物(以下，简称为“排泄物”)，可列举例如，包括人、家畜(例如鸡、牛以及猪)的动物的粪，特别优选鸡粪。在本方法中，首先，将上述的尿酸酶抑制物质添加至排泄物中。该添加只要是在堆肥化工序之前则可以为任一时刻。尿酸酶抑制物质相对于排泄物的添加比例在例如使用鸡粪的情况下可列举为0. 5 20%(W/W)，优选为I 10%(W/W)。然后，将尿酸酶抑制物质与排泄物的混合物供于堆肥化。堆肥化如下进行例如，在尿酸酶抑制物质与排泄物的混合物中适当添加种菌(例如，嗜热脱氮芽孢杆菌 (Geobacillus thermodenitrificans))、植物纤维分解酶(纤维素酶、木聚糖酶等)等，供于发酵。作为发酵条件，可列举例如，在温度40 80°C (优选为50 70°C )发酵2 5周(优选为3 5周)。由此，可以制造氨味少或完全没有氨味的堆肥。作为通过本方法制造的堆肥的氨味的评价方法，可列举例如感官评价。即，由多人确认通过本方法制造的堆肥的气味，与由未添加尿酸酶抑制物质的排泄物制造的堆肥进行比较，判断为氨味显著少或完全没有氨味的情况下，可以判断通过本方法制造的堆肥的不快气味少，是良好的。实施例以下，使用实施例更详细地说明本发明，但本发明的技术范围不限于这些实施例。〔实施例I〕桉树、桉树热水提取物、竹醋以及CSL的尿酸酶抑制作用1-1.桉树热水提取物的制作在桉树(蓝桉,Eucalyptus globulus)的叶的干燥物50g中添加纯化水500mL,在95 100°C提取2小时。将所得的提取液冷却，过滤，然后将滤液供于冷冻干燥，从而获得8. 7g的桉树热水提取物。1-2.尿酸酶活性抑制试验进行桉树、上述桉树热水提取物、竹醋以及CSL的尿酸酶活性抑制试验。所使用的桉树为蓝桉的叶。竹醋为宫崎土晃(株)制的产品。此外，CSL为寸>二 4糖化(株)制的产品。尿酸酶活性的测定参考日本特开2008-24635号公报所记载的测定方法来进行。即，关于尿酸酶活性，基于吸光度的变化来测定将尿酸作为底物，由尿酸酶反应引起的尿酸的消失。将40 ii M 的尿酸、包含 0. 00083%(W/V)的 Triton X-100 和 0. 83mM 的 EDTA 的 42mM硼酸缓冲液(PH8. 0) 2. 5mL、以及试样液(尿酸酶抑制物质)或纯化水0. 3mL在37°C预加热5分钟。然后，将预先以酶稀释液(包含0. 001%(ff/V)的Triton X-100和0. ImM的EDTA的50mM硼酸缓冲液(pH8. 0))稀释而成的尿酸酶酶溶液0. 5mL添加至预加热后的上述混合液中，开始尿酸酶反应。在37 °C精确地反应5分钟，然后将20% (W/V)的KOH溶液0. 2mL添加至反应液中，使反应停止。反应停止后，将反应液供于290nm的吸光度测定(AOD测试)。空白试验如下进行代替酶溶液而添加上述酶稀释液0. 5mL，与上述同样地进行操作，供于290nm的吸光度测定(A0D空白)。由所得的吸光度，基于下述计算式来算出尿酸酶活性抑制率。尿酸酶活性抑制率的计算式尿酸酶活性抑制率(%) = {I-(0D测试-OD空白)/ (0D测试纯化水-OD空白纯化水)}X100将各尿酸酶抑制物质的尿酸酶活性抑制试验的结果示于以下的表I中。表I各尿酸酶抑制物质的尿酸酶活性抑制率
尿酸酶抑制物质终浓度._尿酸酶活性抑制率(％)
竹醋10倍稀释液71.3_
100倍稀释液 59.0_
__1000倍稀释液 23.5_
CSL10倍稀释液__100.0_
100倍稀释液 13.6_
_7] _ 300倍稀释液 1.3_
桉树热水提取物 0.3mg/mL__100.0_
0.1mg/mL__86.9_
__O.Olmg/mL__L7_
桉树1.5mg/mL__100.0_
0.5mg/mL__12.6_
__O.Olmg/mL__M_如表I所示，对桉树、桉树热水提取物、竹醋以及CSL确认了尿酸酶活性抑制作用。此外，关于竹醋溶解于水时的pH，原液时为pH3. O，100倍稀释液时为pH3. 5。关于CSL溶解于水时的pH，原液时为pH3. 7。此外，关于桉树热水提取物溶解于水时的pH，lmg/mL时为pH4. 6,0. lmg/mL时为pH5. I。另一方面,关于完全未显示尿酸酶活性抑制作用的泥炭苔(peat moss)热水提取物溶解于水时的pH, 2mg/mL时为pH3. 5。因此,上述尿酸酶活性抑制作用不是由pH引起的。〔实施例2〕配合有桉树的堆肥的制造以及该堆肥的气味感官评价 在预先通过混合鸡粪和干燥鸡粪来调制成含水率50 60%的鸡粪I Ikg中配合堆肥化促进系统resQ45 (卜3 ^ 一 7力' 一 r >株式会社制)的材料寸一 ^ ^ ^夕一约30g、以及resQ45的材料特别急酵约20g作为种菌，利用堆肥化试验装置(富士平工业社制商品名“ 士、C々A ”)进行堆肥化处理。堆肥化进行10天。通过在堆肥化处理时，对添加桉树而进行了堆肥化的桉树处理区与作为比较例的未在鸡粪中添加桉树而进行了堆肥化的无处理区的堆肥化的状态进行了比较。所使用的桉树为蓝桉的叶。此外，桉树相对于鸡粪以5%(W/W)来添加。堆肥化处理后，由10名作业人员确认堆肥的气味，进行气味的感官评价。将结果示于表2中。气味的感官评价中，将氨味的强度以“少”、“稍少”以及“无变化”这三个等级来评价。表2堆肥的氨味感官评价
权利要求
1.一种尿酸酶抑制剂，其含有选自桉树及其提取物、竹醋以及玉米浆中的一种以上尿酸酶抑制物质。
2.根据权利要求I所述的尿酸酶抑制剂，桉树提取物为桉树热水提取物。
3.—种堆肥的制造方法，其包括下述工序将添加有选自桉树及其提取物、竹醋以及玉米浆中的一种以上尿酸酶抑制物质的、含有尿酸的排泄物进行堆肥化。
4.根据权利要求3所述的方法，桉树提取物为桉树热水提取物。
5.根据权利要求3或4所述的方法，含有尿酸的排泄物为鸡粪。
6.一种堆肥，其是通过权利要求3 5的任一项所述的方法制造的。
全文摘要
本发明的目的在于提供防止由尿酸产生氨的尿酸酶抑制剂，具体而言，本发明涉及尿酸酶抑制剂，其含有选自桉树及其提取物、竹醋以及玉米浆中的一种以上尿酸酶抑制物质。
文档编号C05F3/00GK102811978SQ20118000482
公开日2012年12月5日 申请日期2011年1月18日 优先权日2010年2月3日
发明者松下响, 高田大士, 多田宣纪 申请人:丰田自动车株式会社