专利名称：一种红掌气生根诱导丛生芽快繁方法
技术领域：
本发明涉及一种植物的繁殖方法，尤其是一种红掌气生根诱导丛生芽快繁方法。
背景技术：
长期以来，红掌一直以叶片、叶柄、茎段为外植体进行组织培养方式繁殖，杜敬然、陈春满、赵斌等人均对以上材料为外植体，诱导愈伤组织、丛生芽分化等技术做了报道，但存在愈伤组织长期继代培养后不生长或不分化丛生芽或只生根等现象。红掌气生根的研究鲜少报道，仅王桂兰、陈超等对红掌气生根再生团块体系建立做了报道气生根再生团块及丛生芽诱导培养基均采用6-BA、2，4-D，但丛生芽增殖系数低、生根炼苗程序复杂，不适用于工厂规模化育苗。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种红掌气生根诱导丛生芽快繁方法，可以客服现有技术中再生团块诱导丛生芽增殖系数较低及生根培养方法复杂的缺点，繁殖速度快、节约生产成本并适用于工厂规模化育苗。为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是一种红掌气生根诱导丛生芽快繁方法，该方法包括以下步骤
1)选取外植体取红掌组培苗的气生根为外植体；
2)再生团块诱导培养将选取的外植体接种于诱导培养基上，置于温度26±1°C、湿度80±5%、光照14h、光照强度1800-20001x的培养室内，20天后形成愈伤团块，继续通过40天的培养得到再生团块；
3)丛生芽诱导培养将诱导出的再生团块分割成Icm2的团块，接入丛生芽诱导培养基上，置于温度24±1°C、湿度80±5%、光照14h、光照强度2000-25001x的培养室内，30天后再生团块上分化出丛生芽，红掌组培种苗开始形成；
4)丛生芽增殖继代将诱导出的丛生芽团分割成3-5个芽的芽丛，接入丛生芽增殖继代培养基上，置于温度24± 1°C、湿度80±5%、光照14h、光照强度2000-25001x的培养室内，每30-40天继代转管一次，直至长成3-5cm带有气生根的的粗壮红掌幼苗；
5)炼苗移栽将长至3-5cm带有气生根的的粗壮红掌幼苗转入炼苗室，保持室内温度24±1°C、湿度85±5%、光照12h、光照强度3000-35001x，3-5天后，打开瓶口取出幼苗，洗净红掌幼苗气生根上的培养基，吸干红掌幼苗上的水，将红掌幼苗根浸入50%多菌灵800倍液中浸泡5min，栽入穴盘中，浇施杀菌水，2个月后移栽上盆，即培养成由红掌气生根诱导丛生芽途径繁殖的组培苗。步骤I)中选取的气生根为经长期继代培养的愈伤组织或丛生芽上形成的气生根。步骤2)所用诱导培养基为 1/2MS基本培养基+ TDZ I mg L_1+NAA0. 5 mg L—1+蔗糖30g L-1+琼脂粉6g L-1。步骤3)所用丛生芽诱导培养基和步骤4)所用的丛生芽增殖继代培养基为1/2MS基本培养基 + 6-BA0. 5 mg L^+NAAO.1 mg L—1+ 蔗糖 30g L—1+ 琼脂粉 6g L—1。本发明克服了现有技术中再生团块诱导丛生芽增殖系数较低及生根培养方法复杂的缺点，将采用激素TDZ、NAA诱导红掌气生根再生丛生芽增殖系数高、生根炼苗程序简化、气生根再生团块比不同材料诱导的愈伤组织分化能力和抗衰老能力强，达到繁殖速度快、节约生产成本并适用于工厂规模化育苗的目的。本发明提供的一种红掌气生根诱导丛生芽快繁方法，有益效果如下1、直接选取红掌组培苗的气生根为外植体，不需消毒，减少污染。2、采用气生根诱导出再生团块比叶片、叶柄诱导的愈伤组织分化丛生芽的数量多、速度快。3、继代增殖次数不影响丛生芽的分化，且能保持品种的遗传特性。4、直接选取带有气生根的红掌幼苗炼苗移栽成活率高，可达85%。5、将带气生根的幼苗直接炼苗移栽，减少了生根及壮苗培养的过程，缩短了红掌整个组培周期(组培周期是指在试验室的时间，即从根诱导到苗生根的整个时间，不包括室外炼苗的时间)，由原来的130天缩短至100天，降低了生产成本，适用于工厂化规模育苗的目的。
具体实施例方式一种红掌气生根 诱导丛生芽快繁方法，该方法包括以下步骤
1)选取外植体取红掌组培苗较粗壮、厚实肉质的气生根为外植体，可直接选取为经长期继代培养的愈伤组织或丛生芽上形成的气生根；
2)再生团块诱导培养将选取的外植体接种于诱导培养基上，置于温度26±1°C、湿度80±5%、光照14h、光照强度1800-20001x的培养室内，20天后形成愈伤团块，继续通过40天的培养养愈伤团块由乳白色转变淡绿色且逐渐增大得到再生团块；
