专利名称：治疗根结线虫的印楝素水溶剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及了一种农药，特别是涉及治疗根结线虫的印楝素水溶剂及其制备方法。
背景技术：
目前已知危害蔬菜的线虫主要有高弓根结线虫、花生根结线虫、北方根结线虫及南方根结线虫。线虫寄主范围广泛，常危害瓜类、茄果类、豆类及萝卜、葫萝卜、莴苣、白菜等30多种蔬菜，还能传播一些真菌和细菌性病害。根结线虫主要危害各种蔬菜的根部,表现为侧根和须根较正常增多，并在幼根的须根上形成球形或圆锥形大小不等的白色根瘤，有的呈念珠状。被害株地上部生长矮小、缓慢、叶色异常，结果少，产量低，甚至造成植株提早死亡。传统的根结线虫的防治方法包括轮作防病、抗线虫品种培育、电防治法、生物防治及杀线虫药剂的使用。轮作防虫线虫发生多的田块，改种抗、耐虫作物如禾木科、葱、蒜、韭菜、辣椒、甘蓝、菜花等或种植水生蔬菜，可减轻线虫的发生。轮作防病被广泛使用，但对一些特殊经济作物或特定地区无法达到合理轮作的要求，具有较大的局限性，同时也不适用于寄主范围较宽的根结线虫的防治
抗线虫品种的培育常规抗病育种由于存在两方面的问题而进展缓慢，一是利用单一抗性基因使得不受抗性影响的线虫大量繁殖而发展成为新的病害，或造成线虫小种变异，在控制大豆胞囊线虫方面同样面临这样的问题；二是抗源材料匮乏使常规育种满足不了生产上的需要，而利用现代生物技术进行抗线虫育种的工作也尚处于探索阶段。电防治法采用物理植保技术可以有效预防植物全生育期病虫害，其中根结线虫病可采用土壤电消毒法或土壤电处理技术进行防治。根结线虫对电流和电压耐性弱，采用3DT系列土壤连作障碍电处理机在土壤中施加DC30-800伏、电流超过50A/ m2就可有效杀灭土壤中的根结线虫。化学药剂防治化学防治是病害综合防治中的主体，在根结线虫防治中仍占有重要地位。化学杀线虫药剂由于可收到立竿见影的预期效果，在根结线虫的防治上被广泛使用，但化学药剂的长期使用带来了一系列的副作用，如破坏生态平衡、造成次要病害猖獗、药剂残留造成水源土壤之污染、引起人畜中毒、抗性丧失等。生物防治根结线虫生防资源是指它们在自然界的所有天敌生物，包括食线虫真菌、专性寄生细菌、根际细菌、放线菌、病毒、立克次氏体、原生动物、水熊、扁虫、螨类、跳虫以及捕食性线虫等。在众多的天敌生物中，它们对线虫的作用机制各不相同，总体上分为捕食、寄生、拮抗或毒杀等三类。但由于生防菌株受到复杂的土壤生态因子的影响，生防菌剂防效的稳定性仍然得不到保证，其原因一方面是缺乏高效稳定的生防菌株，另一方面是对生防菌施入土壤后的许多生态学问题缺乏了解。因此，根结线虫生物防治必须利用现代生物技术筛选构建高效、稳定、多功能的生产菌株，同时加强生防菌定殖、消长规律及土壤抑菌作用等生态学问题的研究，只有彻底解决了这些问题，根结线虫的生物防治才有望取得突破性的进展，才能发挥生物防治在根结线虫综合治理中的重要作用。另一方面，现在市场上销售的生物农药产品名目繁多，如苏云金杆菌杀虫剂、农用抗生素、棉铃虫NPV、杀虫真菌剂等。生物农药其中也含有化学成分，是生物与化学成分的有机结合。所以对土壤也存在一定危害。印楝素的特点印楝(Azadirachta indica A. Juss)系楝科楝属乔木,广泛种植于热带、亚热带地区。原产于緬甸和印度，在70多个国家有分布和种植，以印度等亚洲国家产量最大。印楝被美国农业部誉为“可解决全球问题之树”。迄今为止，人们已从印楝种仁、树皮、果中已发现了 100多种化合物，至少有70种化合物具有生物活性，它们为二萜类、三萜类、戊三萜类和非萜类化合物。主要为印度苦楝子素、苦楝三醇和印楝素等，其中最重要的活性物质是印楝素，印楝素对害虫的作用机制主要是使昆虫拒食、忌避及抑制昆虫生长发 育，干扰害虫的内分泌，使幼虫不能正常蜕皮和化蛹而导致害虫死亡，具有害虫不易产生抗药性等特点。印楝素杀虫剂是世界公认的广谱、高效、低毒、易降解、无残留、选择性好、无污染的高效的环境友好新型杀虫剂。试验证明，印楝对防治10目400多种农林、仓储和卫生害虫，特别是对鳞翅目、鞘翅目等害虫有特效，而对人畜和周围环境无任何污染。目前印楝素制剂为水乳剂，印楝素水乳剂存在如下技术问题印楝素水乳剂是用水作为介质代替大部分或全部有机溶剂，通过向体系提供机械能，在表面活性剂的作用下，制得液滴直径2微米，外观呈乳白色的液体制剂。其在使用过程中存在一些问题，水乳剂中存在的一些易燃、易爆、有毒有机溶剂，如二甲苯的使用，严重污染环境，同时对人和动物直接构成危害。另外，水乳剂在使用时需要添加化学试剂来激活其中的活性成分，化学试剂对人的皮肤有较低的毒性。并且，在长期贮存时，难以稳定。
