专利名称:一种海参多肽螯合活性钙的制备方法及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及海参多肽制剂的生产，具体涉及一种海参多肽螯合活性钙的制备方法及应用。
背景技术：
胰岛细胞分泌不足导致血液中糖化血清蛋白、尿素氮和肌酐含量较高，糖耐量降低、血脂代谢紊乱；血糖和血脂升高，肝、肾功能下降。海参含有丰富的胶原蛋白、皂甙和粘多糖，具有提高免疫力，抗肿瘤，降血脂，抗凝血，延缓皮肤衰老，降低高血尿酸的作用。公开号为CN101514354，名称为一种海参多肽及制备方法和应用的发明专利申请，公开了新鲜刺参匀浆后，用胃蛋白酶、胰蛋白酶酶解，上清中加乙醇静置，离心取上清，干燥得到海参多肽粗品，然后经层析得到海参多肽，海参多肽具有升高白细胞，促进骨髓细胞增生的作用。授权公告号为CN1951402，名称为一种海参多肽钙、锌蛋白的生产方法的发明专利，则公开了海参浆用胰蛋白酶酶解后，加入生物钙和/或锌，干燥得到海参多肽钙、锌蛋白，具有补充钙质、改善骨骼、抗辐射、解毒等作用，但上述海参多肽或含海参多肽钙和/或锌中海参多肽纯度低，海参多糖和海参皂苷等杂质多，还有农药残余也较多，海参多肽与钙、锌之间螯合度低。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种海参多肽螯合活性钙的制备方法，该制备方法生产方便，海参多肽纯度高，种类较多，分子量较均一，得到的海参多肽螯合活性钙具有改善胰岛细胞的分泌，降低血液中糖化血清蛋白、尿素氮和肌酐含量的作用。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为一种海参多肽螯合活性钙的制备方法，其步骤如下
A、去杂去内脏后的海参放入盛有纯净水的锅中煮沸后，倒掉沸水，再加入纯净水煮沸后，再倒掉沸水，共反复换纯净水煮沸4 5次，得到软化海参，再将软化海参粉碎成直径为 I 2mm的海参颗粒；这样反复换纯净水煮沸可以充分除去盐溃和农药，溶解去除海参多糖和海参皂苷，并海参软化效果好，有利于粉碎，有利于酶解；
B、按重量比I:2 5的比例在海参颗粒加入水，再加入复合蛋白酶，所述复合蛋白酶与所述海参颗粒的重量比为2 3 :100，搅拌均匀，酶解温度为45 65°C下，酶解120 180min得到海参酶解液；所述复合蛋白酶为胃或胰蛋白酶与木瓜蛋白酶和中性蛋白酶按重量比6 :4:3配制而成，各酶的活性都为10-20万国际单位/g酶蛋白；用该复合蛋白酶， 在上述条件下酶解，得到的海参多肽种类多、分子量较均一，酶解效果较好；
C、将牡蛎壳清洗干净，在300 900°C煅烧3h，冷却粉碎成80 100目，得到牡蛎壳活性 丐;
D、将上述牡蛎壳活性钙装入玻璃皿中，再加入上述海参酶解液，所述海参酶解液与所述牡蛎壳活性钙的重量比为100 6 12，搅拌10 30min，静置30 40min后干燥，得到海参多肽螯合活性钙；用此方法海参多肽基本螯合至活性钙中，螯合度高，且均匀性较好。
步骤b中酶解温度为52°C，酶解时间177min，所述复合蛋白酶与所述海参颗粒的重量比为2. 5 :100。
该方法得到的海参多肽螯合活性钙在制备改善胰岛细胞分泌的药物中应用，添加必要的药学上认可的辅剂，可以加工成片剂，丸剂、颗粒剂、胶囊，微胶囊，口服液等。
与现有技术相比，本发明的优点在于一种海参多肽螯合活性钙的制备方法，通过对海参反复用纯净水煮沸软化，然后粉碎成直径为I 2mm的海参颗粒，海参颗粒与水和复合蛋白酶配成海参原浆，并在温度45 65°C，酶解120 180min得到海参酶解液，同时将牡蛎壳300 900°C煅烧3h，粉碎成80 100目，得到牡蛎壳活性钙，在玻璃器皿中，海参酶解液与牡蛎壳活性钙按重量比为100 6 12混合，搅拌10 30min，静置30 40min干燥，得到海参多肽螯合牡蛎活性钙。该方法制备简单，生产方便，生产成本较低，可以充分除去盐溃和农药，除去海参多糖和海参皂苷，酶解得到的海参多肽纯度就高，复合蛋白酶使海参多肽种类较多，分子量较均一，海参多肽基本螯合至活性钙中，最后得到的海参多肽螯合活性钙具有改善胰岛细胞的分泌，降低血液中糖化血清蛋白、尿素氮和肌酐含量的作用，可以提高糖耐量，改善血脂水平，保护肾脏，保护血管内皮细胞等。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例I
