专利名称：一种旋幽夜蛾的人工饲料及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明属于植物保护领域，具体涉及一种鳞翅目昆虫的人工饲料及其制备方法和应用。
背景技术：
旋幽夜蛾属鳞翅目夜蛾科，是间歇性局部发生的多食性害虫，在我国东北、华北、 西北各地均有分布，幼虫嗜食藜料植物(赵占江等，1992)。在新疆棉区与棉铃虫混合发生， 造成棉田多头棉现象严重，影响棉花生长发育，造成幼蕾脱落(于江南等1997)。在内蒙古一带为害甜菜甚为严重，尤以甜菜定苗后咬烂甜菜心叶，影响甜菜正常生长(孙治华等， 1995)。在其它地区还能为害亚麻、马铃薯、花生、玉米、向日葵和大豆等多种作物。据历史资料记载1959、1972在新疆焉耆垦区猖獗发生(曹曼等，1963 ;马自昌等，1983)。1990年在南疆沙雅县、新和县和阿瓦提县棉田内首次发现其危害迹象。随后几年随着棉花种植面积的增加，奎屯、石河子、玛纳斯等地棉区也有不同程度的发生，且危害日趋严重。1995年玛纳斯棉区旋幽夜蛾的发生面积占全县棉花种植面积的50 %，为害严重的棉田受害率达60 % (井双泉等，2001)。2008年旋幽夜蛾、棉铃虫在新疆博尔塔拉州棉区混合发生，棉花产量下降5 15%且较往年为害更重(王大光等，2009)。在内蒙古，上世纪90年代初，此虫就对当地甜菜造成很大危害，1994年呼和浩特市测报部门把此虫列为虫害测报对象(孙治华等，1995)。另外，甘肃武威等地和青海省也是其常发区和重发区(赵占江等1991;谢令德 1995)。但在我国东北和华北大部分地区很少有其发生危害的报道。2005年6月上旬吉林省白城地区通榆县和大安市田间旋幽夜蛾幼虫大暴发(安丽芬等，2005)，使当地向日葵、 蓖麻等作物大面积遭受虫灾，受害面积I. I万公顷，受害重的地块全田被吃成光杆，造成毁种(任丽等，2006)。旋幽夜蛾的迂飞习性已经通过野外雷达监测、空中风场分析、越冬代成虫羽化期地温分析得到证实(张云慧等，2007，2010等)。国外对旋幽夜蛾的研究几乎没有， 据有关报道，旋幽夜蛾在整个欧洲均有分布，由于不能耐受北部地区的冬季低温，选择在夏季进行迂飞(http://www. answers. Com/topic/nutmeg moth)。因此旋幽夜蛾的迂飞习性已经得到多方面证实。近年来旋幽夜蛾在国内的发生危害逐渐呈上升趋势，但由于对其研究较少，各级植保站测报技术人员对旋幽夜蛾的形态特征、危害特点、发生规律缺乏了解，经常是田间已经形成大规模危害后，才进行应急防控，很难能通过及时的预测预报指导农业防控。在人工饲料和人工饲养技术方面更是处于空白状态，目前对旋幽夜蛾的研究报道主要集中在利用天然饲料(甜菜、黎科杂草等)在自然变温状态下研究旋幽夜蛾的发育世代，有效积温，成虫产卵选择性、卵期和幼虫的耐寒力等方面(赵占江等，1992 ;谢令德等，1995 ;于江南等， 1997;赵琦等，2011)。天然饲料存在的问题(I)无法满足旋幽夜蛾的大批量、周年、继代饲养。(2)自然状态下，实验设计受各种环境因子影响，幼虫成活率不高，用杀虫活性物质进行生物测定时，实验结果的可信度和重复性不高。(3)无法提供生理指标相同的昆虫，使昆虫生理学、遗传学、毒理学及分子生物学研究无法开展。
综上所述，要想进一步明确相关环境因子对旋幽夜蛾发生危害的影响，为明确害虫的种群发生规律与暴发成灾机制奠定基础，旋幽夜蛾的人工饲料配制和人工饲养技术是急需解决的问题。
发明内容
为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种旋幽夜蛾的人工饲料。本发明的另一目的在于提供一种该饲料的制备方法。本发明的还一目的在于提供该饲料在饲养旋幽夜蛾中的应用。为了实现本发明目的，本发明提供的一种旋幽夜蛾的人工饲料，其由下列重量百分含量成分制备而成琼脂O. 8-1. 2 %,山梨酸O. 06-0. 09 %,啤酒酵母(Saccharomyces cerevisae Hansen) I. 8-2. 8%，豆饼粉 5. 0-7. 5%，玉米粉 5. 0-7. 5 %，番茄酱 14-17%，复合维生素B0. 07-0. 09 %，抗坏血酸(维C) O. 2-0. 3 %，对羟基苯甲酸乙酯O. 1-0. 2 %，丙酸 O. 2-0. 3%,7jC 64-71% ο其中，所述豆饼粉为普通黄豆打成粉状(北京华谷公司购买)。所述玉米粉为玉米籽粒打成粉状(超市购买)。所述番茄酱鲜番茄制作而成(上好牌，天津市天顺鑫意副食调料经销处)。优选地，由下列重量百分含量成分制备而成琼脂I. 0%，山梨酸O. 07%，啤酒酵母2.2%，豆饼粉6.2%，玉米粉6.2%，番茄酱16. 1%，复合维生素B O. 08%，抗坏血酸(维 C)0. 25%，对羟基苯甲酸乙酯O. 15%，丙酸O. 25%，水67. 5%。所述复合维生素B为粉状制剂，各组分占复合维生素B总量的重量百分含量为烟酞胺25. 0-35. O %，盐酸硫胺素5. 0-10. O %，核黄素12. 0-18. O %，盐酸毗哆醇5. 0-10. O %， 赖氨肌醇 O. 15-0. 20%，叶酸 5. 0-10. 0%，泛酸钙 25. 0-35. 0%，生物素 O. 5-1. 0% .本发明还提供了制备上述旋幽夜蛾的人工饲料的方法，其包括以下步骤(I)按比例称取豆饼粉、玉米粉和啤酒酵母，混合搅拌后灭菌，作为A组分；(2)按比例称取琼脂和山梨酸，混合后按比例加入水，煮至沸腾，直到琼脂完全溶解，冷却后加入番茄酱搅拌，之后将混合液倒入A组分搅拌，搅拌后液体作为B组分；(3)将B组分倒入蒸锅内加热，边加热边搅拌，至沸腾后冷却；(4)按比例称取复合维生素B、抗坏血酸、对羟基苯甲酸乙酯和丙酸，混合后按比例加入水，溶解并搅拌均匀，作为C组分；(5)将C组分与B组分混合，得旋幽夜蛾的人工饲料。其中，步骤⑴所述中灭菌温度为124-126°C，灭菌时间为30_35min。步骤(2)中，所述琼脂和山梨酸混合液冷却温度为60_65°C，所述琼脂和山梨酸总重量与水的重量百分比为I : 30。步骤⑶中，将B组份倒入蒸锅内加热2-3min,取出搅拌,再加热2-3min,取出搅拌，再加热3-5min，之后冷却；冷却温度为60_65°C。步骤(4)中，所述复合维生素B、抗坏血酸、对羟基苯甲酸乙酯和丙酸的总重量与水的重量百分比为I : 30。步骤(5)中，因B组分为糊状液体，B组份与C组份混合时，将C组份倒入B组份，让部分C组份混合液体流入下部，充分搅拌至完全均匀，之后冷却至60-65°C时，倒入20-25°C冷水中凝固。本发明还提供了上述人工饲料在饲养旋幽夜蛾中的应用。所述应用具体包括如下步骤(I)成虫-卵将羽化后的成虫雌雄配对，放到直径20cm，高30cm的产卵笼内进行交配产卵，产卵笼内悬挂干净纱布，供收集虫卵；脱脂棉浸泡5%的红糖水放置在IOcm的培养皿中，供成虫补充营养；每日更换脱脂棉和红糖水；成虫产卵后，每日更换纱布；饲养温度24-26°C，光照时间14L: IOD (—天24小时中，白天与夜晚的比例为14 10)，相对湿度为 60-70% ；(2)卵-初孵幼虫将产于纱布上的卵，放入保鲜袋中，用嘴轻轻吹气使保鲜袋有空气进入，用皮筋把保鲜袋封口，保证袋内空气充足，把保鲜袋放入温度24-26 °C，光照时间 14L:10D，相对湿度为60-70%的光照培养箱内，直至幼虫孵化；(3)初孵幼虫2-3龄幼虫将所述的旋幽夜蛾人工饲料用手术刀片切成小块，放入一次性纸杯中；把初孵幼虫抖落到白纸上，然后用毛笔轻轻挑取，放入纸杯中，每个纸杯放 20头左右，纸杯上部放一层保鲜膜，保鲜膜上用昆虫针扎10个左右的小孔，最后用皮筋封口。饲养温度24-26°C，光照时间14L:10D，相对湿度为60-70% ；(4) 3龄幼虫-化蛹幼虫达到3龄时，用消毒后的镊子把每个纸杯20头左右的幼虫分成每个纸杯4-5头，加一次饲料，幼虫5龄时再加一次饲料，为了使幼虫化蛹保持干爽的环境，5龄以后纸杯用纱布封口，直到昆虫化蛹。饲养温度24-26°C，光照时间14L: 10D,相对湿度为60-70% ；(5)化蛹-成虫用消毒后的镊子把化蛹后的旋幽夜蛾蛹挑出，放入纸杯中，每个纸杯放蛹20头左右，用纱布封口，直到成虫羽化，饲养温度24-26°C，光照时间14L:10D，相对湿度为70-80% ；(6)幼虫孵化后，继续按照上述步骤⑴、(2)、(3)、⑷、(5)循环操作、继代饲养， 直至饲养结束。本发明的有益效果是本发明的人工饲料制备成本低，操作简单，实用性强。本发明的人工饲料在4°C下， 保存期在I个月以上。本发明的人工饲料为旋幽夜蛾的规模化生产提供了必备的条件，减轻了自然饲料饲养时的污染问题，解决了旋幽夜蛾周年、继代饲养问题。为进一步开展旋幽夜蛾生物学、遗传学、毒理学提供生理指标相同的虫源奠定了基础。
具体实施例方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的保护范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。实施例I配置IOOOg人工饲料，各组分用量百分比分别为豆饼粉7.3%，玉米粉7.3%，番茄酱17 %，琼脂O. 8 %，啤酒酵母2. 8 %，山梨酸0.07%，复合维生素O. 08 %，抗坏血酸(维 C)0. 25%，对羟基苯甲酸乙酯O. 15%，丙酸O. 25%，水64%。所述复合维生素B为粉状制剂，各组分占复合维生素B总量的重量百分含量为烟酞胺30 %，盐酸硫胺素8.0%，核黄素15.0%，盐酸毗哆醇8.0%，赖氨肌醇O. 20 %，叶酸 8. 0%，泛酸钙30. 0%，生物素O. 8%。按照以下步骤配置旋幽夜蛾人工饲料准备电子天平I台、IOOOml烧杯、200ml烧杯、50ml烧杯各一个、玻璃棒、温度计、微
波炉、蒸锅、灭菌锅、保鲜盒等器具，将各组分按配比称重备用将豆饼粉、玉米粉、啤酒酵母倒入灭菌桶中，将上述3种组分充分搅拌后，放入灭菌锅中，于125 °C灭菌30min后，取出待用作为A组分。将琼脂与纯净水按I : 30比例混合，加热并煮至沸腾，待完全溶解后，加入山梨酸、番茄酱搅拌均匀，待琼脂和番茄酱混合液冷却至65°C时，将其倒入A组份，充分搅拌至均匀作为B组份。将B组份倒入蒸锅内放入微波炉内加热3min，取出搅拌，放入微波炉内加热2min，取出搅拌，再加热3min。将复合维生素B、抗坏血酸(C)、对羟基苯甲酸乙酯、丙酸加入纯净水I : 30ml中溶解，充分搅拌均匀作为C组份。将C组份倒入B组份，预留纯净水冲洗盛C组分的烧杯。 让部分C组份混合液体流入下部，充分搅拌至完全均匀。倒入保鲜盒，把保鲜盒放入25°C冷水中冷却，保证饲料不粘连保鲜盒壁。将配置好的饲料放入4°C冰箱保存备用。按照本实例制备的人工饲料，适合旋幽夜蛾食用。旋幽夜蛾的大规模、继代饲养的方法饲养的过程中必须保持养虫室内、养虫架及各种饲养器具消毒，做到无菌操作，一旦发现昆虫有病毒、细菌感染，及时消毒并处理受感染的昆虫。卵-初孵幼虫将产于纱布上的卵，放入保鲜袋中，用嘴轻轻吹气使保鲜袋有空气进入，用皮筋把保鲜袋封口，保证袋内空气充足，把保鲜袋放入温度25 土 TC，光照时间 14L: 10D,相对湿度为65±5%的光照培养箱内，直至幼虫孵化。初孵幼虫2-3龄幼虫将所述的旋幽夜蛾人工饲料用消毒后的手术刀片切成小块，放入一次性纸杯中。把初孵幼虫抖落到白纸上，然后用毛笔轻轻挑取，放入纸杯中，每个纸杯放20头左右，纸杯上部放一层保鲜膜，保鲜膜上用昆虫针扎10个左右的小孔，最后用皮筋封口。饲养温度25±1°C，光照时间14L:10D，相对湿度为65±5%。3龄幼虫-化蛹幼虫达到3龄时，用消毒后的镊子把每个纸杯20头左右的幼虫分成每个纸杯4-5头，加一次饲料，幼虫5龄时再加一次饲料，为了使幼虫化蛹保持干爽的环境，5龄以后纸杯用纱布封口，直到昆虫化蛹。饲养温度25 ± I °C，光照时间14L: 10D，相对湿度为65±5%。化蛹-成虫用消毒后的镊子把化蛹后的旋幽夜蛾蛹挑出，放入纸杯中，每个纸杯放蛹20头左右，用纱布封口，直到成虫羽化，饲养温度25 土 1°C，光照时间14L: 10D,相对湿度为75±5%。成虫-卵将羽化后的成虫雌雄配对，放到直径20cm，高30cm的产卵笼内进行交配产卵，产卵笼内悬挂干净纱布，供收集虫卵。脱脂棉浸泡5%的红糖水放置在IOcm的培养皿中，供成虫补充营养。每日更换脱脂棉和红糖水,3以后成虫开始产卵，成虫产卵后，每日更换纱布，纱布上的虫卵收集后放入保鲜袋中，使虫卵孵化。饲养温度25±1°C，光照时间 14L:10D，相对湿度为65±5%。
幼虫孵化后，继续按照上述步骤(I)、(2)、(3)、(4)、(5)循环操作、继代饲养，直至饲养结束。实施例2配置IOOOg人工饲料，各组分用量分别为豆饼粉6.2%，玉米粉6.2%，番茄酱 16. 1%,琼脂1.0%，啤酒酵母2. 2%，山梨酸O. 07%，复合维生素B0. 08%，抗坏血酸(维 C)O. 25%,对羟基苯甲酸乙酯O. 15%，丙酸O. 25%，水67. 5%。所述复合维生素B为粉状制剂，各组分占复合维生素B总量的重量百分含量为烟酞胺30 %，盐酸硫胺素8. O %，核黄素 15.0%,盐酸毗哆醇8.0%,赖氨肌醇O. 20%,叶酸8.0%,泛酸钙30.0%,生物素0.8%。旋幽夜蛾的饲料配制和大规模、继代饲养见实例I。实例3配置IOOOg人工饲料，各组分用量分别为豆饼粉5.4%，玉米粉5.4%，番茄酱 14.4%，琼脂1.2%，啤酒酵母1.8%，山梨酸O. 07%，复合维生素B0. 08%，抗坏血酸(维 C)O. 25%,对羟基苯甲酸乙酯O. 15%，丙酸O. 25%，水71 %。所述复合维生素B为粉状制剂，各组分占复合维生素B总量的重量百分含量为烟酞胺30 %，盐酸硫胺素8. O %，核黄素 15.0%,盐酸毗哆醇8.0%,赖氨肌醇O. 20%,叶酸8.0%,泛酸钙30.0%,生物素0.8%。旋幽夜蛾的饲料配制和大规模、继代饲养见实例I。应用例人工饲料与天然饲料连续饲养3代后对旋幽夜蛾的影响I.实验材料与方法(I)供试虫源5月上旬在北京延庆探照灯幼虫器抓取旋幽夜蛾成虫，放于直径 20cm,高30cm的产卵笼内，用5 %的红糖水补充营养，使成虫产卵，收集虫卵，取初孵幼虫作为供试虫源。采用该虫源连续饲养3代。(2)供试饲料天然饲料采自田间杂草黎科灰菜，使用前用自来水清洗干净，晾干后备用。人工饲料采用实例I、实例2和实例3饲养。⑶实验方法试虫饲养方法参照实例I所述方法，连续饲养3代，饲料分别使用实例I、实例2和实例3饲料，同时用天然饲料灰菜作为对照。每个处理3次重复，每次饲养100头，每代饲养的过程中均记录，幼虫发育历期、幼虫存活率、化蛹率、羽化率、蛹重、产卵量等参数。饲养条件为温度25± I°C，光照时间14L: 10D,相对湿度为65±5%的培养箱中。2.数据统计采用Excel对数据进行初步分析，用SPSS16. O对所得数据进行方差分析和显著性测验。3.实验结果具体实验结果见表I，三种饲料连续饲养3代以后，实例I、实例2和实例3饲料在幼虫发育历期、蛹重、化蛹率、蛹羽化率、卵孵化率、成虫产卵量方面和天然饲料灰菜之间没有显著差异；在幼虫的存活率方面实例2和天然饲料灰菜没有显著性差异，但比实例I和实例3有显著提高，说明实例2可以作为本发明的最优组合。以上实验结果表明用人工饲料连续饲养多代后，旋幽夜蛾未出现退化现象，而且人工饲料和天然饲料的饲养效果相当，用人工饲料饲养成本低，省时省力，可以实现旋幽夜蛾的周年、大批量、继代饲养。
表I人工饲料实例I、II、III和天然人工饲料(灰菜)饲养旋幽夜蛾3个世代效果对比
权利要求
1.一种旋幽夜蛾的人工饲料，其由下列重量百分比的成分制备而成琼脂O. 8-1.2%， 山梨酸 O. 06-0. 09 啤酒酵母(Saccharomyces cerevisae Hansen) I. 8-2. 8 饼粉5.0-7. 5 %，玉米粉5. 0-7. 5 %，番茄酱14-17 %，复合维生素B O. 07-0. 09 %，抗坏血酸0.2-0. 3%，对羟基苯甲酸乙酯 O. 1-0. 2%，丙酸 O. 2-0. 3%,/jC 64-71%。
2.如权利要求I所述的饲料，其特征在于，其由下列重量百分含量成分制备而成琼脂1.O %，山梨酸0.07%，啤酒酵母2.2%，豆饼粉6.2%，玉米粉6.2%，番茄酱16.1%，复合维生素B O. 08%，抗坏血酸O. 25%，对羟基苯甲酸乙酯O. 15%，丙酸O. 25%，水67. 5%。
3.如权利要求I或2所述的饲料，其特征在于，所述复合维生素B由下列重量百分含量成分制备而成烟酞胺25. 0-35. O %，盐酸硫胺素5. 0-10. O %，核黄素12. 0-18. O %，盐酸毗哆醇5. 0-10. 0%，赖氨肌醇O. 15-0. 20%，叶酸5. 0-10. 0%，泛酸钙25. 0-35. 0%，生物素O.5-1. 0%。
4.制备权利要求1-3任意一项所述人工饲料的方法，其包括以下步骤(1)按比例称取豆饼粉、玉米粉和啤酒酵母，混合搅拌后灭菌，作为A组分；(2)按比例称取琼脂和山梨酸，混合后按比例加入水，煮至沸腾，直到琼脂完全溶解，冷却后加入番茄酱搅拌，之后将混合液倒入A组分搅拌，搅拌后液体作为B组分；(3)将B组分倒入蒸锅内加热，边加热边搅拌，至沸腾后冷却；(4)按比例称取复合维生素B、抗坏血酸、对羟基苯甲酸乙酯和丙酸，混合后按比例加入水，溶解并搅拌均匀，作为C组分；(5)将C组分与B组分混合，得到旋幽夜蛾幼虫的人工饲料。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(I)所述中灭菌温度为124-126 ，灭菌时间为30-35min。
6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述琼脂和山梨酸混合液冷却温度为60-65°C,所述琼脂和山梨酸总重量与水的重量百分比为I : 30。