发明内容
本发明就是为了解决上述技术问题，而提供一种治疗根结线虫的印楝素水溶剂及其制备方法，本发明印楝素水溶剂具有杀虫高效、土壤改良、易降解、无残留、无抗药性、稳定性好的特点。为了解决上述技术问题，本发明是通过下述技术方案实现的
治疗根结线虫的印楝素水溶剂，它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素A0. 0045-0. 005 份，印楝素 B 0. 08-0. 12 份，印楝素 C 0. 14-0. 16 份，水 0. 74-0. 75 份。所述的治疗根结线虫的印楝素水溶剂，它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素A0. 0048份，印楝素B 0. I份，印楝素C 0. 15份，水0. 7452份。所述的治疗根结线虫的印楝素水溶剂的制备方法如下取符合所述重量份数的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量份数的水中搅拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。由于采用上述技术方案，使得本发明具有如下特点和效果
它改善土壤，培肥地力改善土壤的微生态系统，促进土壤团粒结构的形成，增强土壤的透气性，提高土壤的保水保肥能力；提高农作物产量，改善品质能够提高农作物产量，改善产品品质，如外观、色泽、口感、营养成分、耐贮性；增强免疫，提高抗性增强作物的抗旱、抗涝、抗冻能力，抑制病原微生物及虫卵的生长繁育，提高作物的抗性，可减缓害虫的抗药性；绿色环保，天然有机本品高效、不污染环境及土壤、易降解、无残留、无污染是生产绿色、有机农产品理想肥料；其稳定性好，易于储存；
本发明的作用机理印楝素能降低昆虫的血细胞数量、降低血淋巴中蛋白质含量、降低血淋巴中海藻糖和金属阳离子浓度，能抑制昆虫中肠酯酶和脂肪体中蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、磷酸酶和葡萄糖酶的活性，降低昆虫的取食率和对食物的转化利用率，能影响昆虫的正常呼吸节律，降低昆虫脂肪体中DNA和RNA含量，降低雌虫卵巢、输卵管、受精囊中蛋白质、糖原和脂类的含量及一些酶的活性，对雄虫生殖系统有影响，使昆虫的脑、咽侧体、心侧体、前胸腺、脂肪体等发生病变，影响昆虫体内激素平衡，从而干扰昆虫生长发育。印楝制剂能较好地满足了目前农药开发的要求，如高效、低毒、无残留、选择性好等。印楝中活性成分是自然存在的物质，在与自然界的长期演化过程中，自然界对印楝中的 各种化学成分早已形成了完善的降解机制，其活性成分在自然界中无累积，印楝素是复杂的大分子物质，分子结构中有许多能够发生反应的官能团，易分解，对环境安全，特别适用于蔬菜、水果和茶叶等直接食用的作物，且对作物不产生药害。印楝制剂主要具有抑制生长发育、拒食、忌避和不育等作用方式，与常规农药的杀虫作用机理差异很大，活性成分复杂，有利于克服害虫抗药性，对非靶标生物安全，对哺乳动物毒性低，并有明显的选择性。印楝素及印楝制剂具有良好的环境相容性，并具有环境污染治理功能，如清除Cu2+、Zn2+、Cd2+等，并且随着科技的发展，印楝素及印楝杀虫剂在农药、卫生用药、日化和环境治理等领域具有更加广泛的应用。
具体实施例方式 下面结合实施例对本发明进行进一步描述。以下实施例仅为本发明的几个具体实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为常规方法。下述的实施例中的百分含量如无特别说明，均为质量百分含量。实施例I :
治疗根结线虫的印楝素水溶剂，它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素AO. 0045g，印楝素B 0. 08 g，印楝素CO. 16 g，水0.74 g。治疗根结线虫的印楝素水溶剂的制备方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中搅拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。实施例2:
治疗根结线虫的印楝素水溶剂，它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素AO. 005g，印楝素B 0. 12 g，印楝素CO. 14 g，水0.75 g。治疗根结线虫的印楝素水溶剂的制备方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中搅拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。实施例3
治疗根结线虫的印楝素水溶剂，它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素AO. 0045g，印楝素B 0. 12 g，印楝素CO. 14 g，水0.75 g。治疗根结线虫的印楝素水溶剂的制备方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中搅拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。
实施例4
治疗根结线虫的印楝素水溶剂，它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素AO. 005g，印楝素B 0. 12 g，印楝素CO. 15 g，水0.74 g。治疗根结线虫的印楝素水溶剂的制备方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中搅拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。实施例5
治疗根结线虫的印楝素水溶剂，它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素AO. 0048g，印楝素B 0.1 g，印楝素C 0. 15 g，水0.7452 g。治疗根结线虫的印楝素水溶剂的制备方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中搅拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。实施例6
治疗根结线虫的印楝素水溶剂，它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素A0.0047g，印楝素B 0. 11 g，印楝素C 0.155 g，水0.748 g。治疗根结线虫的印楝素水溶剂的制备方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中搅拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。实施例I
治疗根结线虫的印楝素水溶剂，它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素AO. 0046g，印楝素B 0. 09 g，印楝素C 0.145 g，水0.744 g。治疗根结线虫的印楝素水溶剂的制备方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中搅拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。本发明印楝素水溶剂治疗根结线虫的试验数据如下
试验I
I.材料与方法 I. I供试材料
印楝素水溶剂(按本发明实施例1-7中的任意一种方法制得)，印楝素水乳剂(云南中科生物产业有限公司生产)。供试植物番茄、黄瓜、芹菜、草莓 I. 2方法与步骤
试验在内蒙古赤峰市宁城县大城子镇蔬菜试验基地中进行，此地块根结线虫的发病率为100%。于2010年12月上旬进行芹菜育苗；2011年2月下旬进行黄瓜、番茄育苗，试验设3个处理，处理I施入印楝素水溶剂，处理II施入印楝油水乳剂，对照(CK)浇入清水。设3次重复，共27个小区，每9个小区栽植一种作物，设芹菜、黄瓜、番茄的种植小区分别为A、B、C，则各处理分别为A丨、A u、Acx ;B丨、B u、Bcx ;C丨、C u、Q。待芹菜苗龄70天左右时，黄瓜苗长到2片真叶时，番茄苗龄30d左右，3 4片叶时，移栽入大棚内。芹菜畦距70cm，畦高13cm,行距35cm,株距30cm,每睦栽2行。番爺和黄瓜米用槽式栽培方式定植,栽培槽的长宽高为700cmX65cmX 30cm,米用完全随机区组设计,每槽定植2行,每行20株,株距30cm,大行距60cm，小行距50cm。栽培管理与一般生产相同。
栽植15天、35天时分别向土壤中施入I :300比例稀释溶液250ml的印楝素水溶剂和印楝素水乳剂，对照浇入清水。5天后，取主根附近5-lOcm，土壤深度5-15cm进行镜检，测量土壤中矿质元素的变化情况，同时计算防治效果。栽植20天、40天时，拔出番茄秧进行检查，同时观察地上部分的生长状况，统计作物产量。采集成熟期番茄、黄瓜、芹菜鲜样，分析可溶性糖、V。含量。