一种海参多肽螯合活性钙的制备方法，将新鲜海参去杂去内脏，放入盛有纯净水的锅中煮沸后倒掉沸水，再加入纯净水煮沸后再倒掉沸水，如此用纯净水共反复煮沸4 5次， 得到软化海参，再将软化海参粉碎成直径为I 2mm的海参颗粒,在5公斤海参颗粒加15 公斤水，再加由胃蛋白酶与木瓜蛋白酶和中性蛋白酶按重量比6 4 3配制成的复合蛋白酶 O. 125公斤(其中各酶的活性都为10-20万国际单位/g酶蛋白)，搅拌均匀制成海参原浆， 在酶解温度52°C下，酶解177min得到海参酶解液；同时将牡蛎壳清洗干净，在300 900°C 煅烧3h，冷却粉碎成80 100目，得到牡蛎壳活性钙；然后将牡蛎壳活性钙装入玻璃皿中， 再加入海参酶解液，100公斤海参酶解液与10公斤牡蛎壳活性钙混合螯合，搅拌10-30min， 静置干燥30-40min，得到海参多肽螯合活性钙。
实施例2
与实施例I基本相同，所不同的只是5公斤海参颗粒加水10公斤，加复合蛋白酶O. I 公斤，酶解温度为65°C，酶解时间为120min，100公斤海参酶解液与6公斤牡蛎壳活性钙混
合螯合。
实施例3
与实施例I基本相同，所不同的只是新鲜海参由水发海参替代，5公斤海参颗粒加水50 公斤，加复合蛋白酶O. 15公斤，复合蛋白酶中胃蛋白酶由胰蛋白酶替代，酶解温度为45°C， 酶解时间为180min，100公斤海参酶解液与12公斤牡蛎壳活性钙混合螯合。
试验例
SD大鼠70只，雌雄各半，随机平均分成空白组、模型组、给药高剂量Gl组、给药中剂量 G2组和给药低剂量G3组，模型组大鼠腹腔注射STZ (lOOmg . kg—1)进行造模，给药Gl、G2和G3组预先分别按IOmg · kg—1 · d'6 mg · kg—1 · cf1和3 mg · kg—1 · (T1剂量,灌胃上述实施例I的海参多肽螯合活性钙60天，然后腹腔注射STZ (IOOmg · kg—1)，空白对照组未用药未注射STZ ;注射STZ后(空白未注射，同时取血)的第三天通过尾静脉取血，测大鼠血中糖化血清蛋白、尿素氮和肌酐含量，得到如表I所示的结果。
表I :海参多肽螯合钙对大鼠血清生化指标影响UKQ. 01)
权利要求
1.一种海参多肽螯合活性钙的制备方法，其特征在于步骤如下a、去杂、去内脏后的海参放入盛有纯净水的锅中煮沸后，倒掉沸水，再加入纯净水煮沸后倒掉沸水，共反复换纯净水煮沸4 5次，得到软化海参，再将软化海参粉碎成直径为 I 2mm的海参颗粒；b、按重量比I:2 5的比例在海参颗粒加入水，再加入复合蛋白酶，所述复合蛋白酶与所述海参颗粒的重量比为2 3 :100，搅拌均匀，在酶解温度为45 65°C下，酶解120 180min得到海参酶解液，所述复合蛋白酶为胃蛋白酶或胰蛋白酶与木瓜蛋白酶和中性蛋白酶按重量比6 4 3配制而成，所述胃蛋白酶或胰蛋白酶及木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的活性都为10-20万国际单位/g酶蛋白；C、将牡蛎壳清洗干净，在300 900°C煅烧3h，冷却粉碎成80 100目，得到牡蛎壳活性 丐;d、将上述牡蛎壳活性钙装入玻璃器皿中，再加入上述海参酶解液，所述海参酶解液与所述牡贩壳活性I丐的重量比为100 6 12,搅拌10 30min,静置30 40min后干燥,得到海参多肽螯合活性钙。
2.如权利要求
I所述的一种海参多肽螯合活性钙的制备方法，其特征在于步骤b中酶解温度为52°C，酶解时间177min，所述复合蛋白酶与所述海参颗粒的重量比为2. 5 :100。
3.权利要求
I所述的一种海参多肽螯合活性钙的制备方法得到的海参多肽螯合活性钙在制备改善胰岛细胞分泌的药物中应用。
专利摘要
本发明公开了一种海参多肽螯合活性钙的制备方法及应用，通过对海参反复用纯净水煮沸软化，然后粉碎成直径为1～2mm的海参颗粒，海参颗粒与水和复合蛋白酶配成海参原浆，并在温度45～65℃，酶解120～180min得到海参酶解液，同时将牡蛎壳300～900℃煅烧3h，粉碎成80～100目，得到牡蛎壳活性钙，在玻璃皿中，海参酶解液与牡蛎壳活性钙按重量比为1006～12混合，搅拌10～30min，静置30～40min后干燥，得到海参多肽螯合活性钙。该方法制备简单，生产方便，生产成本较低，海参多肽较多，最后得到的海参多肽螯合活性钙具有改善胰岛细胞的分泌，降低血液中糖化血清蛋白、尿素氮和肌酐含量的作用。
文档编号A23L1/304GKCN102578589SQ201210058877
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月8日
发明者周君, 张春丹, 李妍妍, 李成华, 李晔, 王奇, 苏秀榕 申请人:宁波大学导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan