一种油棕组培苗生根诱导与促根壮苗培养方法

一种油棕组培苗生根诱导与促根壮苗培养方法
【专利摘要】本发明一种油棕组培苗生根诱导与促根壮苗培养的方法，是在无菌条件下，将油棕无根组培苗常规处理后，转入生根诱导培养基中进行培养，可诱导植株形成根系，然后再转接到促根壮苗培养基中进行促根壮苗培养，可获得根系发达健壮的油棕组培苗完整植株。本发明利用不同的培养基以及培养条件建立了一套可操作性强、生根壮苗周期短、节约成本的油棕组培苗生根诱导与促根壮苗培养技术，可获得健壮发达的根系，可应用于油棕组培苗大规模的高效生产中，为生产高质量油棕组培苗提供技术支撑，促进高效的油棕组培苗商业化生产的发展，具有现实意义。
【专利说明】—种油踪组培苗生根诱导与促根壮苗培养方法
【技术领域】
[0001]本发明属植物组组织培养【技术领域】，涉及一种生根诱导与促根壮苗培养方法，具体是一种油棕组培苗生根诱导与促根壮苗培养方法。
【背景技术】
[0002]油棕(Elaeis guineensis Jacq),棕榈科(Palmae)油棕属多年生单一生长点乔木，热带地区重要油料作物之一，有“世界油王”之美誉。油棕的油脂产量特高，其可作为食用油脂、工业原料、生物能源等，用途比较广泛，市场需求量大而倍受青睐，产业发展迅速，因此世界各地热带亚热带地区竞相引种种植油棕。
[0003]油棕繁育主要通过种子进行，但由于油棕基因普遍为杂合体，其后代遗传性状难以保存亲本优良特性，且居群均一性差，况且油棕只有一个生长点，难以实现传统的无性系繁育。利用叶片等营养器官进行组织培养，所获得的油棕种植材料既保存亲本优良的遗传性状，遗传性状又均一，是解决油棕种苗生产中遗传性状分离和无法实现传统的无性系繁育问题的有效途径。
[0004]生根诱导培养技术是植物组织培养技术中核心技术之一。健壮发达的根系是组培苗炼苗移栽成活的保障，是组培苗商品质量的衡量指标之一，因此高效的生根诱导与培养技术是获得闻质量种苗的关键之一，也是种苗闻商品率的保障之一。

【发明内容】

[0005]本发明目的是提供一种油棕组培苗生根诱导与促根壮苗培养的方法，利用不同的培养基以及培养条件，对油棕组培苗进行生根诱导与壮苗培养，可获得健壮发达的根系，为生产高质量油棕组培苗提供技术支撑，促进高效的油棕组培苗商业化生产的发展，具有现实意义。
`[0006]本发明所采用的技术方案:
[0007]—种油棕组培苗生根诱导与促根壮苗培养的方法，其具体步骤如下:
[0008]1、在无菌条件下，将茎基部直径2mm以上、苗高5cm以上、叶色深绿的健壮油棕无根组培苗常规处理后，转入生根诱导培养基中进行培养，培养条件:温度25~30°C，光照强度800~12001x，每天光照12h ;培养8~10周，可诱导植株形成I~13条、根长0.5~3cm的根系(图1)。所述生根诱导培养基是以WPM为基础培养基，并添加ΝΑΑ0.1~5mg.L'多效唑lmg.L'鹿糖30~60g.L'琼脂7g.L'活性炭lg.171, pH5.6~6.0。
[0009]2、经诱导培养获得根长Icm以上的植株转接到促根壮苗培养基中进行促根壮苗培养，培养条件:温度25~30°C，光照强度2000~30001χ，每天光照16h ;促根壮苗培养30~35天可获得根系发达健壮的油棕组培苗完整植株(图2)。所述促根壮苗培养基是以WPM为基础培养基，并添加蔗糖75g.L_S pH5.6~6.0。本发明优点是:
[0010](I)本发明采用了二段生根诱导培养方法和严格筛选进入生根诱导阶段的无根苗，使培养材料发根时间较短，发根同步性高，根系生长快，种苗健壮。[0011](2)本发明采用植物生长调节物质启动生根后(根长Icm左右)，即转入无植物生长调节物质的液体培养基，避免了组培苗长时间在含较高植物生长调节物质浓度的培养基上生长可能出现的根生长受抑、叶片生长失常等负面影响。
[0012](3)本发明采用固体培养基启动诱导形成长Icm的根后即将苗转到液体培养基实现促根壮苗，新鲜液体培养基中营养充足交流充分，组培苗生长健壮，根系发达。
[0013](4)本发明采用固体培养基启动诱导根形成长Icm后即将苗转到液体培养基实现促根壮苗，可减少固体培养基用量，节约琼脂和生长调节物质用量。种苗在液体培养基中完善发达的根系，不存在固体培养基粘缠根系的现象，缩短种苗出瓶后洗苗时间和减少洗苗对根系的损伤。
[0014]本发明建立了一套可操作性强、生根壮苗周期短、节约成本的油棕组培苗生根诱导与促根壮苗培养技术。通过该技术可获得根系发达健壮的高质量油棕组培苗，可应用于油棕组培苗大规模的高效生产中。
【专利附图】

【附图说明】
[0015]图1为生根诱导培养培养9周后的油棕组培苗的根系。
[0016]图2为促根壮苗培养30天后根系发达的油棕组培苗。
【具体实施方式】
[0017]下面结合实施例，对本发明的【具体实施方式】作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
[0018]实施例一
[0019]1、生根诱导培养基配制:WPM+NAA0.lmg.L-1+多效唑lmg.L-1+蔗糖3g.L-1+琼脂7g.171+活性炭lg.L-1, pH5.6。每支试管分装约25~30ml培养基,加盖后，于1.2Kg/cm3、121 °C饱和蒸汽压力下灭菌20min。
[0020]2、选取茎基部直径2~3mm、苗高5~6cm的健壮油棕叶源体细胞胚再生无根苗200株，切除部分叶片和部分茎段基部组织，在无菌条件下分别转入步骤I)配制的生根诱导培养基中进行培养，培养条件:温度28 士 1°C、光照强度约ΙΟΟΟΙχ、每天光照12h。培养8周。记录数据:生根株数128株,根长为0.5~3cm。生根诱导率64%。
[0021]3、促根壮苗培养基配制:WPM+蔗糖75g.L—1，pH5.6。每支试管分装液体培养基深度约I~2cm,加盖后，于1.2Kg/cm3、121°C饱和蒸汽压力下灭菌20min。同时所述促根壮苗培养基除分装试管外，用三角瓶分装多预备的培养液，以备随根系伸长露出培养液面后续添培养液。
[0022]4、在无菌条件下将在步骤2)中诱导培养的根长Icm以上的苗转到促根壮苗培养液中培养，随根系伸长而适时添加步骤3)配制的新鲜促根壮苗培养液。培养条件:温度为28 士 1°C、光照强度25001x、每天光照16h。促根壮苗培养30天。记录数据:组培苗平均根长5cm，普遍长出一级侧根，形成根系发达健壮的油棕组培苗完整植株。
[0023]实施例二
[0024]1、生根诱导培养基配制:WPM+NAAlmg.L-1+多效唑lmg.L-1+蔗糖60g.L-1+琼脂7g.L-1+活性炭lg.L-1，pH5.6。每支试管分装约25ml培养基，加盖后，于1.2Kg/cm3、121。。饱和蒸汽压力下灭菌20min。
[0025]2、选取茎基部直径5~6mm、苗高8~IOcm的健壮油棕叶源体细胞胚再生无根苗200株，切除部分叶片和部分茎段基部组织后，在无菌条件下分别转入步骤I)配制的生根诱导培养基中进行培养，培养条件:温度26 士 1°C、光照强度约llOOlx、每天光照12h。培养10周。记录数据:生根株数184株,根长为0.5~3cm。生根诱导率92%。
[0026]3、促根壮苗培养基配制:WPM+蔗糖75g.L—1，pH5.6。每支试管分装液体培养基深度约I~2cm,加盖后，于1.2Kg/cm3、121°C饱和蒸汽压力下灭菌20min。同时所述促根壮苗培养基除分装试管外，还用三角瓶分装多预备的培养液，以备随根系伸长露出培养液面后续添培养液。
[0027]4、在无菌条件下将在步骤2)中诱导培养的根长Icm以上的苗转到促根壮苗培养液中培养，随根系伸长而适时添加步骤3)配制的新鲜促根壮苗培养基。培养条件:温度为27 士 rC、28001x，每天光照16h。促根壮苗培养33天。记录数据:组培苗平均根长8cm，普遍长出一级侧根，部分长出二级侧根，形成根系发达健壮的油棕组培苗完整植株。
[0028]实施例三
[0029]1、生根诱导培养基配制:WPM+NAA5mg.l-1+多效唑lmg.L—1+蔗糖60g.l-1+琼脂7g.L-1+活性炭lg.L-1，ρΗ6.0。每支试管分装约25ml培养基，加盖后，于1.2Kg/cm3、121。。饱和蒸汽压力下灭菌20min。
[0030]2、选取茎基部直径5~6mm、苗高8~IOcm的健壮油棕叶源体细胞胚再生无根苗200株，切除部分叶片和部分茎段基部组织后，在无菌条件下分别转入步骤I)配制的生根诱导培养基中进行培养，培养条件--温度27 士 2°C、光照强度约9001x，每天光照12h。培养9周。记录数据:生根株数173株，根长0.5~3cm。生根诱导率86.5%。
[0031]3、促根壮苗培养基配制:WPM+蔗糖75g.L—1，pH5.6。每支试管分装液体培养基深度约I~2cm,加盖后，于1.2Kg/cm3、121°C饱和蒸汽压力下灭菌20min。同时所述促根壮苗培养基除分装试管外，还用三角瓶分装多预备的培养液，以备随根系伸长露出试管中培养液后续添培养液。
[0032]4、在无菌条件下将在步骤2)中诱导培养的根长Icm以上的苗转到促根壮苗培养液中培养，随根系伸长而适时添加步骤3)配制的新鲜促根壮苗培养基。培养条件:温度为27 士 2°C、22001x、每天光照16h。促根壮苗培养32天。记录数据:组培苗平均根长8cm，普遍长出一级侧根，部分长出二级侧根，形成根系发达健壮的油棕组培苗完整植株。
[0033]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本【技术领域】的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【权利要求】
1.一种油棕组培苗生根诱导与促根壮苗培养的方法，其特征在于，具体步骤如下:1)、在无菌条件下，将茎基部直径2mm以上、苗高5cm以上、叶色深绿的健壮油棕无根组培苗常规处理后，转入生根诱导培养基中进行培养，培养条件:温度25~30°C，光照强度800~12001x，每天光照12h ;培养8~10周，可诱导植株形成根系；所述生根诱导培养基是以WPM为基础培养基，并添加ΝΑΑ0.1~5mg.L_\多效唑lmg.L_\蔗糖30~60g.L_\琼脂7g.L'活性炭 lg.L-1, pH5.6 ~6.0 ;2)、经诱导培养获得根长Icm以上的植株转接到促根壮苗培养基中进行促根壮苗培养，培养条件:温度25~30°C，光照强度2000~30001x，每天光照16h ;促根壮苗培养30~35天可获得根系发达健壮的油棕组培苗完整植株；所述促根壮苗培养基是以WPM为基础培养基，并添加 鹿糖75g.L4, pH5.6~6.0。
【文档编号】A01H4/00GK103688858SQ201310692066
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月17日 优先权日:2013年12月17日
【发明者】潘登浪, 邹积鑫, 曾宪海, 林位夫, 姚行成, 张希财, 周立军, 王军, 刘钊, 李炜芳 申请人:中国热带农业科学院橡胶研究所