2.结果与分析
印楝素水乳剂和印楝素水溶剂对土壤根结线虫都具有良好的防治效果，印楝素水溶剂防治根结线虫的效果较好。A I 20天时，幼虫相对防效为64. 92%, 40天时，幼虫相对防效为83. 14%。A n 20天时，幼虫相对防效为52. 64%，40天时，幼虫相对防防效为66. 71%。Ack未施用印楝素，根结线虫的发病率为97. 05%。B I 20天时，幼虫相对防效为75. 53%，40天时，幼虫相对防效为95. 24%。B n 20天时，幼虫相对防效为64. 08%, 40天时，防效为73. 29%。Bck未施用印楝素，根结线虫的发病率为98. 36%。C ! 20天时，幼虫相对防效为83. 24%，40天时，幼虫相对防效为97. 12%。C u 20天时，幼虫相对防效为71. 69%，40天时，防效为79. 25%。Cck未施用印楝素，根结线虫的发病率为98. 46%。印楝素水溶剂的治疗速度相对较快。在栽植40天时，除了 A1处理中发现有少量的根结线虫以外，处理B I、C ,几乎未发现根结线虫，而处理Au、Bh、C u均发现根结线虫存在，而且植株生长较处理I差。对照AeK、Bq^Cq5的地下部分全部出现根结，植株地上部分叶片皱缩萎蔫，植株矮小，对照AeK、Bck畸形果现象严重。试验表明施用印楝素水溶剂后，土壤的物理性质发生了变化，随着印楝素水溶剂施用次数不断增加，土壤中水溶性盐含量逐渐下降，A I的水溶性盐含量低于A11, B i低于B n,且均低于对照。土壤矿质元素是植株生长发育不可缺少的营养元素，其丰缺不仅影响植株的光合作用、呼吸作用、固氮作用以及蛋白质和核酸代谢等，而且影响抗病性及对不良环境的抵抗力。本试验结果表明，施用印楝素水溶剂能够改变土壤中矿质元素的含量。同时对土壤矿质元素的影响较大，其中AmBmC1中水溶性钙、水溶性镁、有效铁、有效铜含量均高于对照。土壤中矿质元素的改变，可以增强植株的吸附特性，使其更有利于植株的生长发育，对果实的品质和产量有较大的影响。在对芹菜、番茄、黄瓜三种蔬菜的试验处理过程中，在植株生长期间，施用印楝素水溶剂的植株地上部分生长良好，茎粗较A n、B u、C u明显增加，同时叶片颜色加深，叶绿素含量增加较为明显，A丨与Au、B丨与Bh、C丨与C11间差异较大。在产量上，施用印楝素水溶剂与施用印楝素水乳剂的接近。在品质上，果实发育阶段，印楝素水溶剂的施用，促进了果实内含营养物质的转化与合成，增加了果实中V。和可溶性糖的含量，增强了果实的口感，明显改善了果实的商品性状，果实大小适中、皮色鲜艳、着色均匀、肉厚而饱满。印楝素水溶剂治疗根结线虫不容易产生抗药性，它是由天然植物印楝树的果实提取而成，长期使用不仅对根结线虫有良好的治疗效果，而且对土壤本身有很好的改良作用，能够促进土壤团粒的形成，增强土壤的透气性，改善土壤矿质元素含量，提高土壤保水保肥的能力，从根本上改变农作物的生长环境，同时改变果实的品质。印楝素水溶剂治疗根结线虫在一年之内都不会复发，具有较好的持效期。而印楝素水乳剂是化工合成的，长期使用此类产品，有些害虫会产生抗药性，对植物起不到根本的防治作用。
试验 II
I.材料与方法 I. I供试材料
印楝素水溶剂(按本发明实施例1-7中的任意一种方法制得)，印楝素水乳剂(云南中科生物产业有限公司生产)。供试植物草莓 I. 2方法与步骤
试验在辽宁省凤城市白旗镇刁窝村草莓试验基地中进行，此地块根结线虫的发病率为100%，前茬作物为草莓。试验设3个处理，处理I施入印楝素水溶剂，处理II施入印楝油水乳剂，对照(CK)浇入清水。于2011年8月中旬进行定植，床高10-15厘米，垄床面宽60 —70厘米，垄床间距20 - 30厘米，双行栽植，行距为35 - 45厘米，穴距25 — 30厘米。设5次重复，每垄为一个小区，共15个小区，栽培管理与一般生产相同。定植15天、35天、55天时分别向土壤中施入I :300比例稀释溶液250ml的印楝素水溶剂和印楝素水乳剂，对照浇入清水。5天后，取主根附近5-lOcm，土壤深度5-15cm进行镜检，测量土壤物理性质的变化情况，同时计算防治效果。定植20天、40天、60天时，拔出番茄秧进行检查，同时观察地上部分的生长状况，统计作物产量。采集成熟期草莓鲜样，分析可溶性糖、V。含量。2.结果与分析
印楝素水乳剂和印楝素水溶液对土壤根结线虫都具有良好的防治效果，印楝素水溶剂防治根结线虫的效果较好。定植20天时，幼虫相对防效为62. 64%, 40天时，幼虫相对防效为73. 20%，60天时，幼虫相对防效为95. 76%。施用印楝素水乳剂20天时，幼虫相对防效为55. 42%，40天时，幼虫相对防效为61. 93%，60天时，幼虫相对防效为86. 17%。未施用印楝素的，根结线虫的发病率为98. 13%。印楝素水溶剂的治疗根结线虫的速度相对较快。在定植20天、40天时，处理I中发现有少量根结线虫存在，60天时，未发现根结线虫存在。而定植60天时，处理II中仍发现有少量的根结线虫存在。另外，印楝素水溶剂中含有多种活性物质，azadirachtin、protolimonoids、limonoids、tetranortriterpenoids、pentanortriterpenoids、hexanortriterpenoids和一些nonterpenoid,不仅对土壤根结线虫这一种虫害有很好的防治效果,而且对多种不同生活习性的害虫，如红蜘蛛、粉虱、蚜虫、水蜡虫、牧草虫、斑潜蝇有拒食、忌避、触杀、胃毒、抑制生长发育、破坏昆虫繁育等作用。同时，对土壤中有害微生物也产生一定影响，细菌、真菌数量的增加是土壤致病性增强和土壤退化的表现，施用印楝素水溶剂后，土壤细菌、真菌、放线菌均发生变化，随着印楝素水溶剂施用次数的增加，抑制了真菌、细菌和放线菌数量的生长，其数量均低于处理II和对照。印楝素水溶剂与其他农药相比，可以改善土壤微生态环境。
试验表明施用印楝素水溶剂后，土壤的物理性质发生了变化，随着印楝素水溶剂的施用次数不断增加，土壤容重和比重较施用印楝素水乳剂的小，定植60天时，土壤容重为I. 31 g-cm-3,比重为2. 55，土壤的透气性逐渐增加。同时，随着土壤孔隙度的逐渐增加，土壤的含氧量也逐渐增加，有效改善了土壤板结状况和土壤疏松性。
土壤有机质是土壤固相部分的重要组成成分，它对土壤形成、土壤肥力、环境保护及农林业可持续发展等方面都有着极其重要的意义。施用印楝素水溶剂能够改变土壤中有机质的含量。其中定植20天、40天、60天时，施用印楝素水溶剂和印楝素水乳剂的土壤有机质含量差异不显著，均高于对照。施用印楝素水溶剂能提高草莓产量和果实品质，与对照相比，处理I和处理II的增产幅度可以达到18. 7%和10. 4%。印楝素水溶剂处理草莓畸形果少，而且果实香味浓郁，提高了草莓果实可溶性固形物的含量、维生素c和可溶性糖含量，提高了草莓的口感。施用印楝素水溶剂可以有效防治草莓根结线虫，对土壤本身有很好的改良作用，能够改善土壤理化性质，增强土壤的有机质含量，改善土壤微生态环境，提高土壤保水保肥 的能力，促进草莓植株生长，显著提高草莓产量和品质。补充稳定性结果
在0-30°C贮存条件下，避免阳光直射，本发明印楝素水溶剂可以保存24个月，而印楝素水乳剂仅保存12个月。
权利要求
1.治疗根结线虫的印楝素水溶剂，其特征在于它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素AO. 0045-0. 005份，印楝素B O. 08-0. 12份，印楝素C O. 14-0. 16份，水O. 74-0. 75 份。
2.根据权利要求I所述的治疗根结线虫的印楝素水溶剂，其特征在于它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素A0. 0048份，印楝素B O. I份，印楝素C O. 15份，水O. 7452 份。
3.权利要求I或2所述的治疗根结线虫的印楝素水溶剂的制备方法，其特征在于取符合所述重量份数的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量份数的水中搅拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。
全文摘要
本发明公开了一种农药，特别是涉及治疗根结线虫的印楝素水溶剂及其制备方法。治疗根结线虫的印楝素水溶剂，它是由下述原料按所述重量份数制备而成印楝素A0.0045-0.005份，印楝素B0.08-0.12份，印楝素C0.14-0.16份，水0.74-0.75份。取符合所述重量份数的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量份数的水中搅拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。本发明印楝素水溶剂具有杀虫高效、土壤改良、易降解、无残留、无抗药性、稳定性好的特点。
文档编号A01P7/02GK102626092SQ201210067320
公开日2012年8月8日 申请日期2012年3月15日 优先权日2012年3月15日
发明者刘明, 吕洪阳, 周围, 纪明山 申请人:辽宁绿禾农业有限公司