7.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，将B组份倒入蒸锅内加热2-3min,取出搅拌，再加热2_3min,取出搅拌，再加热3_5min,之后冷却；冷却温度为 60-65。。。
8.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述复合维生素B、抗坏血酸、 对羟基苯甲酸乙酯和丙酸的总重量与水的重量百分比为I : 30。
9.如权利要求I或2所述的饲料在饲养鳞翅目中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，具体步骤如下(1)成虫-卵将羽化后的成虫雌雄配对,放到产卵笼内进行交配产卵,产卵笼内悬挂干净纱布，供收集虫卵；用脱脂棉浸泡红糖水放置在培养皿中，供成虫补充营养；每日更换脱脂棉和红糖水；成虫产卵后，每日更换纱布；饲养温度24-26°C，光照时间14L:10D，相对湿度为60-70% ；(2)卵-初孵幼虫将产于纱布上的卵，放入保鲜袋中，吹气使保鲜袋有空气进入，封口，放入温度24-26°C，光照时间14L: 10D,相对湿度为60-70 %的光照培养箱内，直至幼虫孵化；(3)初孵幼虫-2-3龄幼虫用权利要求1-3任意一项所述的旋幽夜蛾人工饲料用手术刀片切成小块，放入一次性纸杯中；把初孵幼虫抖落到白纸上，然后用毛笔轻轻挑取，放入纸杯中，每个纸杯放20头，纸杯上部放一层保鲜膜，保鲜膜上用昆虫针扎上小孔，最后用皮筋封口 ；饲养温度24-26°C，光照时间14L:10D，相对湿度为60-70% ；(4)3龄幼虫-化蛹幼虫达到3龄时，用消毒后的镊子把每个纸杯20头的幼虫分成每个纸杯4-5头，加一次饲料，幼虫5龄时再加一次饲料，为了使幼虫化蛹保持干爽的环境，5 龄以后纸杯用纱布封口，直到昆虫化蛹；饲养温度24-26°C，光照时间14L:10D，相对湿度为 60-70% ；(5)化蛹-成虫用消毒后的镊子把化蛹后的旋幽夜蛾蛹挑出，放入纸杯中，每个纸杯放蛹20头，用纱布封口，直到成虫羽化，饲养温度24-26°C，光照时间14L:10D，相对湿度为 70-80% ；(6)幼虫孵化后，继续按照上述步骤(I)、(2)、(3)、(4)、(5)循环操作、继代饲养，直至饲养结束。
全文摘要
本发明提供了一种旋幽夜蛾的人工饲料，其由下列重量百分含量成分制备而成琼脂0.8-1.2％，山梨酸0.06-0.09％，啤酒酵母1.8-2.8％，豆饼粉5.0-7.5％，玉米粉5.0-7.5％，番茄酱14-17％，复合维生素B0.07-0.09％，抗坏血酸(维C)0.2-0.3％，对羟基苯甲酸乙酯0.1-0.2％，丙酸0.2-0.3％，水64-71％。本发明还提供了制备所述人工饲料的方法和应用。本发明的人工饲料制备成本低，操作简单，实用性强。本发明的人工饲料为旋幽夜蛾的规模化生产提供了必备的条件，减轻了自然饲料饲养时的污染问题，解决了旋幽夜蛾周年、继代饲养问题。为进一步开展旋幽夜蛾生物学、遗传学、毒理学研究提供生理指标相同的虫源奠定了基础。
文档编号A23K1/16GK102578424SQ20121006725
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月14日 优先权日2012年3月14日
发明者张云慧, 张方梅, 张智, 彭赫, 殷新田, 程登发 申请人:中国农业科学院植物保护研究所