3)丛生芽诱导培养将诱导出的再生团块分割成Icm2的团块，接入丛生芽诱导培养基上，置于温度24±1°C、湿度80±5%、光照14h、光照强度2000-25001x的培养室内，30天后再生团块上分化出丛生芽，红掌组培种苗开始形成；
4)丛生芽增殖继代将诱导出丛生芽的再生团块分割成3-5个芽/丛，置于丛生芽增殖培养基上培养，每30-40天继代转管一次，直至长成3-5cm带有气生根的的粗壮红掌幼苗；
5)炼苗移栽将长至3-5cm带有气生根的粗壮红掌幼苗转入炼苗室，保持室内温度24± 1°C、湿度85 ±5%、光照12h、光照强度3000-3500lx，3-5天后，打开瓶口取出幼苗，洗净红掌幼苗气生根上的培养基，吸干红掌幼苗上的水，将红掌幼苗根部浸入50%多菌灵800倍溶液中浸泡5min，栽入珍珠岩和泥炭的质量比为3:1的基质穴盘中，浇施杀菌水，2个月后移栽上盆，即培养成由红掌气生根诱导丛生芽途径繁殖的组培苗。步骤2)所用诱导培养基为1/2MS基本培养基+ TDZ I mg L_1+NAA0. 5 mg L—1+蔗糖30g L-1+琼脂粉6g L-1。步骤3)所用丛生芽诱导培养基和步骤4)所用的丛生芽增殖继代培养基为1/2MS基本培养基 + 6-BA0. 5 mg L^+NAAO.1 mg L—1+ 蔗糖 30g L—1+ 琼脂粉 6g L—1。
权利要求
1.一种红掌气生根诱导丛生芽快繁方法，其特征在于该方法包括以下步骤 1)选取外植体取红掌组培苗的气生根为外植体； 2)再生团块诱导培养将选取的外植体接种于诱导培养基上，置于温度26±1°C、湿度80±5%、光照14h、光照强度1800-20001x的培养室内，20天后形成愈伤团块，继续通过40天的培养得到再生团块； 3)丛生芽诱导培养将诱导出的再生团块分割成Icm2的团块，接入丛生芽诱导培养基上，置于温度24±1°C、湿度80±5%、光照14h、光照强度2000-25001x的培养室内，30天后再生团块上分化出丛生芽，红掌组培种苗开始形成； 4)丛生芽增殖继代将诱导出的丛生芽团分割成3-5个芽的芽丛，接入丛生芽增殖继代培养基上，置于温度24± 1°C、湿度80±5%、光照14h、光照强度2000-25001x的培养室内，每30-40天继代转管一次，直至长成3-5cm带有气生根的的粗壮红掌幼苗； 5)炼苗移栽将长至3-5cm带有气生根的的粗壮红掌幼苗转入炼苗室，保持室内温度24±1°C、湿度85±5%、光照12h、光照强度3000-35001x，3-5天后，打开瓶口取出幼苗，洗净红掌幼苗气生根上的培养基，吸干红掌幼苗上的水，将红掌幼苗根浸入50%多菌灵800倍液中浸泡5min，栽入穴盘中，浇施杀菌水，2个月后移栽上盆，即培养成由红掌气生根诱导丛生芽途径繁殖的组培苗。
2.根据权利要求1所述的一种红掌气生根诱导丛生芽快繁方法，其特征在于步骤I)中选取的气生根为经长期继代培养的愈伤组织或丛生芽上形成的气生根。
3.根据权利要求1或2所述的一种红掌气生根诱导丛生芽快繁方法，其特征在于步骤2)所用诱导培养基为1/2MS基本培养基+TDZ I mg L^+NAAO. 5 mg L-1+蔗糖30g L-1+琼脂粉6g L'
4.根据权利要求1或2所述的一种红掌气生根诱导丛生芽快繁方法，其特征在于步骤3)所用丛生芽诱导培养基和步骤4)所用的丛生芽增殖继代培养基为1/2MS基本培养基+6-BAO. 5 mg L ^NAAO.1 mg L :+ 鹿糖 30g .L1+ 琼脂粉 6g L全文摘要
一种红掌气生根诱导丛生芽快繁方法，该方法包括以下步骤1)选取外植体2)再生团块诱导培养；3)丛生芽诱导培养；4)丛生芽增殖；5)炼苗移栽2个月后移栽上盆，即为由红掌气生根诱导丛生芽途径繁殖的组培苗。本发明克服了现有技术中再生团块诱导丛生芽增殖系数较低及生根培养方法复杂的缺点，将采用激素TDZ、NAA诱导红掌气生根再生丛生芽增殖系数高、生根炼苗程序简化、气生根再生团块比不同材料诱导的愈伤组织分化能力和抗衰老能力强，达到繁殖速度快、节约生产成本并适用于工厂规模化育苗的目的。
文档编号A01H4/00GK103053417SQ20121057311
公开日2013年4月24日 申请日期2012年12月26日 优先权日2012年12月26日
发明者胡梅香, 张国禹, 黄桂云, 马晓波, 邱利文, 吴笛, 张海波, 汪磊, 杨兰芳 申请人:中国长江三峡集团公司, 长江三峡生态园林有限公司